grown to a cell density of approxim

grown to a cell density of approximately 108 to 109 cells ml
1 overnight. Desulfovibrio
vulgaris strain RCH1 and Pseudomonas stutzeri strain RCH2 were both
grown anaerobically at 37°C overnight; D. vulgaris was grown in minimal medium
amended with 60 mM lactate and 50 mM sulfate under N2 headspace, while P.
stutzeri was grown in minimal freshwater medium amended with 10 mM lactate
and 20 mM nitrate under N2/CO2 (80:20) headspace. Bacillus subtilis, Burkholderia
cepacia, Arthrobacter chlorophenolicus, and E. coli were grown aerobically in
LB medium at 37°C overnight, with shaking at 150 rpm. Caulobacter crescentus
was grown aerobically in PYE (peptone, yeast extract) broth at 37°C overnight,
with shaking at 150 rpm. Sulfolobus solfataricus was grown aerobically at 80°C for
24 h with shaking at 150 in Brocks medium with tryptone, yeast extract, and
sucrose. Cells were pelleted by centrifugation, the spent medium was removed,
and cells were stored at
80°C. Cell pellets were resuspended in 50 l of
aluminum ammonium sulfate before RNA extraction using the methods described
below. From each strain we quantified the RNA using Ribogreen

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เติบโตเซลล์หนาแน่นของเซลล์ประมาณ 108 ถึง 109 ml 1 แอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์ Desulfovibriovulgaris สายพันธุ์ RCH1 และ Pseudomonas stutzeri ต้องใช้ RCH2 อย่างดีโต anaerobically ที่ 37° C ค้างคืน D. vulgaris ถูกปลูกในระดับปานกลางน้อยที่สุดแก้ไข ด้วย 60 มม. 50 มม.และ lactate ซัลเฟตภายใต้ headspace N2 ในขณะที่ P.stutzeri ถูกปลูกในกลางน้ำจืดน้อยที่แก้ไขกับ lactate 10 มม.และไนเตรต 20 มม.ภายใต้ headspace CO2 N2 (80:20) คัด subtilis, Burkholderiacepacia, Arthrobacter chlorophenolicus และ E. coli ถูกปลูก aerobicallyป.กลางที่ 37° C นอน มีการสั่นที่ 150 rpm Caulobacter crescentusถูกปลูก aerobically ซุป PYE (peptone สารสกัดจากยีสต์) ที่ 37° C ค้างคืนด้วยการสั่นที่ 150 รอบต่อนาที Sulfolobus solfataricus ถูกโต aerobically ที่ 80° C สำหรับ24 ชมกับการสั่นที่ 150 ใน Brocks กับ tryptone สารสกัดจากยีสต์ และซูโครส เซลล์ได้ pelleted โดย centrifugation ลบ ออก กลางใช้จ่ายและเซลล์ที่ถูกเก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียส เซลล์ขี้ถูก resuspended ใน 50 lอะลูมิเนียมซัลเฟตแอมโมเนียก่อนสกัดอาร์เอ็นเอโดยใช้วิธีอธิบายด้านล่างนี้ จากแต่ละต้องใช้ เรา quantified อาร์เอ็นเอโดยใช้ Ribogreen

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เติบโตขึ้นความหนาแน่นของเซลล์ประมาณ 108-109 มิลลิลิตรเซลล์หรือไม่? 1 ในชั่วข้ามคืน Desulfovibrio
สายพันธุ์ขิง RCH1 และความเครียด Pseudomonas stutzeri RCH2
ทั้งสองปลูกแบบไม่ใช้อากาศที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน; D. vulgaris
ปลูกในสื่อน้อยที่สุดการแก้ไขด้วยการให้น้ำนมมิลลิ60 และ 50 มมซัลเฟตภายใต้ N2 headspace ในขณะที่พี
stutzeri ถูกปลูกในกลางน้ำจืดน้อยที่สุดที่มีการแก้ไขเพิ่มเติมให้น้ำนมมิลลิ 10
และไนเตรท 20 มิลลิภายใต้ N2 / CO2 (80:20) headspace . เชื้อ Bacillus subtilis, Burkholderia
cepacia, chlorophenolicus Arthrobacter และเชื้อ E. coli มีปลูก aerobically
ในกลางLB ที่ 37 ° C ในชั่วข้ามคืนด้วยการเขย่า 150 รอบต่อนาทีที่ Caulobacter crescentus
ปลูก aerobically ใน PYE (เปปโตน, สารสกัดจากยีสต์) น้ำซุปที่ 37 ° C
ค้างคืนกับสั่นรอบต่อนาทีที่150 Sulfolobus solfataricus ปลูก aerobically ที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
24 ชั่วโมงด้วยการเขย่าที่ 150 ในสื่อ Brocks tryptone
กับสารสกัดจากยีสต์และน้ำตาลซูโครส เซลล์ที่ถูกเม็ดโดยการหมุนเหวี่ยงสื่อการใช้จ่ายจะถูกลบออกและเซลล์ที่ถูกเก็บไว้ที่? 80 องศาเซลเซียส
เซลล์เม็ดถูก resuspended ใน 50 ลิตรอลูมิเนียมแอมโมเนียมซัลเฟตก่อนที่จะสกัดอาร์เอ็นเอโดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ด้านล่าง จากแต่ละสายพันธุ์ที่เราวัดโดยใช้อาร์เอ็นเอ Ribogreen

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โตเซลล์ความหนาแน่นประมาณ 108 ถึง 109 เซลล์ ml
1 คืน สูตรเพิ่ม rch1 Pseudomonas stutzeri
สายพันธุ์และสายพันธุ์ rch2 ทั้งคู่
โตพ 37 ° C ในชั่วข้ามคืน ; D แบบที่ปลูกใน
สื่อน้อยที่สุดแก้ไขเพิ่มเติม 60 มม. และ 50 มม. และซัลเฟตใน N2 เฮดสเปซ ในขณะที่ P .
stutzeri ปลูกในน้อยที่สุดน้ำจืดกลางแก้ไขเพิ่มเติม
แลค 10 มม.และ 20 มม. ไนเตรตใต้ 2 / CO2 ( 80 ) เฮดสเปซ . Bacillus subtilis , Burkholderia cepacia ยา chlorophenolicus
, , และ E . coli ที่ปลูกใน aerobically
ปอนด์ขนาดกลางที่ 37 ° C ค้างคืนกับเขย่าด้วยความเร็ว 150 รอบต่อนาที caulobacter crescentus
โต aerobically ในไพ ( yeast extract extract ) น้ำซุปที่ 37 ° C ในชั่วข้ามคืน
เขย่าด้วยความเร็ว 150 รอบต่อนาที sulfolobus solfataricus โต aerobically 80 ° C
24 ชั่วโมง สั่นที่ 150 ใน brocks กลางกับทริพโทน , สารสกัดจากยีสต์และ
ซูโครส เซลล์มีเม็ดโดยการเหวี่ยงแยก , ใช้สื่อออก
และเซลล์ที่อุณหภูมิ 80 องศา
เซลล์เม็ดถูก resuspended 50  l
อลูมิเนียมแอมโมเนียมซัลเฟตก่อนการสกัด DNA โดยใช้วิธีการที่อธิบาย
ด้านล่าง จากแต่ละสายพันธุ์ที่เราใช้ ribogreen quantified .