UPLC-MS/MS is an appealing alternat

UPLC-MS/MS is an appealing alternative to the GC assays due to the fact that sample preparation may be more straightforward than in GC–MS techniques [29] and because the UPLC separation method is more rapid than the GC method [14]. The UPLC–MS method presented for determination of nicotine concentrations in air is simple and rapid. The method validation gave the following values: 4.6% RSD precision and 8.0% RSD for accuracy. These results are comparable with the published LC methods for quantification of nicotine (and cotinine) although these analytical procedures were used for quantification of these compounds in serum [27] or urine [28].

This study shows that tobacco smoke is present in all public places examined from Timisoara. The study also demonstrated that in buildings where smoking is not allowed, levels of nicotine in the air are lower than in places where smoking is permitted but they are not zero. This implies that policies of having both smoking and non-smoking places are not entirely useful.

The nicotine concentrations found in pubs and restaurants where the smoking was permitted are very high. For someone who spent his time in such a place for 4–5 hours is equivalent to living with a smoker for one month. Similar results were mentioned by Nebot [30] and Hammond [31]. Comparing the results published by other studies, the concentrations of nicotine from Romanian pubs and restaurants where the smoking is allowed were higher than the majority of other public places [30,32-35], indication that either the law should not permit the smoking in any public place or these locations should have better ventilation systems.

Conclusions
According with the published data of US Occupational Safety and Health Administration [36] a concentration of nicotine in the breathing air higher than 6.8 μg · L-1 is considered to be “significant harm” for the humans exposed daily for more than 40 years. In this context, one may conclude that at least for employees and regular customers of Romanian pubs and restaurants where smoking is still allowed the risk to develop a lung cancer is one in 1000. In fact, all the analyzed pubs and restaurants where the smoking was allowed have higher concentration of nicotine in the air than the threshold level mentioned above. The World Health Organization stated that there is no proof for a not dangerous ETS exposure level [37] and our research confirmed that in many Romanian public buildings there are measurable levels of ETS exposure. The outcomes of this report indicate that properly implemented smoke-free strategies are necessary to reduce ETS exposure in indoor places.

Although the Romanian law prohibits smoking in all public buildings the enforcement of this law is very poor. This study may be considered as a scientific evidence for what the general public agree and feel, that new means should be envisaged by the authorities in order to really stop the smoking in the public places. Beside higher fees or other types of penalties applied to smokers and to the owners of the public places where the nicotine levels are found to be increased, educational programs regarding the health risks associated with tobacco smoke and benefits of smoking cessation should also be considered.

Methods
Materials
(S)-Nicotine ((S)-3-(1-Methyl-2-pyrrolidinyl)pyridine, Fluka N5511, 1 mg · mL-1 in methanol) and (S)-cotinine ((S)-1-Methyl-5-(3-pyridyl)-2-pyrrolidinone, Fluka C0430, 1 mg · mL-1 in methanol) were purchased from Sigma-Aldrich. All other solvents and reagents were of chromatography quality, purchased also from Sigma – Aldrich: ammonium formate (12466 Fluka), formic acid (06440 Fluka), dichloromethane (CHROMASOLV, 439223 Sigma), methanol (LC-MS CHROMASOLV, 34860 Sigma), acetonitrile (LC-MS CRHOMASOLV, Fluka 14261). HPLC grade water was prepared by SG Ultra Clear 2001-B Water Deionization System (Cole-Parmer) and additionally filtered through syringe filters PTFE 0,22 μm (Teknokroma, Barcelona, Spain) immediately before use.

Working solutions 0.1 mg · mL-1 of each standard were made in 0.1% ammonium formate in 10% acetonitrile (buffered at pH 5.5) and from this, the calibration standards dilutions between 5 μg · mL-1 and 0.005 μg · mL-1 were freshly prepared before each analytical series.

Sampling
For the current study, a survey was conducted across the city of Timisoara, sampling the air from different public places. The types of buildings considered for this study included hospitals, high schools, pubs, and restaurants. Sampling locations were selected to represent the areas where people frequently work or occupy. Second hand smoke was estimated by sampling of vapor-phase nicotine using an air pump (model HB3344-02 Tuff Personal Air Sampling, produced by Casella Cell, Badford, UK) coupled with an impinger (Pyrex glass Midget Impinger, from SKC Ltd, Dorset, UK) filled with 15 mL solvent (usually acetonitrile) for extraction/desolvation of nicotine from pumped air. The pump was set up to pump at a flow of 800 mL/min, for 15 minutes. Each building selected for this survey was monitored randomly at different hours during open program. The samples were collected in three different days and the results were presented as mean of the individual results.

