2.6.1. Flow cytometryLeaf fragments

2.6.1. Flow cytometryLeaf fragments from in vitro-grown plants derived from theanther cultures were chopped with a razor blade in Lysisbuffer (15 mmol/l Tris, 2 mmol/l Na2EDTA, 0.5 mmol/l spermine,80 mmol/l KCl, 20 mmol/l NaCl, and 0.1% (v/v) Triton X-100; pH7.5) to release the nuclei. The entire sample was filtered througha 25 m nylon mesh and stained with 2 l DAPI. Analysis ofnuclei was conducted using a Partec CA II flow cytometer (PartecGmbH, Germany). Tissue from a diploid plant of P. forbesii wasused as an internal standard. The ploidy level of each tested plantwas determined based on a comparison between the fluorescencepeak value of the tested plants with that of the diploid con-trol.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6.1 บางส่วนของ cytometryLeaf กระแสจากในเครื่องปลูกพืชมาจากวัฒนธรรม theanther ถูกสับ ด้วยใบมีดโกนใน Lysisbuffer (15 mmol/l ตรี 2 mmol/l Na2EDTA สเปอร์มีน 0.5 mmol/l, 80 mmol/l KCl, 20 mmol/l NaCl และ 0.1% (v/v) ไตรตั้น X-100; pH7.5) การปลดปล่อยแอลฟา ตัวอย่างทั้งหมดถูกกรองตาข่ายไนล่อน 25 m througha และสี ด้วย DAPI 2 ลิตร Ofnuclei วิเคราะห์ได้ดำเนินการใช้ cytometer เป็นกระแส Partec CA II (PartecGmbH เยอรมนี) เนื้อเยื่อจากพืช diploid ของ P. forbesii wasused เป็นการภายใน พล็อยดีระดับของแต่ละ plantwas ทดสอบที่กำหนดตามการเปรียบเทียบระหว่างค่า fluorescencepeak ของพืชทดสอบที่ diploid con trol

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6.1 เศษไหล cytometryLeaf จากพืชในหลอดทดลองปลูกมาจากวัฒนธรรม theanther ถูกสับด้วยใบมีดโกนใน Lysisbuffer (15 มิลลิโมล / ลิตร Tris 2 มิลลิโมล / ลิตร Na2EDTA, 0.5 มิลลิโมล / ลิตรเปอร์ 80 มิลลิโมล / ลิตร KCl 20 มิลลิโมล / ลิตร โซเดียมคลอไรด์และ 0.1% (v / v) Triton X-100; pH7.5) ที่จะปล่อยนิวเคลียส กลุ่มตัวอย่างทั้งหมดถูกกรอง througha 25? เมตรตาข่ายไนลอนและย้อมด้วยสี 2 ลิตร DAPI วิเคราะห์ ofnuclei ได้ดำเนินการโดยใช้ CA พาร์เท็คครั้งที่สองไหล cytometer (PartecGmbH, เยอรมนี) จากเนื้อเยื่อพืชซ้ำพี forbesii wasused เป็นมาตรฐานภายใน ระดับ ploidy ของ plantwas ทดสอบแต่ละคำนวณจากการเปรียบเทียบระหว่างค่า fluorescencepeak ของพืชทดสอบกับที่ของนักโทษซ้ำ-trol

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดูแล . การไหล cytometryleaf เศษจากการเพาะปลูกพืชที่ได้มาจาก theanther วัฒนธรรมถูกสับด้วยมีดใน lysisbuffer ( 15 mmol / L หรือ 2 mmol / L na2edta 0.5 มิลลิโมล / ลิตรปีเตอร์ วิธ , 80 มิลลิโมล / ลิตรปริมาณ 20 mmol / L NaCl 0.1 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) Triton X-100 ; ph7.5 ) ปลดปล่อยนิวเคลียส . ตัวอย่างทั้งหมดถูกกรองหาทางออกได้เอง ถึงเป็นเรื่อง 25  เมตรตาข่ายไนลอนและย้อมด้วย 2  ผม dapi .การวิเคราะห์ ofnuclei ดำเนินการโดยใช้พาร์เท็ค CA การใช้โมโน 2 ( partecgmbh , เยอรมัน ) เนื้อเยื่อจากพืชซ้ำของหน้า forbesii ซึ่งเป็นมาตรฐานภายใน ในระดับของแต่ละการทดสอบ plantwas พิจารณาจากการเปรียบเทียบระหว่าง fluorescencepeak มูลค่าของพืชทดสอบกับของ con trol ซ้ำ .