Protoplasts of two color mutants of Trichoderma harzianum derived from ultraviolet treatment were prepared by using lytic enzyme system (10 mg Zymolyase, 150 mg Uzukizyme, 10 mg Chitinase and 150 mg Funcelase in 3 ml water, pH 5.0) containing 0.6 M NaC1 as an osmotic stabilizer. Fusion between protoplasts of two color mutants was observed in the solution containing 0.05 M glycine-NaOH buffer, pH 7.5, 0.05 M CaCl2. 2H20 and 35 percent polyethylene glycol (MW.6,000). The fused protoplasts were successfully detected at the rate of 2 percent as green colonies developed on a hypertonic solid culture medium (complete medium) overlaid with hypertonic soft medium (MM with 0.5 percent agar). Production of well defined white and yellow sectors on agar surface of minimal medium supplemented with 0.1 percent (W/V) d-camphor represented the heterokaryotic fusants. Green conidia were constantly obtained after transferring the green part from green-sectored colonies onto MM agar. This indicated that protoplast fusants were heterozygous diploid.
protoplasts ของทั้งสองสายพันธุ์ที่สีของเชื้อรา Trichoderma harzianum ที่ได้รับจากการรักษาอัลตราไวโอเลตถูกจัดทำขึ้นโดยใช้ระบบเอนไซม์ lytic (10 mg zymolyase, 150 mg uzukizyme, ไคติเนส 10 มก. และ 150 มก. funcelase ในน้ำ มล. 3, pH 5.0) ที่มี 0.6 เมตร nac1 เป็นออสโมติก ผู้ทำให้มั่นคง ฟิวชั่นระหว่าง protoplasts ของทั้งสองสายพันธุ์สีพบว่าในสารละลายที่มี 0.05 เมตร glycine-NaOH buffer,pH 7.5, 0.05 เมตร CaCl2 2h20 และ 35 ร้อยละพลาสติกคอล (mw.6, 000) protoplasts ผสมถูกตรวจพบประสบความสำเร็จในอัตราร้อยละ 2 เป็นโคโลนีสีเขียวพัฒนาบนกลางวัฒนธรรม hypertonic ของแข็ง (กลางสมบูรณ์) หนักหน่วงปานกลางอ่อน hypertonic (มม. กับวุ้นร้อยละ 0.5)การผลิตของภาคสีขาวและสีเหลืองที่กำหนดไว้บนพื้นผิวของอาหารเลี้ยงเชื้อของสื่อเสริมด้วยน้อยที่สุดร้อยละ 0.1 (w / v) D-การบูรแสดง fusants heterokaryotic สปอร์สีเขียวที่ได้รับอย่างต่อเนื่องหลังจากที่การถ่ายโอนส่วนสีเขียวจากอาณานิคมสีเขียวลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ Sectored มม. นี้ชี้ให้เห็นว่า fusants พลาสต์เป็นซ้ำ heterozygous
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)