Small pieces of film (0.5 mm2
) were fixed in 2.5% (v/v)
glutaraldehyde in Sorenssen buffer (pH 7.2), washed in the same
buffer three times for 30 min each, and then postfixed in 2% (w/v)
OsO4 for 1 h. The samples were next washed with distilled water
three times for 30 min each, serially dehydrated in aqueous
acetone (25%, 50%, 75%, and 100% [3 ]), and finally embedded
in Spurr Resin (1:2, 2:2, 2:1) and pure resin overnight. Polymerization
was carried out at 70 1C overnight. The embedded samples
were sectioned with an LKB ultramicrotome. The grids were
stained with uranyl acetate (1 min) and lead-citrate (40 min) and
observed with a JEOL 100CXII (Tokyo, Japan) transmission electron
microscope at 80 kV.
ชิ้นเล็ก ๆ ของฟิล์ม (0.5 มม 2 ได้ภาย) ได้คงที่ 2.5% (v/v)glutaraldehyde ใน Sorenssen บัฟเฟอร์ (pH 7.2), ล้างในเดียวกันบัฟเฟอร์สามครั้งใน 30 นาที และ postfixed แล้ว 2% (w/v)OsO4 สำหรับ 1 h ตัวอย่างถัดไปถูกล้าง ด้วยน้ำกลั่นครั้งที่สามสำหรับ 30 นาที ละ serially อบในอควีอะซีโตน (25%, 50%, 75% และ 100% [3]), และฝังตัวในที่สุดในเรซิน Spurr (1:2, 2:2, 2:1) และบริสุทธิ์ยางค้างคืน Polymerizationได้รับการดำเนินที่ 70 1C ค้างคืน ตัวอย่างฝังได้จัดที่แบ่งเป็นส่วน ๆ ด้วยการ ultramicrotome LKB กริดได้สี uranyl acetate (1 นาที) และลูกค้าเป้าหมายซิเตรต (40 นาที) และพบกับ JEOL 100CXII อิเล็กตรอนส่ง (โตเกียว ญี่ปุ่น)กล้องจุลทรรศน์ที่ 80 kV
การแปล กรุณารอสักครู่..
