HREI-MS, which showed the [M]+ at m

HREI-MS, which showed the [M]+ at m/z 340.2042 (calcd.
340.2038). The kmax in UV spectrum at 248 nm indicated the presence
of a cross conjugated dienone system [26]. The IR spectrum
displayed absorbance for OH (3305 cm
1
), and a cross conjugated
dienone moiety (1663, and 1619 cm
1
). The 1
H NMR spectrum of
metabolite 5 was distinctly similar to substrate 1, except for a
downfield signal at d 4.30 (Table 1). The signal for one olefinic carbon
was also found missing in the 13C NMR spectrum of metabolite
5. This indicated the reduction of one C@C bond, out of three. It
also showed ketonic carbonyl carbon at d 187.8 (Table 2). The
structure of compound 5 was further deduced based on HMBC
correlations. H-19 (d 1.25) showed HMBC correlations with C-1
(d 153.2) and C-5 (d 173.0), indicating the presence of a C@C
between C-1/C-2 (Fig. 2). The C-1/C-2 C@C resulted from the isomerization
of C-2/C-3 double bond. Whereas, isoxazole ring was
hydrolytically cleaved leaving an OH at C-22. The newly formed
oxymethylene protons (d 4.29 and 4.34) showed HMBC correlations
with C-1 (d 153.2), and C-2 (d 137.1), further supporting isomerization
of C@C, and hydroxylation at C-22. The stereochemistry
of compound 5 was found to be similar to substrate 1 (Fig. 3). The
structure of compound 5 was thus deduced as 17b-hydroxy-2-
(hydroxymethyl)-17a-pregn-1,4-dien-20-yn-3-one. It was previously
reported by Choudhary et al., from the biotransformation
of substrate 1 with Fusarium lini, Cephalosporium aphidicola, and
Aspergillus niger [27].
3.1. Cytotoxicity against cancer cell line
Danazol (1) showed strong cytotoxicity against the human cervical
cancer cell line (HeLa) with IC50 value of 0.283 ± 0.013 lM in
preliminary screening, more cytotoxic than the anticancer drug
doxorubicin (standard) (IC50 = 0.506 ± 0.015 lM). We therefore,
decided to evaluate the transformed products of danazol (1)
against HeLa cell line. Interestingly only metabolite 3 was found
to be active with IC50 = 13.427 ± 0.819 lM (Table 3).
Danazol (1) has an isoxazole ring fused with the ring-A of steroidal
skeleton. The cytotoxic potential of danazol (1) may be due to
isoxazole ring. It showed no cytotoxic potential due to loss of isoxazole
ring, as observed in compounds 2 and 5. Hydroxylation at
various positions of danazol (1) also decreased its activity or even
made it inactive. C-1 hydroxylation (compound 3) decreased cytotoxic
potential of danazol (1) (IC50 = 13.427 ± 0.819 lM). Similarly,
b-hydroxylation at C-6 (as in compound 4) made it inactive against
HeLa cancer cell lines.
4. Conclusion
In conclusion, the microbial transformation of danazol (1) with
C. blakesleeana yielded three new 2–4 and a known metabolite 5.
This involves hydroxylation at C-1, C-6 and C-15, whereas oxidation
at C-3, and NAO bond cleavage was also occurred. Danazol
(1) exhibited a strong cytotoxicity against cervical cancer cell line
(HeLa) with IC50 value of 0.283 ± 0.013 lM, two-fold stronger than
the standard anticancer drug doxorubicin (IC50 = 0.506 ± 0.015
lM). One of the transformed product i.e., metabolite 3 also showed
some activity with IC50 value of 13.427 ± 0.819 lM. Whereas, compounds
2, 4, and 5 were found to be inactive. Apparently hydrolytic
cleavage of isoxazole ring and hydroxylation of steroidal skeleton
decrease the cytotoxicity. Strong cytotoxicity of danazol (1) against
cervical cancer cell line (HeLa) is an interesting finding which
deserves further research.