For quality assurance and control purposes, a fixed sampling procedure was used to collect one blank sample for each of the 8–12 samples. For blanks, air samples were collected from a ventilated laboratory and they were handled and analyzed in the same way as the rest of the samples. The blanks were used to determine the method limit of detection and to calculate blank-corrected nicotine concentrations [38].

Sample preparation
After passing 12 L air through pump (at a 0.8 L/min flow), the nicotine was extracted into acetonitrile (methanol and dichloromethane were also tested). The solvent was evaporated under gentle stream of nitrogen. The residue was re-dissolved in 100 μL of mobile phase used for the equilibration of the analytic column. The samples were filtered on 0.2 μm PTFE filters and afterwards 5 μL of sample was injected into chromatographic system. By this procedure the initial samples were concentrated 150 times and in these condition the LOQ is 2.5 ng/L air collected.

The determination of nicotine and cotinine in urine samples, including collection, sample preparation, chromatographic separation and quantification are described elsewhere [39].

Apparatus
UPLC–MS analyses were performed to determine the nicotine in air samples and urinary nicotine and cotinine. The chromatographical analysis was carried out on a Waters Acquity UPLC-MS system (Binary Solvent Manager, Xevo TQD equipped with an electrospray ionization interface) with a UPLC BEH Phenyl 1.7 μm column (2.1 × 100 mm) using a gradient elution procedure. Mobile phase A consisted in 0.1% ammonium formate in acetonitrile and mobile phase B was 0.1% ammonium formate in 10% acetonitrile. The gradient profile was: 0 – 0.5 min, 100% B; 0.5 – 1 min, 95% B; 1 – 1.5 min, 0% B; 1.5 – 1.9, 0% B; 1.9 – 2 min, 100% B. The column temperature was set at 30°C. The analyses were run at a flow rate of 0.4 mL/min, and the sample volume injected was 5 μL. The ESI parameters for Xevo TQD MS detector were fixed as follows: capillary voltage at 3 kV, source temperature at 120°C, desolvation temperature at 450°C, and desolvation gas at 800 L/h. Nitrogen was used as the desolvation gas, and argon was employed as the collision gas. The detailed MS/MS detection parameters for each analyte are presented in Table 1 and were optimized by infusion of a 1 μg mL-1 standard solution of each analyte into the detector at a flow rate of 10 μL · min-1.

Analyses were carried out in multiple reaction monitoring mode, using two specific transitions for each analyte and the detector was fixed at maximum Extended Dynamic Range with peak mass widths of 2 and 1.5 amu for the first and third quadrupoles, respectively. The dwell time for all transitions was 0.01 seconds.

Ethics
The study was approved by the Ethical Structures of the institutions to whom the authors are affiliated.

Competing interests
The authors declare that they have no competing interests.

Authors’ contributions
AB, MMM and VO have realized the sample collection, biological and chemical analyses and drafted the manuscript, MGP and IRL contributed to the conception and design of study and IRL contributed to data interpretation. All authors read and approved the final manuscript.

Acknowledgements
This work was supported by the project 464 RoS-NET financed by the EU Instrument for Pre-Accession (IPA) funds, under the framework of the Romania-Republic of Serbia IPA Cross-border Cooperation Programme.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

