5.4. Direct and rapid PCR on mock c

5.4. Direct and rapid PCR on mock casework samples

149 mock casework samples, expected to contain single source cell material of known donors, were collected to study the success rate of direct and rapid PCR. The tape lift procedure was used for all stains residing on swabs. For items sampled by tape-lift stubs, 5 mm2 areas were excised from the tape. Chewing gum, hairs and bone powder were added directly to the PCR mixture. Full STR profiles concordant with the donor of the sample were obtained for 60% of the samples representing classical forensic trace evidence types (Table 6). All blood samples and half of the saliva samples yielded full profiles. Hair roots give 65% of full profiles when pulled hairs are used, but the profiles appear overloaded and are best analyzed after injecting less (0.01 μL) PCR product. When hairs are analyzed no sample remains as the hair is fully used during direct and rapid PCR. When items containing contact DNA and bone samples are included, the overall success rate decreases (46%) (Table 6). The bone samples gave full profiles in standard DNA analysis, but no genotyping results using direct PCR. This difference is most likely due to the use of too little bone material for the direct PCR; approximately 10 mL of bone powder was used for DNA isolation of which 1/20th was used as PCR input (this corresponds to 500 μL bone powder), while for direct PCR only 10 μL bone powder was added.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5.4 PCR โดยตรง และรวดเร็วในตัวอย่างจำลอง caseworkอย่างจำลอง casework 149 คาดว่าจะประกอบด้วยแหล่งเดียววัสดุเซลล์ของผู้บริจาคทราบ ถูกเก็บรวบรวมการศึกษาอัตราการ PCR โดยตรง และรวดเร็ว ขั้นตอนการยกเทปถูกใช้สำหรับคราบสกปรกทุกชนิดที่อยู่บนสวับ สำหรับสินค้าตัวอย่าง โดยค่ายเทปลิฟต์ mm2 5 พื้นที่มีสรรพสามิตจากเทป ฝรั่ง ขน และกระดูกผงถูกเพิ่มโดยตรงกับส่วนผสม PCR โปรไฟล์ STR เต็ม concordant กับบริจาคของตัวอย่างได้รับ 60% ของตัวอย่างแทนชนิดของหลักฐานติดตามทางนิติวิทยาศาสตร์คลาสสิก (ตาราง 6) ตัวอย่างเลือดทั้งหมดและครึ่งหนึ่งของตัวอย่างน้ำลายผลโพรไฟล์เต็ม รากผมให้ 65% ของโปรไฟล์เต็มเมื่อใช้ดึงขน แต่ปรากฏโอเวอร์โหลดส่วนกำหนดค่า และวิเคราะห์ได้ดีที่สุดหลังจากฉีดผลิตภัณฑ์ PCR (0.01 μL) น้อยลง เมื่อวิเคราะห์ได้ขนตัวอย่างยังคงเป็นผมใช้หมดแล้วระหว่าง PCR โดยตรง และรวดเร็ว เมื่อประกอบด้วยตัวอย่างดีเอ็นเอและกระดูกที่ติดต่อมีอยู่ อัตราความสำเร็จโดยรวมลดลง (46%) (ตาราง 6) ตัวอย่างกระดูกให้โปรไฟล์เต็มในการวิเคราะห์ดีเอ็นเอมาตรฐาน แต่ไม่มีผล genotyping โดยใช้ PCR โดยตรง ความแตกต่างนี้เป็นมากที่สุดเนื่องจากการใช้วัสดุที่น้อยเกินไปกระดูกสำหรับ PCR โดยตรง กระดูกผงประมาณ 10 มล.ใช้ในการแยกดีเอ็นเอที่ 1/20 ใช้เป็น PCR เพิ่มป้อน (นี้สอดคล้องกับผงกระดูก μL 500), ในขณะที่ผงกระดูกเพียง 10 μL PCR โดยตรง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5.4 PCR โดยตรงและอย่างรวดเร็วตัวอย่าง casework จำลอง149 ตัวอย่าง casework จำลองคาดว่าจะมีแหล่งวัสดุเซลล์เดียวของผู้บริจาคที่รู้จักกันที่ถูกเก็บรวบรวมเพื่อศึกษาอัตราความสำเร็จของโดยตรงและรวดเร็ววิธี PCR ขั้นตอนเทปลิฟท์ที่ใช้สำหรับคราบทั้งหมดที่อาศัยอยู่บน swabs สำหรับรายการตัวอย่างโดยสมบูรณ์เทปยก, 5 mm2 พื้นที่ถูกตัดจากเทป หมากฝรั่งขนและผงกระดูกที่ถูกเพิ่มโดยตรงกับส่วนผสม PCR โปรไฟล์ STR เต็มพ้องกับผู้บริจาคของกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับ 60% ของกลุ่มตัวอย่างที่เป็นตัวแทนของคลาสสิกประเภทนิติวิทยาศาสตร์ร่องรอยหลักฐาน (ตารางที่ 6) ทั้งหมดตัวอย่างเลือดและครึ่งหนึ่งของกลุ่มตัวอย่างน้ำลายให้ผลโปรไฟล์แบบเต็มรูปแบบ รากผมให้ 65% ของโปรไฟล์เต็มเมื่อขนดึงจะใช้ แต่โปรไฟล์ที่ปรากฏมากเกินไปและมีการวิเคราะห์ที่ดีที่สุดหลังจากการฉีดน้อย (0.01 ไมโครลิตร) ผลิตภัณฑ์ PCR เมื่อขนมีการวิเคราะห์ตัวอย่างไม่ยังคงเป็นผมจะใช้อย่างเต็มที่ในช่วงทางตรงและรวดเร็ว PCR เมื่อรายการที่มีดีเอ็นเอติดต่อและกระดูกตัวอย่างที่จะถูกรวมอัตราความสำเร็จโดยรวมลดลง (46%) (ตารางที่ 6) กลุ่มตัวอย่างกระดูกให้โปรไฟล์เต็มรูปแบบในการวิเคราะห์ดีเอ็นเอมาตรฐาน แต่ไม่มีผล genotyping ใช้วิธี PCR โดยตรง ความแตกต่างนี้เป็นส่วนใหญ่มักเกิดจากการใช้วัสดุกระดูกน้อยเกินไปสำหรับ PCR โดยตรง; ประมาณ 10 มิลลิลิตรของผงกระดูกถูกนำมาใช้ในการแยกดีเอ็นเอที่ 1/20 ถูกนำมาใช้เป็น input PCR (นี้สอดคล้องกับ 500 ไมโครลิตรผงกระดูก) ในขณะที่โดยตรง PCR เพียง 10 ไมโครลิตรผงกระดูกถูกเพิ่มเข้ามา