Clonal isolation of Acanthamoeba. B

Clonal isolation of Acanthamoeba. Before processing for
species identification, plates were examined using a dissecting
microscope to identify regions containing Acanthamoeba. Any
amoeba resembling acanthamoebae (based on cyst morphology)
was subcultured onto a fresh NNA plate with E. coli. If Acanthamoeba
growth was verified on the second plate, individual
cells that had migrated away from the bacterial smear were
transferred to a fresh agarIE. coli plate. This procedure was
repeated until a clonal culture was established. A total of twenty
Acunthamoeba clones was obtained from the south Florida
beach samples. For comparison, three clones of acanthamoebae
were also isolated from soil near Hollywood Beach, Florida and
one clone was isolated from a temperate beach in Irvine, Scotland
(55.6" N, 4.6" W).
In addition to the beach and soil isolates examined in this
study, other isolates of Acanthamoeba were studied for comparison.
One clone was isolated from tap water from an apartment
complex in Fort Lauderdale, Florida. This sample was
obtained by insertion of a sterile swab several centimetres into
a cold-water faucet, and used to scrape off some of the biofilm
of the faucet. The swab head was place on NNA with E. coli
as a food source. After incubation, acanthamoebae that grew
out on the agar surface, were subsequently clonally isolated as
described above, and included in this study. Six additional tapwater
isolates and five corneal scrape isolates from a previous
study in Hong Kong (Booton et al. 2002) were also considered
in this study; these isolates were supplied from stock cultures
maintained by G. Booton (OSU). Lastly, A. polyphaga obtained
from the Culture Collection of Algae and Protists (CCAP) was
included for comparison.
These novel clonal cultures of Acanthamoeba (as cysts) were
sent to Ohio State University (OSU) for molecular typing. Upon
arrival at OSU, clonal isolates were subcultured onto fresh

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แยก Clonal ของ Acanthamoeba ก่อนที่จะประมวลผลสำหรับ
การระบุชนิดแผ่นมีการตรวจสอบโดยใช้ผ่าตัด
กล้องจุลทรรศน์เพื่อระบุพื้นที่ซึ่งมี Acanthamoeba ใด ๆ
อะมีบาคล้าย acanthamoebae (ขึ้นอยู่กับลักษณะทางสัณฐานวิทยาถุง)
ได้รับการเลี้ยงลงบนแผ่น NNA สดกับเชื้อ E. coli หาก Acanthamoeba
การเจริญเติบโตคือการตรวจสอบบนจานที่สองแต่ละ
เซลล์ที่ได้อพยพออกไปจาก smear แบคทีเรียถูก
ถ่ายโอนไปยัง agarIE สด แผ่น coli ขั้นตอนนี้จะถูก
ทำซ้ำจนกว่าวัฒนธรรม clonal ก่อตั้งขึ้น ทั้งหมดยี่สิบ
โคลน Acunthamoeba ที่ได้รับจากฟลอริดาตอนใต้
ตัวอย่างชายหาด สำหรับการเปรียบเทียบสามโคลนของ acanthamoebae
ยังแยกได้จากดินที่อยู่ใกล้ฮอลลีบีช, ฟลอริด้าและ
โคลนหนึ่งที่แยกได้จากชายหาดพอสมควรใน Irvine, ก็อตแลนด์
(55.6 "N, 4.6" W).
นอกเหนือจากชายหาดและแยกดินตรวจสอบใน นี้
การศึกษาสายพันธุ์อื่น ๆ ของ Acanthamoeba ศึกษาเปรียบเทียบ.
หนึ่งโคลนแยกได้จากน้ำประปาจากอพาร์ทเม้น
ที่ซับซ้อนใน Fort Lauderdale, ฟลอริด้า ตัวอย่างนี้ถูก
ที่ได้รับจากการแทรกของไม้กวาดผ่านการฆ่าเชื้อหลายเซนติเมตรเข้า
ก๊อกน้ำเย็นและใช้ในการปาดบางส่วนของไบโอฟิล์ม
ของก๊อกน้ำ หัวไม้กวาดเป็นสถานที่ใน NNA กับเชื้อ E. coli
เป็นแหล่งอาหาร หลังจากบ่ม acanthamoebae ที่งอก
ออกมาบนพื้นผิววุ้นถูกต่อมาแยกเป็น clonally
อธิบายไว้ข้างต้นและรวมอยู่ในการศึกษาครั้งนี้ หก tapwater เพิ่มเติม
แยกและแยกห้าขูดกระจกตาจากที่ก่อนหน้านี้
การศึกษาในฮ่องกง (Booton et al, 2002). ยังได้รับการพิจารณา
ในการศึกษาครั้งนี้ สายพันธุ์เหล่านี้ถูกจัดมาจากวัฒนธรรมที่สต็อก
เก็บรักษาโดยจี Booton (OSU) สุดท้ายเอ polyphaga ที่ได้รับ
จากการสะสมวัฒนธรรมของสาหร่ายและ protists (CCAP) ถูก
รวมสำหรับการเปรียบเทียบ.
เหล่านี้วัฒนธรรม clonal นวนิยาย Acanthamoeba (เป็นซีสต์) ที่ถูก
ส่งไปยังมหาวิทยาลัยแห่งรัฐโอไฮโอ (OSU) สำหรับการพิมพ์ในระดับโมเลกุล เมื่อ
มาถึงที่ OSU, ไอโซเลท clonal ถูกเลี้ยงบนสด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกงานทุกครั้ง . ก่อนที่จะแปรรูป
จำแนกชนิด แผ่นถูกตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เพื่อระบุพื้นที่ที่มีผ่า
ทุกครั้ง . ใด ๆ acanthamoebae
อะมีบา ( ขึ้นอยู่กับลักษณะคล้ายซีสต์ )
คือ subcultured ลงบนจาน nna สดที่มีเชื้อ อีโคไล ถ้าการตรวจสอบในจานทุกครั้ง