UPLC-MS/MS เป็นทางเลือกน่าสนใจ GC assays เนื่องจากข้อเท็จจริงที่ ว่าการเตรียมตัวอย่างอาจขึ้นตรงกว่าในเทคนิค GC-MS [29] และเนื่องจากวิธีการแยก UPLC มากขึ้นอย่างรวดเร็วกว่าวิธี GC [14] วิธี UPLC – MS ที่นำเสนอสำหรับการกำหนดความเข้มข้นของนิโคตินในอากาศได้ง่าย และรวดเร็ว การตรวจสอบวิธีให้ค่าต่อไปนี้: 4.6% RSD แม่นยำและ 8.0% RSD ความถูกต้อง ผลลัพธ์เหล่านี้จะเปรียบเทียบกับวิธี LC การเผยแพร่สำหรับการนับของนิโคติน (cotinine) ถึงแม้ว่าขั้นตอนการวิเคราะห์เหล่านี้ใช้สำหรับนับของสารประกอบเหล่านี้ในซีรั่ม [27] [28] ปัสสาวะการศึกษานี้แสดงว่า อยู่ในสถานที่สาธารณะทั้งหมดที่ตรวจสอบจากเดินควันยาสูบ การศึกษาแสดงในอาคารที่ไม่ได้สูบบุหรี่ นิโคตินในระดับต่ำกว่าในสถานที่ห้ามสูบบุหรี่ แต่จะไม่เป็นศูนย์ หมายความว่า นโยบายของสถานทั้งสูบบุหรี่ และไม่สูบบุหรี่ไม่มีประโยชน์ทั้งหมดความเข้มข้นนิโคตินพบในผับและร้านอาหารที่มีห้ามสูบบุหรี่ที่มีสูงมาก สำหรับคนที่ใช้เวลาของเขาในสถาน 4-5 ชั่วโมงจะเท่ากับอยู่กับสูบบุหรี่สำหรับหนึ่งเดือน ผลคล้ายได้กล่าวถึงโดย Nebot [30] [31] แฮมมอนด์ เปรียบเทียบผลการเผยแพร่ โดยการศึกษาอื่น ๆ ความเข้มข้นของนิโคตินจากโรมาเนียผับและร้านอาหารที่สูบบุหรี่จะมีมากกว่าส่วนใหญ่ของสถานสาธารณะอื่น ๆ [30,32-35], บ่งชี้ว่า กฎหมายไม่ควรอนุญาตให้สูบบุหรี่ในสาธารณะใด ๆ หรือสถานเหล่านี้ควรมีระบบระบายอากาศที่ดีบทสรุปตาม ด้วยการเผยแพร่ข้อมูลของเราความปลอดภัยในอาชีพและดูแลสุขภาพ [36] ความเข้มข้นของนิโคตินในการหายใจอากาศที่มากกว่า 6.8 μg · L-1 ถือเป็น "อันตรายสำคัญ" สำหรับมนุษย์ที่สัมผัสทุกวันมากว่า 40 ปี ในบริบทนี้ หนึ่งอาจสรุปที่น้อยสำหรับพนักงานและลูกค้าประจำของโรมาเนียผับและร้านอาหารที่ยังคงสูบบุหรี่ความเสี่ยงในการพัฒนามะเร็งปอดเป็นหนึ่งใน 1000 ในความเป็นจริง วิเคราะห์ผับและร้านอาหารที่สูบบุหรี่ที่ได้รับอนุญาตทั้งหมดได้ความเข้มข้นสูงของนิโคตินในอากาศมากกว่าระดับขีดจำกัดที่กล่าวถึงข้างต้น องค์การอนามัยโลกระบุว่า มีหลักฐานไม่เป็นอันตรายไม่ ETS แสงระดับ [37] และงานวิจัยของเรายืนยันในอาคารสาธารณะในโรมาเนีย มีวัดระดับของ ETS เปิดรับแสง ผลลัพธ์ของรายงานนี้ระบุว่า กลยุทธ์ที่ดีดำเนินการอย่างถูกต้องจำเป็นต้องลดแสง ETS ในสถานในร่มแม้ว่าโรมาเนียกฎหมายห้ามสูบบุหรี่ในอาคารสาธารณะทั้งหมด บังคับใช้ของกฎหมายนี้ได้ยาก การศึกษานี้อาจถือได้ว่าเป็นหลักฐานทางวิทยาศาสตร์ว่าประชาชนยอมรับ และ รู้สึก ที่ควร envisaged วิธีใหม่ โดยเจ้าหน้าที่เพื่อหยุดการสูบบุหรี่ในสถานสาธารณะจริง ๆ นอกจากค่าธรรมเนียมสูงหรือใช้ กับผู้สูบบุหรี่ และเจ้าของสถานสาธารณะที่ที่ค้นพบระดับนิโคตินที่จะเพิ่มโทษชนิดอื่น ๆ โปรแกรมที่ศึกษาเกี่ยวกับความเสี่ยงต่อสุขภาพที่เกี่ยวข้องกับประโยชน์ของยุติการสูบบุหรี่และควันยาสูบยังควรวิธีการวัสดุ(S) -นิโคติน ((S)-3-(1-Methyl-2-pyrrolidinyl)pyridine, Fluka N5511, 1 mg · mL-1 ในเมทานอล) และ (S) -cotinine ((S)-1-Methyl-5-(3-pyridyl)-2-pyrrolidinone, C0430 Fluka, 1 mg · mL-1 ในเมทานอล) ซื้อจาก Aldrich ซิก ทั้งหมดหรือสารทำละลายอื่น ๆ และ reagents ถูกคุณภาพ chromatography ยังซื้อจากซิก-Aldrich: แอมโมเนียรูปแบบเอกสาร (12466 Fluka), กรด (06440 Fluka), dichloromethane (CHROMASOLV ซิก 439223), เมทานอล (CHROMASOLV LC MS ซิก 34860) acetonitrile (CRHOMASOLV LC MS, Fluka 14261) HPLC เกรดน้ำถูกเตรียม โดย SG Ultra B 2001 ล้างน้ำ Deionization ระบบ (โคล-Parmer) และนอกจากนี้กรองผ่านตัวกรองเข็มไฟเบอร์ μm การ 0,22 (Teknokroma บาร์เซโลนา สเปน) ทันทีก่อนใช้·ทำงานโซลูชั่น 0.1 มิลลิกรัม 1 mL ของแต่ละมาตรฐานที่เกิดขึ้นในรูปแบบเอกสารของแอมโมเนีย 0.1% ใน 10% acetonitrile (buffered ที่ค่า pH 5.5) และ จาก นี้ dilutions มาตรฐานเทียบระหว่าง 5 μg · · μg mL 1 และ 0.005 mL 1 ได้สดเตรียมไว้ก่อนแต่ละชุดวิเคราะห์สุ่มตัวอย่างปัจจุบันการศึกษา การสำรวจได้ดำเนินในการเมืองของเดิน การเก็บตัวอย่างอากาศจากสถานสาธารณะต่าง ๆ ชนิดของอาคารถือว่าสำหรับโรงพยาบาลศึกษารวม โรงเรียนสูง กลาง และร้านอาหาร เลือกสถานสุ่มตัวอย่างเพื่อแสดงพื้นที่ที่คนมักจะทำงาน