Acknowledgements
We would like to acknowledge the financial support of the
University Research Board of the American University of Beirut,
Lebanon to carryout this research studies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

HREI-MS ที่แสดง [M] + ที่ m/z 340.2042 (ปี340.2038) kmax ในสเปกตรัมรังสียูวีที่ 248 nm ระบุสถานะระบบ dienone ข้ามกลวง [26] คลื่นอินฟราเรดแสดง absorbance ใน OH (3305 ซม. 1), และการข้ามกลวงdienone moiety (1663 และ 1619 ซม. 1). 1H NMR สเปกตรัมของmetabolite 5 ถูกอย่างเห็นได้ชัดคล้ายกับพื้นผิว 1 ยกเว้นการสัญญาณ downfield ที่ดี 4.30 (ตาราง 1) สัญญาณสำหรับคาร์บอนหนึ่ง olefinicนอกจากนี้ยังพบในสเปกตรัม NMR 13C ของ metabolite ขาด5. นี้แสดงการลดลงของพันธบัตร C@C หนึ่ง ไม่สาม มันนอกจากนี้ยัง แสดงให้เห็นคาร์บอน ketonic carbonyl ที่ d 187.8 (ตาราง 2) ที่โครงสร้างผสม 5 มี deduced ตาม HMBC ต่อไปความสัมพันธ์ H-19 (d 1.25) แสดงให้เห็นว่าความสัมพันธ์ HMBC กับ C-1(d 153.2) และ C-5 (d 173.0), บ่งชี้ของมีการ C@Cระหว่าง C-1/C-2 (Fig. 2) C 1/C-2 C@C เป็นผลมาจากการ isomerizationของพันธะ C-2/C-3 คู่ ในขณะที่ ได้แหวน isoxazolehydrolytically แหวกออกเป็น OH ที่ C-22 รูปแบบใหม่oxymethylene โปรตอน (d 4.29 และ 4.34) แสดงให้เห็นว่าความสัมพันธ์ใน HMBCกับ (d 153.2) C-1, C-2 (d 137.1), isomerization สนับสนุนเพิ่มเติมC@C และ hydroxylation ที่ C-22 Stereochemistryผสม 5 พบจะคล้ายพื้นผิว (Fig. 3) 1 ที่โครงสร้าง 5 ผสมจึงมี deduced เป็น 17b-hydroxy-2 -(hydroxymethyl)-17a-pregn-1,4-dien-20-yn-3-one ก็ก่อนหน้านี้รายงานโดย Choudhary et al. จาก biotransformationของพื้นผิว 1 กับ Fusarium lini, Cephalosporium aphidicola และAspergillus ไนเจอร์ [27]3.1. cytotoxicity กับบรรทัดของเซลล์มะเร็งCytotoxicity แข็ง Danazol (1) พบกับบุคคลที่ปากมดลูกมะเร็งเซลล์บรรทัด (HeLa) มีค่า IC50 0.283 ± 0.013 lM ในคัดกรองเบื้องต้น cytotoxic ยิ่งกว่ายา anticancerdoxorubicin (มาตรฐาน) (IC50 = 0.506 ± 0.015 lM) เราดังตัดสินใจประเมินผลิตภัณฑ์แปรรูปของ danazol (1)ต่อเซลล์ HeLa บรรทัด พบ metabolite แล็เพียง 3ใช้กับ IC50 = 13.427 ± 0.819 lM (ตาราง 3)แหวน isoxazole พร้อมแหวน-A ของ steroidal มี Danazol (1)โครงกระดูก เป็น cytotoxic ของ danazol (1) อาจเป็นผลisoxazole แหวน พบว่าศักยภาพไม่ cytotoxic เนื่องจากสูญเสีย isoxazoleแหวน ที่พบในสารประกอบ 2 และ 5 Hydroxylation ที่ตำแหน่งต่าง ๆ ของ danazol (1) การลดลงของกิจกรรม หรือแม้แต่ยังทำงาน Hydroxylation C-1 (ผสม 3) ลดลง