To investigate the effectiveness of

To investigate the effectiveness of marine bacteria as a new marker of drowning in seawater, we determined the optimal conditions of media required to selectively detect marine bacteria and applied the technique to drowned cadavers. We incubated model blood samples (n = 20 per group) mixed with seawater, river, tap or muddy water on agar plates (Todd Hewitt, TH; Marine 2216, M2216) and determined the NaCl concentration required to selectively detect marine bacteria. We also used TCBS agar plates without manipulation to isolate Vibrio spp. Among the culture media, TH agar was superior. Bioluminescent colonies were detected only in blood mixed with seawater. Blue colonies stained using the cytochrome oxidase test (COT), were detected in blood mixed with both sea and river water. However when the NaCl concentration was above 4%, COT stained colonies were detectable only in blood mixed with seawater. We subsequently used 2, 3 and 4% NaCl in TH and TCBS agar to examine blood from victims who had drowned in seawater (n = 8) and in fresh water (n = 7), as well as from victims who died near aquatic environments (non drowned; dry-land control, n = 7). Bioluminescent colonies were detectable on 2–4% NaCl TH agar only from two victims that drowned in seawater. Bioluminescent colonies did not grow on TCBS agar. Blue colonies from all cadavers that had drowned in seawater (8/8) and in four of those that had drowned in fresh water (4/7) proliferated on TH agar containing 2% and/or 3% NaCl, but at 4% NaCl such colonies were detected only from cadavers that had drowned in seawater (8/8). Colonies from only one cadaver from seawater grew on TCBS agar. Furthermore, neither bioluminescent nor blue colonies were detected on TH agar containing 4% NaCl in samples from two cadavers found in an estuary (brackish water) who were thought to have been carried from areas of fresh water. Homologous analyses of the 16S rRNA gene revealed that the dominant colonies on TH agar containing 4% NaCl were marine bacteria (Photobacterium, Vibrio, Shewanella, Psychrobacter). Thus, proliferating bioluminescent and/or blue colonies detected in the blood of immersed cadavers using 4% NaCl TH agar, could help to establish drowning in seawater.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การตรวจสอบประสิทธิภาพของแบคทีเรียทะเลเครื่องหมายใหม่ของการจมน้ำในทะเล เรากำหนดเงื่อนไขที่เหมาะสมของสื่อที่ต้องเลือกตรวจหาแบคทีเรียทะเล และใช้เทคนิคได้รับ cadavers เราได้รับการกกแบบเลือดตัวอย่าง (n = 20 ต่อกลุ่ม) ผสมกับน้ำทะเล แม่น้ำ แตะ หรือโคลนบนแผ่นวุ้น (ทอดด์ Hewitt, TH มารีน 2216, M2216) และกำหนดความเข้มข้นของ NaCl ที่ต้องเลือกตรวจหาแบคทีเรียทะเล เรายังใช้แผ่นอาหารเลี้ยงเชื้อ TCBS ไม่จัดการแยกออกซิเจนปริมาณวิบริโอ ในสื่อวัฒนธรรม วุ้น TH เป็นห้องซูพีเรีย อาณานิคมเรืองตรวจพบในเลือดผสมกับน้ำทะเลเท่านั้น สีฟ้าอาณานิคมย้อมใช้ cytochrome oxidase ทดสอบ (เปล) ตรวจพบในเลือดผสมกับน้ำทะเลและแม่น้ำ อย่างไรก็ตาม เมื่อ NaCl ความเข้มข้นสูงกว่า 4% เปลย้อมอาณานิคมถูกตรวจพบในเลือดผสมกับน้ำทะเลเท่านั้น เราใช้มา 2, 3 และ 4% NaCl ในอาหารเลี้ยงเชื้อ TCBS และ TH