หรือครอบครอง ควันมือสองถูกประเมิน โดยการสุ่มตัวอย่างของระยะที่ไอนิโคตินใช้เครื่องสูบอากาศ (รุ่น HB3344-02 Tuff ส่วนบุคคลเครื่องสุ่มตัวอย่าง ผลิต โดยเซลล์ Casella, Badford, UK) ควบคู่กับการ impinger (Pyrex แก้ว Midget Impinger จาก SKC Ltd ดอร์เซ็ท UK) เต็มไป ด้วยตัวทำละลาย 15 mL (ปกติ acetonitrile) สำหรับ สกัด/desolvation ของนิโคตินจากการสูบอากาศ เครื่องสูบตั้งปั๊มที่ไหล 800 mL/min, 15 นาที อาคารแต่ละสำหรับแบบสำรวจนี้ถูกตรวจสอบได้ในเวลาเปิดโปรแกรมต่าง ๆ ตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมใน 3 วันแตกต่างกัน และผลลัพธ์ถูกแสดงเป็นค่าเฉลี่ยของแต่ละผลลัพธ์สำหรับการประกันคุณภาพและควบคุมวัตถุประสงค์ ขั้นตอนการสุ่มตัวอย่างถาวรถูกใช้เพื่อรวบรวมตัวอย่างเปล่าหนึ่งสำหรับแต่ละตัวอย่าง 8-12 ช่องว่าง ตัวอย่างอากาศที่เก็บจากห้องปฏิบัติสม่ำเสมอ และจัดการ และวิเคราะห์ในลักษณะเดียวกับส่วนเหลือของตัวอย่าง ช่องว่างที่ถูกใช้ เพื่อกำหนดจำนวนวิธีการตรวจสอบ และคำนวณความเข้มข้นนิโคตินแก้ไขว่าง [38]เตรียมตัวอย่างหลังจากผ่านอากาศ 12 L สูบที่กระแส 0.8 L/min), นิโคตินถูกสกัดเป็น acetonitrile (เมทานอลและ dichloromethane ยังทดสอบ) ตัวทำละลายไม่หายไปภายใต้กระแสอ่อนโยนของไนโตรเจน สารตกค้างถูกละลายอีกครั้งใน μL 100 ของเฟสเคลื่อนที่ใช้สำหรับ equilibration คอลัมน์คู่ ตัวอย่างได้กรองบนกรองไฟเบอร์ μm 0.2 และหลังจากนั้น μL 5 ของตัวอย่างถูกฉีดเข้าไปในระบบ chromatographic ขั้นตอนนี้ เริ่มต้นตัวอย่างดีเข้มข้น 150 ครั้ง และเงื่อนไขเหล่านี้ LOQ เป็นอากาศ ng/L 2.5 ที่รวบรวมความมุ่งมั่นของนิโคตินและ cotinine ในปัสสาวะตัวอย่าง ชุด เตรียมตัวอย่าง แยก chromatographic และนับอธิบายอื่น [39]เครื่องมือUPLC – MS วิเคราะห์ได้ดำเนินการกำหนดนิโคตินในตัวอย่างอากาศ และท่อปัสสาวะนิโคติน cotinine การวิเคราะห์ chromatographical ถูกดำเนินการบนระบบน้ำ Acquity UPLC MS (ไบนารีตัวทำละลายผู้จัดการ Xevo TQD พร้อม ด้วยอินเทอร์เฟซการ ionization วิธีพ่นละอองไฟฟ้า) ด้วย UPLC กลาง 1.7 Phenyl μm คอลัมน์ (2.1 × 100 มิลลิเมตร) โดยใช้กระบวนการ elution ไล่โทนสี ประกอบด้วย A ระยะเคลื่อนที่ในรูปแบบเอกสารของแอมโมเนีย 0.1% ใน acetonitrile และเคลื่อนระยะ B มีรูปแบบเอกสารของแอมโมเนีย 0.1% ใน acetonitrile 10% โพรไฟล์การไล่ระดับสีได้: 0 – 0.5 นาที 100% B ประมาณ 0.5-1 นาที 95% B 1 – 1.5 นาที 0% B 1.5-1.9, B 0% 1.9-2 นาที 100% บี ตั้งค่าคอลัมน์อุณหภูมิที่ 30 องศาเซลเซียส วิเคราะห์ได้ทำงานที่อัตราการไหลของ 0.4 mL/min และปริมาณตัวอย่างที่ฉีดถูก 5 μL พารามิเตอร์ ESI สำหรับ Xevo TQD MS จับได้คงเป็นดังนี้: แรงเส้นเลือดฝอย 3 kV ใช้แหล่งอุณหภูมิที่ 120° C อุณหภูมิ desolvation ที่ 450° C และก๊าซ desolvation ที่ h. 800 L ไนโตรเจนเป็นแก๊ส desolvation และมีการจ้างงานอาร์กอนเป็นแก๊สชน รายละเอียด MS/MS ตรวจสอบพารามิเตอร์สำหรับแต่ละการ analyte จะแสดงในตารางที่ 1 และได้ปรับให้เหมาะสม โดยคอนกรีต 1 μg mL 1 สารละลายมาตรฐานของ analyte แต่ละเป็นเครื่องตรวจจับที่อัตราการไหลของทรัพยากร μL 10 นาที-1วิเคราะห์ได้ดำเนินการตรวจสอบโหมด ใช้เฉพาะช่วงสองสำหรับ analyte แต่ละปฏิกิริยาหลาย และเครื่องตรวจจับได้คงที่ช่วงไดนามิกขยายสูงสุด มีความกว้างโดยรวมสูงสุดของ 2 และ 1.5 แม่น้ำอามูสำหรับ quadrupoles แรก และ 3 ตามลำดับ เวลาอาศัยอยู่ในช่วงการเปลี่ยนภาพทั้งหมด 0.01 วินาทีจริยธรรมการศึกษาได้รับการอนุมัติ โดยโครงสร้างจริยธรรมของสถาบันที่ผู้เขียนเกี่ยวข้องสถานที่แข่งขันผู้เขียนประกาศว่า พวกเขามีผลประโยชน์แข่งขันไม่ผลงานของผู้เขียนAB ววดดดด และโวได้รับรู้ในตัวอย่างชุด ชีวภาพ และเคมีวิเคราะห์ และร่างต้นฉบับ MGP และ IRL ส่วนความคิด และออกแบบของศึกษาและ IRL ส่วนการตีความข้อมูล ผู้เขียนอ่าน และอนุมัติฉบับสุดท้ายถาม-ตอบงานนี้ได้รับการสนับสนุน โดยโครงการเคหะ 464 RoS-สุทธิตรา EU การภาคยานุวัติก่อน (IPA) ภายใต้กรอบของโครงการความร่วมมือประเทศโรมาเนียสาธารณรัฐของเซอร์เบีย IPA ข้ามแดน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

