Colony PCR screening was performed

Colony PCR screening was performed using primers flanking the
integration sites (Table 1). For such reactions, individual colonies
were picked and added to a reaction tube containing 0.4 lM of
each primer (forward and reverse) and 10 ll of 1 Taq DNA polymerase
Master Mix solution (Ampliqon, Skovlunde, Denmark) and
supplemented to a final reaction volume of 20 ll with ddW. The
colony PCR reaction included a single denaturation step (95 C,
1 min) followed by 25 cycles of denaturation (95 C, 30 s), annealing
(60 C, 1 min) and elongation (72 C, 1.5 min) and a final elongation
step of 6 min at 72 C. The PCR reaction products were
analyzed on 1% (w/v) agarose gels.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำโคโลตรวจ PCR โดยใช้ไพรเมอร์ flankingรวมเว็บไซต์ (ตาราง 1) สำหรับปฏิกิริยาดังกล่าว อาณานิคมแต่ละได้รับ และเพิ่มหลอดปฏิกิริยาประกอบด้วย 0.4 lM ของแต่ละสีรองพื้น (ไปและกลับ) และ 10 จะ 1 Taq DNA พอลิเมอเรสโซลูชั่นต้นแบบผสม (Ampliqon, Skovlunde เดนมาร์ก) และเสริมให้ปริมาณปฏิกิริยาสุดท้าย 20 จะ มี ddW ที่ปฏิกิริยา PCR อาณานิคมรวมขั้นตอน denaturation เดียว (95 C1 นาที) ตาม ด้วยรอบ 25 ของ denaturation (95 C, 30 s), หลอม(60 C, 1 นาที) และ elongation (72 C, 1.5 นาที) และ elongation ขั้นสุดท้ายขั้นตอนที่ 6 นาทีที่ 72 C. ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา PCRวิเคราะห์บน agarose 1% (w/v)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจคัดกรองอาณานิคม PCR ได้รับการดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์ขนาบ
เว็บไซต์รวม (ตารางที่ 1) สำหรับปฏิกิริยาดังกล่าวอาณานิคมแต่ละ
ถูกหยิบและเพิ่มหลอดปฏิกิริยาที่มี 0.4 LM ของ
แต่ละประถมศึกษา (ไปข้างหน้าและย้อนกลับ) และ 10 LL 1? Taq DNA polymerase
แก้ปัญหาโทผสม (Ampliqon, Skovlunde, เดนมาร์ก) และ
เสริมปริมาณปฏิกิริยาสุดท้ายของ 20 LL กับ DDW
อาณานิคมปฏิกิริยา PCR รวมขั้นตอน denaturation เดียว (95? C,
1 นาที) ตามด้วย 25 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติ (95? C, 30 s), หลอม
(60? C, 1 นาที) และการยืดตัว (72? C, 1.5 นาที ) และการยืดตัวสุดท้าย
ขั้นตอนของ 6 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยา PCR ได้รับการ
วิเคราะห์ในวันที่ 1% (w / v) เจล agarose

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาณานิคมและคัดกรองการใช้ไพรเมอร์จ
รวมเว็บไซต์ ( ตารางที่ 1 ) สำหรับปฏิกิริยาดังกล่าวแต่ละโคโลนี
ถูกเลือกและเพิ่มปฏิกิริยาของแต่ละหลอดบรรจุ 0.4 LM
รองพื้น ( ไปข้างหน้าและย้อนกลับ ) และ 10 จะ 1  แท็ค DNA polymerase
อาจารย์ผสมสารละลาย ( ampliqon skovlunde , เดนมาร์ก ) และ
เสริมปริมาณปฏิกิริยาสุดท้าย 20 จะมี ddw .
อาณานิคมเพื่อตรวจหารวมขั้นตอนเดียว ( ( 95  C ,
1 นาที ) ตามด้วย 25 รอบ ( 95  C ( , 30 ) การอบ
( 60  C 1 นาที ) และการยืดตัว ( 72  C 1.5 นาที ) และสุดท้ายการยืดตัว
ขั้นตอน 6 นาทีที่ 72  ค . เพื่อตรวจหาผลิตภัณฑ์
ใช้ 1% ( w / v )
, เจล