Standard methods for the detection and analysis of RNA molecules
are limited in their usefulness either because of the large quantity
of RNA needed for detection or the degree of technical expertise
required to perform the methodologies. The technique of DNA amplification
by PCR (Saiki et al., 1985; Mullis and Faloona, 1987)has
been extended to include RNA as the starting template by first
converting RNA to cDNA by a retroviral reverse transcriptase (Veres
et al., 1987; Powell et al., 1987). Detailed methodologies for coupling
reverse transcription and PCR (RT-PCR)can be found in several
laboratory manuals (Kawasaki and Wang, 1989; Kawasaki, 1990). The
rapid incorporation of this technology into the standard repertoire of
molecular biology techniques has enabled researchers in diverse
fields to use and extend the original method. The process of RT-PCR
has proved invaluable for detecting gene expression, generating
cDNA for cloning, and diagnosing infectious agents or genetic diseases.
วิธีมาตรฐานในการตรวจหาและวิเคราะห์โมเลกุล RNA
จะถูก จำกัด ในประโยชน์ของตนเช่นกัน เพราะปริมาณขนาดใหญ่ของที่จำเป็นสำหรับการตรวจหา RNA
หรือระดับของความเชี่ยวชาญทางเทคนิค
ต้องแสดงวิธีการ เทคนิคเพิ่มจำนวน DNA โดยวิธี PCR
( ไซคิ et al . , 1985 ; ลิส และ faloona , 1987 ) ได้
ถูกขยายเพื่อรวม RNA เป็นแม่แบบ โดยเริ่มแรก
วิธีเปลี่ยน RNA โดยอาการกลับ retroviral ( veres
et al . , 1987 ; พาวเวลล์ et al . , 1987 ) วิธีการถอดความย้อนกลับของ coupling
และ PCR ( RT-PCR ) พบได้ในคู่มือปฏิบัติการหลาย
( คาวาซากิ และวัง , 1989 ; คาวาซากิ , 1990 )
อย่างรวดเร็วประสานเทคโนโลยีนี้ในเรื่องมาตรฐาน
เทคนิคทางชีววิทยาระดับโมเลกุลทำให้นักวิจัยในหลากหลายสาขาและขยาย
ใช้วิธีเดิม กระบวนการ RT-PCR
ได้พิสูจน์หาค่ามิได้สำหรับการตรวจสอบการแสดงออกของยีนที่สร้าง
cDNA สำหรับการโคลนนิ่ง และการวินิจฉัยการติดเชื้อ
หรือโรคทางพันธุกรรม
การแปล กรุณารอสักครู่..