uplc-ms / MS มีที่น่าสนใจทางเลือก GC ) เนื่องจากการเตรียมสารตัวอย่างอาจจะตรงไปตรงมามากขึ้นกว่าใน GC - MS เทคนิค [ 29 ] และเพราะ uplc แยกเป็นวิธีที่รวดเร็วกว่าวิธี GC [ 14 ] การ uplc –วิธีการนำเสนอ MS สำหรับการหาความเข้มข้นของนิโคตินในอากาศได้ง่ายและรวดเร็ว วิธีตรวจสอบให้ค่าต่อไปนี้ : 4ความแม่นยำและ RSD 6 % RSD 8.0 % ความถูกต้อง ผลลัพธ์เหล่านี้จะเปรียบกับประกาศ LC วิธีการปริมาณนิโคติน ( และโคตินิน ) แม้ว่ากระบวนการวิเคราะห์โดยใช้ปริมาณสารเหล่านี้ในเลือดหรือปัสสาวะ [ 27 ] [ 28 ] .

ผลการศึกษาพบว่า ควันบุหรี่อยู่ในที่สาธารณะที่ตรวจสอบจาก Timisoara .การศึกษายังแสดงให้เห็นว่าในอาคารที่ไม่อนุญาตให้สูบบุหรี่ ระดับนิโคตินในอากาศต่ำกว่าในสถานที่ที่สูบบุหรี่จะได้รับอนุญาต แต่พวกเขาจะไม่ศูนย์ นอกจากนี้ นโยบายมีทั้งการสูบบุหรี่และสถานที่ปลอดไม่ได้ประโยชน์ทั้งหมด .