cytotoxicศักยภาพของ danazol (1) (IC50 = 13.427 ± 0.819 lM) ในทำนองเดียวกันb-hydroxylation ที่ C-6 (ในผสม 4) ทำงานกับรายการเซลล์ HeLa มะเร็ง4. บทสรุปในสรุป การแปลงจุลินทรีย์ของ danazol (1) ด้วยC. blakesleeana ผลสามใหม่ 2 – 4 และ metabolite ชื่อดัง 5นี้เกี่ยวข้องกับ hydroxylation ที่ C-1, C-6 และ C-15 ขณะเกิดออกซิเดชันที่ C-3 พันธบัตรน้าว ปริยังเกิดขึ้น Danazol(1) จัดแสดง cytotoxicity แข็งแรงกับเส้นเซลล์มะเร็งปากมดลูก(HeLa) มีค่า IC50 ของ lM 0.283 ± 0.013 สองพับแข็งแกร่งกว่าdoxorubicin anticancer ยามาตรฐาน (IC50 = 0.506 ± 0.015lM) . ผลิตภัณฑ์แปรรูปเช่น metabolite 3 หนึ่งยัง แสดงให้เห็นบางกิจกรรม มีค่า IC50 ของ lM ± 0.819 13.427 ในขณะที่ สารประกอบพบ 2, 4 และ 5 จะไม่ได้ใช้งานกัน เห็นได้ชัดว่าไฮโดรไลติกปริ isoxazole แหวนและ hydroxylation ของ steroidal โครงกระดูกลด cytotoxicity ที่ Cytotoxicity แข็งของ danazol (1) กับรายการเซลล์มะเร็งปากมดลูก (HeLa) เป็นน่าสนใจที่ค้นหาซึ่งสมควรการวิจัยเพิ่มเติมถาม-ตอบเราต้องยอมรับการสนับสนุนทางการเงินของการคณะกรรมการวิจัยมหาวิทยาลัยในอเมริกันมหาวิทยาลัยของเบรุตเลบานอนกับงานของตนการศึกษาวิจัยนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

HREI-MS ซึ่งแสดงให้เห็นว่า [M] + ที่ม. / z 340.2042 (calcd.
340.2038) kmax ในสเปกตรัมรังสียูวีที่ 248
นาโนเมตรแสดงให้เห็นการปรากฏตัวของระบบdienone ผันข้าม [26] สเปกตรัมอินฟราเรดแสดงการดูดกลืนแสงสำหรับโอไฮโอ (3305 ซม. 1) และผันข้ามครึ่ง dienone (1663 และ 1619 ซม. 1) 1 สเปกตรัม H NMR ของmetabolite 5 เป็นที่ชัดเจนคล้ายกับสารตั้งต้นที่ 1 ยกเว้นสัญญาณร่นที่d 4.30 (ตารางที่ 1) สัญญาณคาร์บอน olefinic หนึ่งนอกจากนี้ยังพบขาดหายไปในสเปกตรัม 13C NMR ของ metabolite 5 แสดงให้เห็นการลดลงของหนึ่ง C @ C พันธบัตรที่ออกจากสาม มันยังแสดงให้เห็นคาร์บอนนิล ketonic ที่ d 187.8 (ตารางที่ 2) โครงสร้างของสารประกอบที่ 5 ได้รับการอนุมานต่อไปขึ้นอยู่กับ HMBC ความสัมพันธ์ H-19 (ง 1.25) พบว่ามีความสัมพันธ์กับ HMBC C-1 (ง 153.2) และ C-5 (ง 173.0) แสดงให้เห็นการปรากฏตัวของ C @ ซีระหว่างC-1 / C-2 (รูปที่. 2) C-1 / C-2 C @ C เป็นผลมาจาก isomerization ของ C-2 / C-3 พันธะคู่ ขณะที่แหวน isoxazole ถูกตัดออกจากhydrolytically OH ที่ C-22 ที่จัดตั้งขึ้นใหม่โปรตอน oxymethylene (ง 4.29 และ 4.34) พบว่าความสัมพันธ์ HMBC ด้วย C-1 (d 153.2) และ C-2 (ง 137.1) ต่อการสนับสนุน isomerization ของ C @ C และ hydroxylation ที่ C-22 ได้สเตอริโอเคมีของสารที่ 5 พบว่ามีความคล้ายคลึงกับสารตั้งต้นที่ 1 (รูปที่. 