Cell-free culture supernatants of S. sciuri I20-1 were prepared as
described above and successively two-fold diluted with sodium
phosphate buffer solution (PBS; pH 6.5). To verify thermal tolerance
of the antibacterial compound, heat treatments were done at 121 C
for 15 min and at 60, 80, and 100 C for 30 and 60 min. Supernatants
were cooled immediately to 4 C and spotted within 1 h following
the agar spot test procedure described above. The proteinaceous
nature of the antibacterial compound was tested by adding
10 mg ml1 of proteinase K (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) and
incubating at 37 C for 1 h. The antibacterial activity was assayed
using the agar spot test with S. aureus E002 and G111 as indicators,
since the latter two strains gave the sharpest inhibition zones
during preliminary experiments (data not shown). Activity of the
supernatant was expressed in arbitrary units (AU) per ml and was
calculated as follows: AU ml1 ¼ 2n 100, where n is the last
dilution for which an inhibition zone could be seen (Leroy & De
Vuyst, 2005). All experiments were done at least in triplicate to
verify reproducibility.
มือถือฟรี supernatants วัฒนธรรมของเอส sciuri I20-1 ได้จัดทำขึ้นเป็น
อธิบายข้างต้นและต่อเนื่องสองเท่าเจือจางด้วยโซเดียม
แก้ปัญหาฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส; ค่า pH 6.5) เพื่อตรวจสอบความทนทานต่อความร้อน
ของสารต้านเชื้อแบคทีเรีย, การรักษาความร้อนได้ทำที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส
นาน 15 นาทีและ 60, 80, และ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 และ 60 นาที supernatants
ถูกทำให้เย็นลงทันทีถึง 4 องศาเซลเซียสและด่างภายใน 1 ชั่วโมงต่อไปนี้
ขั้นตอนการทดสอบจุดวุ้นอธิบายไว้ข้างต้น โปรตีน
ธรรมชาติของสารต้านเชื้อแบคทีเรียที่ได้รับการทดสอบโดยการเพิ่ม
10 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร 1 ของโปร K (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) และ
บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง กิจกรรมการต้านเชื้อแบคทีเรียที่ได้รับการวิเคราะห์
โดยใช้การทดสอบจุดวุ้นกับเชื้อ S. aureus E002 และ G111 เป็นตัวชี้วัด
ตั้งแต่หลังสองสายพันธุ์ที่ให้ความคมชัดยับยั้ง
ในระหว่างการทดลองเบื้องต้น (ไม่ได้แสดงข้อมูล) กิจกรรมของ
สารละลายถูกแสดงในหน่วยพล (AU) ต่อมล. และได้รับการ
คำนวณดังนี้ AU มล. 1 ¼ 2n? 100 ที่ n คือที่ผ่านมา
เจือจางที่โซนยับยั้งอาจจะเห็น (Leroy & De
Vuyst 2005) การทดลองได้ทำอย่างน้อยในเพิ่มขึ้นสามเท่าที่จะ
ตรวจสอบการทำสำเนา
การแปล กรุณารอสักครู่..