นิโคตินความเข้มข้นที่พบในร้านอาหารและผับที่สูบบุหรี่ได้รับอนุญาตนั้นมีสูงมากสำหรับใครที่ใช้เวลาของเขาในสถานที่ดังกล่าว สำหรับ 4 – 5 ชั่วโมง เทียบเท่ากับการใช้ชีวิตกับสูบบุหรี่เป็นเวลาหนึ่งเดือน ซึ่งการกล่าวถึงโดย nebot [ 30 ] และแฮมมอนด์ [ 31 ] เผยแพร่โดยเปรียบเทียบผลการศึกษาอื่น ๆ , ความเข้มข้นของนิโคตินจากผับ โรมาเนีย และร้านอาหารที่อนุญาตให้สูบบุหรี่สูงกว่าส่วนใหญ่อื่น ๆสถานที่สาธารณะ [ 30,32-35 ]ระบุว่า ทั้งกฎหมายไม่อนุญาตให้สูบบุหรี่ในสถานที่สาธารณะหรือสถานที่เหล่านี้ควรมีระบบระบายอากาศที่ดี


ตามด้วยข้อสรุปที่เผยแพร่ข้อมูลด้านความปลอดภัยและสุขภาพการบริหาร [ 36 ] ความเข้มข้นของนิโคตินในการหายใจอากาศสูงกว่า 6 .8  μกรัม ·  L-1 ถือเป็น " ความอันตราย " สำหรับมนุษย์เปิดเผยทุกวันมานานกว่า 40 ปี ในบริบทนี้ อาจสรุปได้ว่า อย่างน้อยพนักงานและลูกค้าปกติของ โรมาเนีย ร้านอาหารและผับที่สูบบุหรี่ยังได้รับความเสี่ยงที่จะพัฒนาโรคมะเร็งปอดเป็นหนึ่งใน 1000 ในความเป็นจริงทั้งหมดร้านอาหารและผับแบบที่สูบบุหรี่ได้รับอนุญาตมีความเข้มข้นของนิโคตินในอากาศกว่าเกณฑ์ระดับที่กล่าวถึงข้างต้น องค์การอนามัยโลกกล่าวว่าไม่มีหลักฐานเป็นแผ่น ไม่ได้อันตรายระดับ [ 37 ] และการวิจัยของเรายืนยันว่า ในหลาย โรมาเนีย อาคารสาธารณะ มีการวัดระดับของแผ่นแสงผลของรายงานฉบับนี้ระบุว่าถูกใช้กลยุทธ์เป็นสิ่งจำเป็นเพื่อลดควันควันบุหรี่แสงในสถานที่ในร่ม

แม้ว่ากฎหมายโรมาเนียห้ามสูบบุหรี่ในที่สาธารณะอาคาร การบังคับใช้กฎหมายนี้จะไม่ดีมาก การศึกษานี้อาจถือเป็นหลักฐานทางวิทยาศาสตร์ สิ่งที่ประชาชนทั่วไปเห็นด้วยและรู้สึกนั่นหมายความว่า ใหม่ควรเป็น envisaged โดยเจ้าหน้าที่เพื่อเลิกสูบบุหรี่ในสถานที่สาธารณะ นอกจากค่าธรรมเนียมสูงกว่า หรือประเภทอื่น ๆของการลงโทษที่ใช้กับผู้สูบบุหรี่ และเจ้าของสถานที่สาธารณะที่ระดับนิโคติน จะพบว่ามีเพิ่มขึ้นโปรแกรมการศึกษาเกี่ยวกับความเสี่ยงด้านสุขภาพที่เกี่ยวข้องกับควันบุหรี่ และประโยชน์ของการเลิกสูบบุหรี่ นอกจากนี้ควรพิจารณาวิธีการวัสดุ