3) โครงสร้างของสารประกอบที่ 5 จึงได้สรุปได้ว่าเป็นไฮดรอกซี 17b-2- (hydroxymethyl) -17a-pregn-1,4-dien-20-yn-3-หนึ่ง มันได้รับก่อนหน้านี้รายงานโดย Choudhary et al., เปลี่ยนรูปทางชีวภาพจากของพื้นผิว1 Fusarium Lini, Cephalosporium aphidicola และAspergillus ไนเจอร์ [27]. 3.1 เป็นพิษกับสายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งDanazol (1) แสดงให้เห็นว่าเป็นพิษที่แข็งแกร่งกับปากมดลูกของมนุษย์มะเร็งเซลล์(HeLa) ที่มีค่า IC50 เท่ากับ 0.283 ± 0.013 LM ในการตรวจคัดกรองเบื้องต้นพิษมากกว่าต้านมะเร็งยาdoxorubicin (มาตรฐาน) (IC50 = 0.506 ± 0.015 LM) เราจึงตัดสินใจที่จะประเมินผลิตภัณฑ์เปลี่ยนของ Danazol (1) กับสายพันธุ์ของเซลล์ HeLa ที่น่าสนใจเพียง metabolite 3 ถูกพบที่จะใช้งานกับIC50 = 13.427 ± 0.819 LM (ตารางที่ 3). Danazol (1) มีแหวน isoxazole ผสมกับแหวนของ steroidal โครงกระดูก ที่มีศักยภาพพิษของ Danazol (1) อาจจะเป็นเพราะแหวนisoxazole มันแสดงให้เห็นศักยภาพพิษเนื่องจากการสูญเสียของ isoxazole แหวนเป็นที่สังเกตในสารประกอบ 2 และ 5 hydroxylation ที่ตำแหน่งต่างๆของDanazol (1) ลดลงของกิจกรรมหรือแม้กระทั่งทำให้มันไม่ได้ใช้งาน C-1 hydroxylation (สารประกอบ 3) ลดลงพิษศักยภาพของDanazol (1) (IC50 = 13.427 ± 0.819 LM) ในทำนองเดียวกันข hydroxylation ที่ C-6 (ในขณะที่สาร 4) ทำให้มันไม่ได้ใช้งานกับเซลล์มะเร็งHeLa. 4 สรุปโดยสรุปการเปลี่ยนแปลงของจุลินทรีย์ Danazol (1) กับซี blakesleeana ผลสาม 2-4 ใหม่และสารที่รู้จักกัน 5. นี้เกี่ยวข้องกับการ hydroxylation ที่ C-1 C-6 และ C-15 ในขณะที่การเกิดออกซิเดชันที่C-3 และความแตกแยกพันธบัตรหนาวก็ยังเกิดขึ้น danazol (1) แสดงความเป็นพิษที่แข็งแกร่งกับสายพันธุ์ของเซลล์มะเร็งปากมดลูก(HeLa) ที่มีค่า IC50 เท่ากับ 0.283 ± 0.013 LM สองเท่าแข็งแกร่งกว่าต้านมะเร็งมาตรฐานdoxorubicin ยาเสพติด (IC50 = 0.506 ± 0.015 LM) หนึ่งในผลิตภัณฑ์เช่นเปลี่ยน metabolite 3 ยังแสดงให้เห็นกิจกรรมบางอย่างที่มีค่าIC50 เท่ากับ 13.427 ± 0.819 LM ในขณะที่สาร2, 4, 5 และพบว่ามีการใช้งาน เห็นได้ชัดว่าย่อยสลายความแตกแยกของแหวน isoxazole และ hydroxylation ของโครงกระดูก steroidal ลดพิษ พิษที่แข็งแกร่งของ Danazol (1) กับเซลล์มะเร็งปากมดลูกสาย(HeLa) คือการค้นพบที่น่าสนใจซึ่งสมควรได้รับการวิจัยต่อไป. กิตติกรรมประกาศเราอยากจะรับทราบการสนับสนุนทางการเงินของคณะกรรมการวิจัยมหาวิทยาลัยมหาวิทยาลัยอเมริกันแห่งเบรุต, เลบานอน carryout การวิจัยครั้งนี้ การศึกษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

hrei-ms ซึ่งพบว่า [ M ] M / Z 340.2042 ( Calcd .
