M73258 and 123996136 for HPV types

M73258 and 123996136 for HPV types 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 and 68, respectively) FastStart Taq DNA polymerase (Roche Diagnostics, Basel, Switzerland), dNTP mix, dUTP labeled with Cy3 and specimen DNA. A total of 100-1,000 ng/3 μl specimen DNA was used in each reaction. PCR conditions were as folows: 4 min at 95˚C, followed by 40 cycles of 95˚C for 30 sec, 65˚C for 30 sec, 72˚C for 1 min, and one cycle of 72˚C for 7 min. The DNA samples were then applied to HPV genotyping arrays and hybridization was performed at 65˚C for 1 h. Samples were washed and dried, and analysis was performed using a micro‑array scanner (12). The HPV positivity rate was calculated based on positive results by either consensus PCR or genotyping, both of which use different primer settings. Molecular analysis was performed at least twice for confirmation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

M73258 และ 123996136 สำหรับ HPV ชนิด 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 และ 68 ตามลำดับ) FastStart Taq DNA พอลิเมอเรส (วินิจฉัย Roche บาเซิล สวิตเซอร์แลนด์), ผสม dNTP, dUTP ที่ติดป้าย Cy3 และสิ่งส่งตรวจดีเอ็นเอ จำนวน 100-1000 ng/3 μl ตัวอย่างดีเอ็นเอถูกใช้ในแต่ละปฏิกิริยา เงื่อนไข PCR ได้เป็น folows: 4 นาทีที่ 95˚C ตามวงจร 40 ของ 95˚C สำหรับ 72˚C ใน 1 นาที 30 วินาที 65˚C สำหรับ 30 วินาที และวงจรหนึ่งของ 72˚C ในนาที 7 ตัวอย่างดีเอ็นเอได้แล้วใช้ HPV genotyping เรย์ และ hybridization ทำที่ 65˚C สำหรับล้าง และอบแห้งอย่าง 1 h. และทำการวิเคราะห์โดยใช้สแกนเนอร์ micro‑array (12) คำนวณอัตรา positivity HPV จากผลบวก โดยมติ PCR หรือ genotyping ซึ่งทั้งสองใช้ค่ารองพื้นแตกต่างกัน การวิเคราะห์โมเลกุลที่ดำเนินการอย่างน้อยสองครั้งเพื่อยืนยัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

M73258 และ 123,996,136 สำหรับ HPV ชนิด 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 และ 68 ตามลำดับ) FastStart Taq ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ (Roche Diagnostics, บาเซิล, สวิตเซอร์) ผสม dNTP, dUTP กำกับด้วย Cy3 และดีเอ็นเอตัวอย่าง รวมของ 100-1,000 ng / 3 ไมโครลิตรตัวอย่างดีเอ็นเอถูกนำมาใช้ในการทำปฏิกิริยาแต่ละ เงื่อนไข PCR พบว่า folows: 4 นาทีที่ 95C ตามด้วย 40 รอบของ 95C เป็นเวลา 30 วินาที, 65C เป็นเวลา 30 วินาที, 72C เป็นเวลา 1 นาทีและเป็นหนึ่งในวงจรของ 72C เป็นเวลา 7 นาที ตัวอย่างดีเอ็นเอถูกนำไปใช้แล้วเพื่ออาร์เรย์ genotyping เชื้อ HPV และการผสมข้ามพันธุ์ได้รับการดำเนินการที่ 65C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ตัวอย่างถูกล้างและอบแห้งและการวิเคราะห์ถูกดำเนินการโดยใช้เครื่องสแกนเนอร์อาร์เรย์ไมโคร (12) อัตรา positivity เชื้อ HPV ที่คำนวณบนพื้นฐานของผลบวกโดยฉันทามติ PCR หรือ genotyping ซึ่งทั้งสองใช้การตั้งค่าที่แตกต่างกันไพรเมอร์ การวิเคราะห์โมเลกุลถูกดำเนินการอย่างน้อยสองครั้งเพื่อยืนยัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และ m73258 123996136 สำหรับ HPV ชนิด 16 , 18 , 31 , 33 , 35 , 39 , 45 , 51 , 52 , 56 , 58 , 59 และ 68 ตามลำดับ ) faststart แท็ค DNA polymerase ( โรชวินิจฉัย , Basel , สวิตเซอร์แลนด์ ) , dntp ผสมได้จากป้ายชื่อและ cy3 ตัวอย่างดีเอ็นเอ ทั้งหมดของระบบ ng / 3 μ l ตัวอย่างดีเอ็นเอที่ใช้ในแต่ละปฏิกิริยา เงื่อนไขซึ่งเป็น folows : 4 นาทีที่ 95 ˚ C ตามด้วย 40 รอบ 95 ˚เป็นเวลา 30 วินาที65 ˚เป็นเวลา 30 วินาที , 72 ˚ C นาน 1 นาที และ 1 รอบ 72 ˚องศาเซลเซียสเป็นเวลา 7 นาที ตัวอย่างดีเอ็นเอ แล้วใช้อาร์เรย์ชนิด HPV และส่งเสริมการ˚ที่ 65 องศาเซลเซียสนาน 1 ชั่วโมงทำการล้างและอบแห้ง และ วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้ ไมโคร‑เรย์เนอร์ ( 12 ) . ล้างทั้งอัตราการคํานวณตามผลลัพธ์ที่เป็นบวก โดยวิธี PCR หรือการอ่านฉันท์ ,การตั้งค่าทั้งสองซึ่งใช้ไพรเมอร์ที่แตกต่างกัน การวิเคราะห์ระดับโมเลกุลการอย่างน้อยสองครั้งเพื่อยืนยัน