To investigate the effectiveness of marine bacteria as a new marker of drowning in seawater, we determined the optimal conditions of media required to selectively detect marine bacteria and applied the technique to drowned cadavers. We incubated model blood samples (n = 20 per group) mixed with seawater, river, tap or muddy water on agar plates (Todd Hewitt, TH; Marine 2216, M2216) and determined the NaCl concentration required to selectively detect marine bacteria. We also used TCBS agar plates without manipulation to isolate Vibrio spp. Among the culture media, TH agar was superior. Bioluminescent colonies were detected only in blood mixed with seawater. Blue colonies stained using the cytochrome oxidase test (COT), were detected in blood mixed with both sea and river water. However when the NaCl concentration was above 4%, COT stained colonies were detectable only in blood mixed with seawater. We subsequently used 2, 3 and 4% NaCl in TH and TCBS agar to examine blood from victims who had drowned in seawater (n = 8) and in fresh water (n = 7), as well as from victims who died near aquatic environments (non drowned; dry-land control, n = 7). Bioluminescent colonies were detectable on 2–4% NaCl TH agar only from two victims that drowned in seawater. Bioluminescent colonies did not grow on TCBS agar. Blue colonies from all cadavers that had drowned in seawater (8/8) and in four of those that had drowned in fresh water (4/7) proliferated on TH agar containing 2% and/or 3% NaCl, but at 4% NaCl such colonies were detected only from cadavers that had drowned in seawater (8/8). Colonies from only one cadaver from seawater grew on TCBS agar. Furthermore, neither bioluminescent nor blue colonies were detected on TH agar containing 4% NaCl in samples from two cadavers found in an estuary (brackish water) who were thought to have been carried from areas of fresh water. Homologous analyses of the 16S rRNA gene revealed that the dominant colonies on TH agar containing 4% NaCl were marine bacteria (Photobacterium, Vibrio, Shewanella, Psychrobacter). Thus, proliferating bioluminescent and/or blue colonies detected in the blood of immersed cadavers using 4% NaCl TH agar, could help to establish drowning in seawater.
เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพของแบคทีเรียน้ำเค็มเป็นเครื่องหมายใหม่ของการจมน้ำในน้ำทะเลที่เรากำหนดสภาวะที่เหมาะสมของสื่อที่จำเป็นในการตรวจสอบการคัดเลือกแบคทีเรียทางทะเลและการใช้เทคนิคที่จะจมน้ำศพ เราบ่มตัวอย่างรูปแบบเลือด (n = 20 ต่อกลุ่ม) ผสมกับน้ำทะเลแม่น้ำแตะหรือน้ำโคลนบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ (ทอดด์เฮวิตต์, TH; ทะเล 2216 M2216) และกำหนดความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ที่จำเป็นในการตรวจสอบการคัดเลือกแบคทีเรียทะเล นอกจากนี้เรายังใช้ TCBS แผ่นวุ้นโดยการจัดการเพื่อแยกเชื้อ Vibrio spp ท่ามกลางสื่อวัฒนธรรม, TH วุ้นดีกว่า อาณานิคมเรืองแสงถูกตรวจพบในเลือดผสมกับน้ำทะเล บลูอาณานิคมย้อมสีโดยใช้การทดสอบ cytochrome oxidase (COT) ถูกตรวจพบในเลือดผสมที่มีทั้งทะเลและน้ำในแม่น้ำ แต่เมื่อความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์สูงกว่า 4% COT เปื้อนอาณานิคมตรวจพบเฉพาะในเลือดผสมกับน้ำทะเล ต่อมาจึงได้ใช้ 2, 3 และ 4% โซเดียมคลอไรด์ใน TH และ TCBS agar เพื่อตรวจสอบเลือดจากผู้ที่ตกเป็นเหยื่อที่ได้จมอยู่ในน้ำทะเล (n = 8) และน้ำจืด (n = 7) รวมทั้งจากผู้ที่ตกเป็นเหยื่อที่เสียชีวิตอยู่ใกล้กับสภาพแวดล้อมทางน้ำ (ยังไม่ได้จมน้ำการควบคุมแห้งที่ดิน n = 7) อาณานิคมเรืองแสงถูกตรวจพบใน 2-4% NaCl TH วุ้นจากเหยื่อทั้งสองที่จมอยู่ในน้ำทะเล อาณานิคมเรืองแสงไม่ได้เติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อ TCBS บลูอาณานิคมจากศพทั้งหมดที่ได้จมอยู่ในน้ำทะเล (8/8) และในสี่ของผู้ที่ได้จมอยู่ในน้ำจืด (4/7) แพร่กระจายออกไปในวันที่วุ้นมี 2% และ / หรือ 3% NaCl แต่ที่ 4% โซเดียมคลอไรด์ อาณานิคมดังกล่าวถูกตรวจพบจากศพที่จมอยู่ในน้ำทะเล (8/8) อาณานิคมจากเพียงหนึ่งซากศพจากน้ำทะเลที่ขึ้นอยู่บน TCBS agar นอกจากนี้ค่ามิได้เรืองแสงสีฟ้าอาณานิคมถูกตรวจพบในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี TH 4% โซเดียมคลอไรด์ในตัวอย่างจากสองศพที่พบในบริเวณปากแม่น้ำ (น้ำกร่อย) ที่กำลังคิดว่าจะได้รับการดำเนินการจากพื้นที่น้ำจืด การวิเคราะห์ความคล้ายคลึงกันของยีน 16S rRNA เปิดเผยว่าอาณานิคมที่โดดเด่นบน TH วุ้นที่มี 4% โซเดียมคลอไรด์เป็นแบคทีเรียทะเล (Photobacterium, Vibrio, Shewanella, Psychrobacter) ดังนั้น proliferating เรืองแสงและ / หรือสีฟ้าอาณานิคมตรวจพบในเลือดของศพแช่ใช้ 4% NaCl TH วุ้นอาจช่วยในการสร้างการจมน้ำในน้ำทะเล
การแปล กรุณารอสักครู่..