340.2038 ) การ kmax สเปกตรัมรังสียูวีที่ 248 nm พบการแสดง
ของการข้ามและระบบ dienone [ 26 ] อินฟราเรดสเปกตรัมการดูดกลืนแสงที่แสดงให้โอ้ (
0

1 ซม. ) และข้าม conjugated
dienone กึ่งหนึ่ง ( 1664 และ 1720 ซม.
1
) 1
H NMR สเปกตรัมของ
ไลท์ 5 อย่างชัดเจนคล้ายกับพื้นผิว 1 ยกเว้น
ร่นสัญญาณที่ D 4 .30 ( ตารางที่ 1 ) สัญญาณหนึ่งกคาร์บอน
พบ 13C NMR สเปกตรัมของการขาดหายไปในอาหาร
5 นี้พบการลดลงของหนึ่ง C @ C พันธบัตร จากสาม มัน
ยังพบ ketonic คาร์บอนิลคาร์บอนที่ D 187.8 ( ตารางที่ 2 )
โครงสร้างของสารประกอบ 5 เพิ่มเติมได้ตามฤทธิ์
สหสัมพันธ์ h-19 ( D 1.25 ) แสดงฤทธิ์มีความสัมพันธ์กับ c-1
( D 153.2 ) และ C - ( D 173.0 )แสดงตนของ C @ C
ระหว่าง c-1 / C-2 ( รูปที่ 2 ) การ c-1 / C-2 C @ C เป็นผลจากไอโซเมอไรเซชันของ C-2 /
c-3 ดับเบิลบอนด์ ส่วนไอโซซาโซลแหวน
hydrolytically แหวกออก โอ้ ที่ c-22 . ที่จัดตั้งขึ้นใหม่ oxymethylene
โปรตอน ( D 4.29 และ 4.34 ) มีความสัมพันธ์กับ c-1 ฤทธิ์
( D 153.2 ) และ C-2 ( D 137.1 ) เพิ่มเติม สนับสนุนการแยก
c @ C และการเตรียมแบบที่ c-22 .ส่วนสเตอริโอเคมิสตรี
สารประกอบ 5 พบว่ามีความคล้ายคลึงกับแผ่น 1 ( รูปที่ 3 )
โครงสร้างของสารประกอบ 5 จึงได้เป็น 17b-hydroxy-2 -
( ซี ) - 17a-pregn-1,4-dien-20-yn-3-one . มันถูกรายงานโดยก่อนหน้านี้
choudhary et al . , จากการ 1
( Fusarium ลินีเซฟาโลสปอเรียม aphidicola , Aspergillus niger และ
[ 27 ] .
1 .พิษต่อเซลล์มะเร็งดานาซอลบรรทัด
( 1 ) มีแรงพิษต่อเซลล์มะเร็งปากมดลูก
มนุษย์เส้น ( ล่า ) ด้วยมูลค่า ic50 ของ 0.283 ± 0.013 LM ใน
คัดกรองเบื้องต้นท มากกว่ายาต้านมะเร็ง
ด๊อกโซรูบิซิน ( มาตรฐาน ) ( ic50 = 0.506 ± 0.015 LM ) เราจึงตัดสินใจที่จะประเมินแปลง

ผลิตภัณฑ์ของดานาซอล ( 1 ) ต่อเซลล์ Hela บรรทัดแต่แค่เพียงพบ
3 จะใช้งานกับ ic50 = 13.427 ± 0.819 LM ( ตารางที่ 3 ) .