( s ) - นิโคติน ( s ) - 3 - ( 1-methyl-2-pyrrolidinyl ) pyridine , fluka n5511 1 มิลลิกรัม · แน่นอนในเมทานอล ) และ ( S ) - โคตินิน ( ( s ) 1-methyl-5 - ( 3-pyridyl ) - 2-pyrrolidinone fluka , c0430 1 มิลลิกรัม · แน่นอนในเมทานอล ) ซื้อจากซิกม่า อัลดริชตัวทำละลายอื่นๆ ทั้งหมด และ สารเคมี มีคุณภาพสามารถ ซื้อ จาก ซิกม่า ( ดิช : แอมโมเนียมฟอร์เมต ( 12466 fluka ) กรด ( 06440 fluka ) ไดคลอโรมีเทน ( chromasolv 439223 , Sigma ) , เมทานอล ( chromasolv 34860 อินซูลิน , Sigma ) , ไน ( crhomasolv fluka อินซูลิน , 14261 )น้ำเกรด HPLC เตรียมโดย SG อัลตร้าล้างระบบน้ำ 2001-b การไถ่ถอน ( โคล พาร์เมอร์ ) และนอกจากนี้กรองผ่านตัวกรอง 0,22 เข็ม PTFE  μ m ( teknokroma , บาร์เซโลนา , สเปน ) ทันที ก่อนที่จะใช้

ทำงานโซลูชั่น 0.1 มก.  · ที่แน่นอนของแต่ละมาตรฐานที่ถูกสร้างขึ้นมาใน 0.1% แอมโมเนียมฟอร์เมท 10% ไน ( บัฟเฟอร์ pH 5.5 ) และจากนี้มาตรฐานการสอบเทียบเจือจางระหว่าง 5  μกรัม · แน่นอนและ 0.005 กรัม ·  μแน่นอนเป็นสดที่เตรียมไว้ก่อนที่แต่ละวิเคราะห์ชุด


ตัวอย่างสำหรับการศึกษาในปัจจุบัน โดยการสำรวจในเมือง Timisoara , ตัวอย่างอากาศจากสถานที่สาธารณะต่าง ๆ ประเภทของอาคารที่ถือว่าการศึกษาครั้งนี้ คือ โรงพยาบาล , โรงเรียน , ผับและร้านอาหารสถานที่จำนวนที่เลือกที่จะเป็นตัวแทนของพื้นที่ที่ผู้คนมักทำงานหรือครอบครอง . ควันบุหรี่มือสองคือประมาณ 3 เฟสของนิโคตินไอน้ำโดยใช้ปั๊มลม ( แบบ hb3344-02 ปอยส่วนบุคคลตัวอย่างอากาศ ผลิต โดย คาเซลลาเซลล์ badford , UK ) ควบคู่กับเครื่อง ( Pyrex แก้วจิ๋วเครื่องจาก SKC Ltd , ดอร์เซตสหราชอาณาจักร ) เต็มไปด้วย 15 ml ตัวทำละลาย ( โดยปกติไน ) ในการสกัด / ศูนยากาศของนิโคตินจากการสูบอากาศ ปั๊มตั้งปั๊มในการไหลของ 800 มล. / นาที , 15 นาที อาคารแต่ละเลือกสำหรับการสำรวจนี้ถูกตรวจสอบแบบสุ่มที่เวลาต่าง ๆ ในรายการเปิด โดยเก็บตัวอย่างในสามวันที่แตกต่างกันและผลที่ถูกนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ยของผลการค้นหาแต่ละรายการ .

ประกันคุณภาพและควบคุมมีจำนวนคงที่ขั้นตอนการเก็บรวบรวมหนึ่งว่างเปล่า ตัวอย่างของแต่ละ 8 – 12 ตัวอย่าง สำหรับช่องว่างจากการเก็บตัวอย่างอากาศจะมีห้องปฏิบัติการและพวกเขาจัดการและวิเคราะห์ข้อมูลในแบบเดียวกับส่วนที่เหลือของตัวอย่างช่องว่างถูกใช้เพื่อกำหนดวิธีที่ จำกัด ของการตรวจสอบและคำนวณว่างแก้ไขนิโคตินความเข้มข้น [ 38 ]