สองแต่ละเซลล์ที่ได้อพยพออกไปจากละเลงแบคทีเรียถูก
ย้ายไป agarie สด จากจาน ขั้นตอนนี้ซ้ำจนกว่าวัฒนธรรมงาน
ก่อตั้งขึ้น รวมยี่สิบ
acunthamoeba โคลนที่ได้จากฟลอริดาตอนใต้
ชายหาดอย่าง สำหรับการเปรียบเทียบ , สามโคลนของ acanthamoebae
ยังแยกได้จากดินใกล้ Hollywood Beach , Florida และ
หนึ่งที่ถูกแยกจากชายหาดพอสมควรในเออร์ไวน์ , สกอตแลนด์
( ก่อน " N , 4.6 " w )
นอกจากชายหาดและดินจากการตรวจสอบในการศึกษา
, อื่น ๆ พบว่าทุกครั้ง ศึกษาเปรียบเทียบ
1 โคลนถูกแยกจากน้ำประปาจากอพาร์ทเม้นท์
ซับซ้อนใน Fort Lauderdale ฟลอริด้า ตัวอย่างนี้คือ
ได้โดยการแทรกไม้กวาดหลายเซนติเมตรใน
เป็นหมันเย็นน้ำ ก๊อกน้ำ ใช้ขูดบางส่วนของไบโอฟิล์ม
ของก๊อก หัวไม้ถูพื้นเป็นสถานที่ในเควสท์กับ E . coli
เป็นแหล่งอาหาร หลังจากระยะเวลา acanthamoebae เติบโต
ออกบนผิวหน้าวุ้น จัดการแยกเป็น clonally
ที่อธิบายไว้ข้างต้นและรวมอยู่ในการศึกษา 6 เพิ่มเติม tapwater
ไอโซเลทและห้าแยกกระจกตาขูดจากก่อนหน้านี้
การศึกษาในฮ่องกง ( booton et al . 2002 ) ก็ถือว่า
ในการศึกษาไอโซเลท ; เหล่านี้มาจากหุ้นวัฒนธรรม
รักษาโดย booton ( ใกล้ ) สุดท้าย . polyphaga ได้
จากวัฒนธรรมคอลเลกชันของสาหร่ายและโพรทิสต์ ( ccap ) คือ

รวมสำหรับการเปรียบเทียบ รูปแบบของวัฒนธรรมเหล่านี้ใหม่ทุกครั้ง ( ซีสต์ )
ส่งไปที่มหาวิทยาลัยโอไฮโอสเตต ( ใกล้ ) โมเลกุลที่พิมพ์ เมื่อ
มาถึงที่ใกล้งาน subcultured , ไอโซเลทบนสด