ดานาซอล ( 1 ) มีแหวนด้วย ring-a ไอโซซาโซลผสมของสเตียรอยด์
โครงกระดูก ศักยภาพที่เป็นพิษของดานาซอล ( 1 ) อาจจะเนื่องจาก
แหวนไอโซซาโซล . มันไม่พบพิษที่อาจเกิดขึ้นเนื่องจากการสูญเสียของแหวนไอโซซาโซล
ตามที่พบในสารประกอบ 2 และ 5 การเตรียมแบบที่
ตำแหน่งต่างๆของดานาซอล ( 1 ) มีค่าลดลง กิจกรรม หรือแม้กระทั่ง
ทำให้ไม่ได้ใช้งาน c-1 การเตรียมแบบ ( สารประกอบ 3 ) ลดพิษ
ศักยภาพของดานาซอล ( 1 ) ( ic50 = 13.427 ± 0.819 LM ) ในทํานองเดียวกัน
b-hydroxylation ที่ c-6 ( เช่นในสารประกอบ 4 ) ทำให้มันใช้งานกับ
ถึงเซลล์มะเร็ง
4 สรุป
สรุป การเปลี่ยนแปลงของจุลินทรีย์ในดานาซอล ( 1 )
cblakesleeana ให้ผลสามใหม่ 2 – 4 และทราบเพียง 5
นี้เกี่ยวข้องกับการเตรียมแบบที่ c-1 c-6 c-15 , และ , ในขณะที่ออกซิเดชัน
ที่ c-3 และความแตกแยก บอนด์ นาโอะก็เกิดขึ้น ดานาซอล
( 1 ) มีความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็งปากมดลูกที่แข็งแกร่งกับสาย
( ล่า ) ด้วยมูลค่า ic50 ของ 0.283 ± 0.013 อิมทวิ , แข็งแกร่งกว่า
มาตรฐานยาต้านมะเร็งด๊อกโซรูบิซิน ( ic50 = 0.506 ± 0.015
อิม )หนึ่งในแปลงผลิตภัณฑ์ได้แก่ ระดับ 3 มีกิจกรรมบางอย่างที่มีค่า
ic50 ของ 13.427 ± 0.819 อิม ส่วนสารประกอบ
2 4 และ 5 พบว่ามีการใช้งาน เห็นได้ชัดว่าคุณภาพ
รองแหวน และการเตรียมแบบไอโซซาโซลสเตียรอยด์โครงกระดูก
ลดความเป็นพิษ . เซลล์ที่แข็งแรงของดานาซอล ( 1 ) กับ
Cell มะเร็งปากมดลูก ( ล่า ) เป็นที่น่าสนใจค้นหาซึ่ง
ควรมีการวิจัยต่อไป ขอบคุณ

เราอยากจะรับทราบการสนับสนุนทางการเงินของ
มหาวิทยาลัยวิจัยคณะมหาวิทยาลัยอเมริกันเบรุต เลบานอน เพื่อที่การศึกษาวิจัยนี้
.ความเข้มข้น 100 จะได้ / ดี บ่มค้างคืน 5 %
CO2 บ่มที่ 37 องศาเซลเซียส กลางวันต่อมาถูกแทนที่ด้วย
เตรียมสด 200 จะปานกลาง พร้อมกับที่ความเข้มข้นต่างๆ
ของสารทดสอบ ( 1 – 50 กล. ) 96 ดีจานอีก
) สำหรับ 72 ชั่วโมง หลังจากบ่ม 2 LG / ml ของ MTT คือเพิ่ม

แต่ละอย่างดี จานต่อไป แล้วบ่มปฏิกิริยา
4 ชั่วโมงแนะนำแบบที่ c-3 . ญาติสเตอริโอเคมิสตรีใหม่
stereogenic ศูนย์มโนทัศน์ที่เกิดขึ้นบนพื้นฐานของพร้อมกันนั้น
สหสัมพันธ์ h-15 d ( 4.20 ) พบพร้อมกันนั้นข้ามหุบกับ h-14
d ( 1.41 ) เป็น h-14 เป็น a-oriented สูง 1 , ดังนั้นความสัมพันธ์พร้อมกันนั้น
กับ h-15 แนะนำ b-hydroxylation ที่ c-15
( รูปที่ 3 ) และพร้อมกันนั้นความสัมพันธ์ของคน ( D 2.56 ) กับ h3-19 d (
1แนะนำแบบที่ c-3 . ญาติสเตอริโอเคมิสตรีใหม่
stereogenic ศูนย์มโนทัศน์ที่เกิดขึ้นบนพื้นฐานของพร้อมกันนั้น
สหสัมพันธ์ h-15 d ( 4.20 ) พบพร้อมกันนั้นข้ามหุบกับ h-14
d ( 1.41 ) เป็น h-14 เป็น a-oriented สูง 1 , ดังนั้นความสัมพันธ์พร้อมกันนั้น
กับ h-15 แนะนำ b-hydroxylation ที่ c-15
( รูปที่ 3 ) และพร้อมกันนั้นความสัมพันธ์ของคน ( D 2.56 ) กับ h3-19 d (
1