ในการตรวจสอบเลือดจากเหยื่อที่มีการจมน้ำในทะเล (n = 8) และ ในน้ำจืด (n = 7), เช่นเดียวกับจากเหยื่อที่เสียชีวิตใกล้กับสภาพแวดล้อมทางน้ำ (ไม่ใช่เพชฌฆาต ควบคุมแผ่นดินแห้ง n = 7) อาณานิคมเรืองถูกตรวจจับได้บนวุ้น NaCl TH 2-4% จากเหยื่อสองที่จมน้ำในน้ำทะเลเท่านั้น อาณานิคมเรืองไม่ได้เติบโตบนอาหารเลี้ยงเชื้อ TCBS อาณานิคมจาก cadavers ทั้งหมดที่มีการจมน้ำในทะเลสีน้ำเงิน (8/8) และ ในสี่ของที่มีการจมน้ำในน้ำจืด (4/7) proliferated ใน TH วุ้นที่มี 2% หรือ 3% NaCl แต่ ที่ 4% NaCl อาณานิคมดังกล่าวตรวจพบเฉพาะจาก cadavers ที่มีการจมน้ำในทะเล (8/8) อาณานิคมจาก cadaver เดียวจากน้ำทะเลเติบโตบนอาหารเลี้ยงเชื้อ TCBS นอกจากนี้ อาณานิคมเรือง ไม่สีฟ้าพบบนวุ้น TH ที่ประกอบด้วย 4% NaCl ในตัวอย่างจากสอง cadavers ที่พบในน้ำ (น้ำกร่อย) ที่ว่า เนื่องจากพื้นที่น้ำจืด เซทจะมีการวิเคราะห์ยีน 16S rRNA เผยว่า อาณานิคมโดดเด่นบนวุ้น TH ที่ประกอบด้วย 4% NaCl ทะเลแบคทีเรีย (Photobacterium เค็ม Shewanella, Psychrobacter) ดังนั้น proliferating เรือง หรือบลูอาณานิคมที่ตรวจพบในเลือดของใช้ 4% NaCl TH วุ้นแช่ cadavers สามารถช่วยการจมน้ำในทะเล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพของแบคทีเรียน้ำเค็มเป็นเครื่องหมายใหม่ของการจมน้ำในน้ำทะเลที่เรากำหนดสภาวะที่เหมาะสมของสื่อที่จำเป็นในการตรวจสอบการคัดเลือกแบคทีเรียทางทะเลและการใช้เทคนิคที่จะจมน้ำศพ เราบ่มตัวอย่างรูปแบบเลือด (n = 20 ต่อกลุ่ม) ผสมกับน้ำทะเลแม่น้ำแตะหรือน้ำโคลนบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ (ทอดด์เฮวิตต์, TH; ทะเล 2216 M2216) และกำหนดความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ที่จำเป็นในการตรวจสอบการคัดเลือกแบคทีเรียทะเล นอกจากนี้เรายังใช้ TCBS แผ่นวุ้นโดยการจัดการเพื่อแยกเชื้อ Vibrio spp ท่ามกลางสื่อวัฒนธรรม, TH วุ้นดีกว่า อาณานิคมเรืองแสงถูกตรวจพบในเลือดผสมกับน้ำทะเล บลูอาณานิคมย้อมสีโดยใช้การทดสอบ cytochrome oxidase (COT) ถูกตรวจพบในเลือดผสมที่มีทั้งทะเลและน้ำในแม่น้ำ แต่เมื่อความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์สูงกว่า 4% COT เปื้อนอาณานิคมตรวจพบเฉพาะในเลือดผสมกับน้ำทะเล ต่อมาจึงได้ใช้ 2, 3 และ 4% โซเดียมคลอไรด์ใน TH และ TCBS agar เพื่อตรวจสอบเลือดจากผู้ที่ตกเป็นเหยื่อที่ได้จมอยู่ในน้ำทะเล (n = 8) และน้ำจืด (n = 7) รวมทั้งจากผู้ที่ตกเป็นเหยื่อที่เสียชีวิตอยู่ใกล้กับสภาพแวดล้อมทางน้ำ (ยังไม่ได้จมน้ำการควบคุมแห้งที่ดิน n = 7) อาณานิคมเรืองแสงถูกตรวจพบใน 2-4% NaCl TH วุ้นจากเหยื่อทั้งสองที่จมอยู่ในน้ำทะเล อาณานิคมเรืองแสงไม่ได้เติบโตในอาหารเลี้ยงเชื้อ TCBS บลูอาณานิคมจากศพทั้งหมดที่ได้จมอยู่ในน้ำทะเล (8/8) และในสี่ของผู้ที่ได้จมอยู่ในน้ำจืด (4/7) แพร่กระจายออกไปในวันที่วุ้นมี 2% และ / หรือ 3% NaCl แต่ที่ 4% โซเดียมคลอไรด์ อาณานิคมดังกล่าวถูกตรวจพบจากศพที่จมอยู่ในน้ำทะเล (8/8) อาณานิคมจากเพียงหนึ่งซากศพจากน้ำทะเลที่ขึ้นอยู่บน TCBS agar นอกจากนี้ค่ามิได้เรืองแสงสีฟ้าอาณานิคมถูกตรวจพบในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี TH 4% โซเดียมคลอไรด์ในตัวอย่างจากสองศพที่พบในบริเวณปากแม่น้ำ (น้ำกร่อย) ที่กำลังคิดว่าจะได้รับการดำเนินการจากพื้นที่น้ำจืด การวิเคราะห์ความคล้ายคลึงกันของยีน 16S rRNA เปิดเผยว่าอาณานิคมที่โดดเด่นบน TH วุ้นที่มี 4% โซเดียมคลอไรด์เป็นแบคทีเรียทะเล (Photobacterium, Vibrio, Shewanella, Psychrobacter) ดังนั้น proliferating เรืองแสงและ / หรือสีฟ้าอาณานิคมตรวจพบในเลือดของศพแช่ใช้ 4% NaCl TH วุ้นอาจช่วยในการสร้างการจมน้ำในน้ำทะเล