หลังจากผ่านการเตรียมตัว 12 ลิตรอากาศผ่านปั๊ม ( 0.8 ลิตร / นาทีอัตราการไหล ) , นิโคตินถูกสกัดลงไน ( เมทานอลไดคลอโรมีเทนยังทดสอบ ) ตัวทำละลายคือระเหยภายใต้กระแสอ่อนโยนของไนโตรเจนตกค้างอีก 100  μละลายในชั้นของเฟสเคลื่อนที่ที่ใช้สำหรับ equilibration ของคอลัมน์วิเคราะห์ จำนวน μ PTFE 0.2 M กรองบนกรอง และหลังจากนั้น 5  μลิตรตัวอย่างที่ฉีดเข้าไปในระบบทางโครมาโทกราฟี โดยขั้นตอนนี้โดยเริ่มต้นมีความเข้มข้น 150 ครั้ง และในเงื่อนไข loq 2.5 ng / L

อากาศเก็บการหาปริมาณนิโคตินและโคตินินในปัสสาวะ ได้แก่ การเก็บตัวอย่างการเตรียมตัวอย่าง , แยก , และปริมาณและอธิบายไว้ที่อื่น [ 39 ] .


uplc MS เครื่องมือและวิเคราะห์ข้อมูลได้ และนิโคตินนิโคตินในตัวอย่างอากาศ และโคตินินในปัสสาวะ .การวิเคราะห์ chromatographical ได้ดําเนินการในระบบน้ำ acquity uplc-ms ( ผู้จัดการ xevo tqd พร้อมกับวิธีพ่นละอองไฟฟ้าไอเฟสตัวทำละลายไบนารี ) กับ uplc Beh ) 1.7  μ M คอลัมน์ ( 2 × 100 มม. ) โดยใช้การใช้กระบวนการ ใช้ในเฟสเคลื่อนที่เป็น 0.1% แอมโมเนียมฟอร์เมตโตไนไตรล์และโทรศัพท์มือถือเฟส B คือ 0.1% แอมโมเนียมฟอร์เมท 10% ไน .การไล่ระดับสีโปรไฟล์ : 0 – 0.5 นาที 100 % B ; 0.5 – 1 นาที 95 % B ; 1 – 1.5 นาที 0 % B ; 1.5 และ 1.9 , 0 % B ; 1 – 2 นาที , 100 % B . คอลัมน์ อุณหภูมิตั้งไว้ที่ 30 องศา ใช้อยู่วิ่งที่ไหล อัตรา 0.4 มิลลิลิตรต่อนาที และตัวอย่างปริมาณฉีด 5 μล. ESI พารามิเตอร์สำหรับ xevo tqd MS เครื่องได้รับการแก้ไข ดังนี้ ซึ่งแรงดันที่ 3 กิโล แหล่งอุณหภูมิ 120 องศา Cศูนยากาศ อุณหภูมิ 450 องศา C และศูนยากาศแก๊ส 800 ลิตร / ชั่วโมงไนโตรเจนใช้เป็นศูนยากาศก๊าซ อาร์กอน ใช้ระบบแก๊ส รายละเอียด MS / MS พารามิเตอร์การตรวจสอบแต่ละครูจะแสดงในตารางที่ 1 และเหมาะสม จากแบบ 1  μกรัมแน่นอนมาตรฐานโซลูชั่นของแต่ละครูเข้าตรวจจับที่อัตราการ ไหลของ 10  μผม ·  min-1 .

วิเคราะห์ พบว่าในการตรวจสอบโหมดปฏิกิริยาหลาย ใช้เปลี่ยนเฉพาะสองสำหรับแต่ละครู และเครื่องตรวจจับคงที่สูงสุดขยายไดนามิกเรนจ์กับยอดมวลความกว้าง 2 และ 1.5 อามุสำหรับ quadrupoles แรกและที่สามตามลำดับ การอาศัยเวลาทั้งหมดเปลี่ยนเป็น 0.01 วินาที จริยธรรม

การศึกษาได้รับการอนุมัติ โดยโครงสร้างทางจริยธรรมของสถาบันที่ผู้เขียนได้ร่วมแข่งขันหัก


เขียนประกาศว่าพวกเขาไม่มี competing ความสนใจ ผู้เขียน ' เขียน

AB , อืมกับ VO ได้รับการเก็บตัวอย่าง การวิเคราะห์ทางชีวภาพ เคมี และร่างต้นฉบับMgp IRL สนับสนุนความคิดและการออกแบบของการศึกษาและ IRC สนับสนุนการตีความข้อมูล ทั้งหมดที่ผู้เขียนอ่านและอนุมัติต้นฉบับสุดท้าย

ขอบคุณ
งานนี้ได้รับการสนับสนุนจากโครงการได้ผลตอบแทนสุทธิ financed โดยเครื่องมือที่ EU ก่อนเข้า ( IPA ) กองทุนภายใต้กรอบของโรมาเนียเซอร์เบีย IPA ข้ามชายแดน ความร่วมมือโครงการ