The comet slides prepared as descri

The comet slides prepared as described above were denatured
in 0.5N NaOH for 30 min at room temperature. The gels were then
neutralized in 1X PBS pH 7.4 for 1min at room temperature. The
chromosome spreads were denatured in a solution of 70% formamide
in 2X SSC (0.3MNaCl, 0.03Mtri-sodium citrate dihydrate)
for 2min at 69 ◦C. Once denatured, the comet and chromosome
slides were dehydrated in an increasing ethanol series (70, 90,
100%, 3min each) and air-dried. The hybridisation mixture, containing
30 ng/L of labelled DNA and a 1:1 ratio of formamide
deionized and 20% dextran sulphate in 8X SSC, was denatured at
80 ◦C for 8min. Once denatured, 20L of the hybridisation mixture
was added to each slide, covered with a cover slip and incubated
overnight at 36.5 ◦C in a humidified chamber.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ภาพนิ่งดาวหางที่เตรียมไว้ตามที่อธิบายไว้ข้างต้นถูก denaturedใน 0.5N NaOH ใน 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง เจได้แล้วneutralized ใน 1 X PBS pH 7.4 ใน 1 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ที่แพร่กระจายโครโมโซมถูก denatured ในโซลูชันของ formamide 70%ใน 2 X SSC (0.3MNaCl, 0.03Mtri-โซเดียมซิเตรต dihydrate)สำหรับ 2 นาทีที่ 69 ◦C เมื่อ denatured ดาวหางและโครโมโซมภาพนิ่งถูกอบแห้งในชุดเอทานอลเพิ่มขึ้น (70, 90100%, 3 นาที) และ air-dried ส่วนผสม hybridisation ประกอบด้วย30 ng / L ของ labelled ดีเอ็นเอและเป็นอัตราส่วน 1:1 ของ formamidedeionized และซัลเฟต 20% เดกซ์แทรนใน 8 X SSC ถูก denatured ที่◦C 80 สำหรับ 8 นาที Denatured ครั้ง 20 L ส่วนผสม hybridisationเพิ่มภาพนิ่งแต่ละ ปกคลุม ด้วยใบปก และ incubatedนอนที่ ◦C 36.5 ในหอ humidified

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สไลด์ดาวหางจัดทำตามที่อธิบายไว้ข้างต้นเอทิลแอลกอฮอล์
ใน NaOH 0.5N เวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง เจลจากนั้นก็
เป็นกลางใน 1X พีบีเอสพีเอช 7.4 สำหรับ 1min ที่อุณหภูมิห้อง
กระจายโครโมโซมถูกเอทิลแอลกอฮอล์ในการแก้ปัญหาของไมด์ 70%
ใน SSC 2X (0.3MNaCl, dihydrate citrate 0.03Mtri โซเดียม)
สำหรับ 2min ที่ 69 ◦C เมื่อเอทิลแอลกอฮอล์, ดาวหางและโครโมโซม
ภาพนิ่งได้แห้งในซีรีส์เอทานอลที่เพิ่มขึ้น (70, 90,
100%, 3min) และอากาศแห้ง ส่วนผสม hybridisation มี
30 ng / L ของดีเอ็นเอที่มีข้อความและ 1: 1 อัตราส่วนของไมด์
ซัลเฟตปราศจากไอออนและ dextran 20% ใน 8X SSC ได้เอทิลแอลกอฮอล์ที่
80 ◦Cสำหรับ 8min เมื่อเอทิลแอลกอฮอล์, 20? L ส่วนผสม hybridisation
ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละภาพนิ่งปกคลุมด้วยใบปกและบ่ม
ค้างคืนที่ 36.5 ◦Cในห้องความชื้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดาวหางสไลด์เตรียมตามที่อธิบายไว้ข้างต้นถูก denatured
0.5n NaOH ใน 30 นาที ที่อุณหภูมิห้อง เจลแล้ว
เป็นกลางใน 1X PBS pH 7.4 สำหรับ 1 นาที ที่อุณหภูมิห้อง
โครโมโซมกระจายถูกใช้ในโซลูชั่นของ 70% Formamide 2x
ใน SSC ( 0.3mnacl 0.03mtri-sodium ซิเตรต , 2 )
สำหรับ 2min ที่ 69 ◦ C . เมื่อเกิดดาวหาง และโครโมโซม
,สไลด์กำลังขาดน้ำเพิ่มเอทานอลซีรีส์ ( 70 , 90 ,
100% 3min แต่ละ ) และอากาศแห้ง การไฮบริไดเซชันผสมที่มี
30 ng /  ลิตรที่มีดีเอ็นเอและอัตราส่วนของ Formamide
คล้ายเนื้อเยื่อประสานและ 20% dextran ซัลเฟตในการใช้งานคือใช้ SSC ที่
80 ◦ C 8min เมื่อเกิด 20  L ของไฮบริไดเซชันผสม
ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละภาพนิ่งปกคลุมด้วยฝาครอบเผลอ โดย
ค้างคืนที่ 365 ◦ C ใน humidified Chamber