RNA was extracted from developing g

RNA was extracted from developing grains (at 3, 6, 9
and 12 DAF) of both flo7 and WT using the SDSTrizol
method (Li and Trick, 2005). After treatment
with DNase I, the first cDNA strand was synthesized
based on oligo (dT) priming. Transcription profiling of
flo7 and WT was carried out using real-time quantitative
PCR (qPCR) directed at a set of starch synthesis related
genes, with the rice Actin (GenBank: X16280) gene as
the reference sequence. The 20 μL qPCRs were based
on SYBR premix Ex TaqII (TOYOBO, Japan) and ran
on a Light Cycler 480 device (Roche, Geman). The
relevant gene-specific primers are shown in Table 2.
The 2-ΔΔCT method was used to calculate relative
transcript abundances (Schmittgen and Livak, 2008).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาร์เอ็นเอที่สกัดจากธัญพืช (ที่ 3, 6, 9 พัฒนาและเยอรมัน 12) flo7 และละเว้นการใช้ SDSTrizol การวิธีการ (Li และเคล็ดลับ 2005) หลังการรักษากับ DNase I เดอะสแตรนด์ cDNA แรกถูกสังเคราะห์ตามด้วย oligo (dT) สร้างโพรไฟล์ transcriptionflo7 และละเว้นไม่ดำเนินการใช้เวลาจริงเชิงปริมาณPCR (qPCR) ชุดที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์แป้งยีน ข้าวแอกติน (GenBank: X 16280) ยีนเป็นลำดับที่อ้างอิง จาก 20 μL qPCRsบน SYBR premix Ex TaqII (TOYOBO ญี่ปุ่น) และวิ่ง480 Cycler แสงอุปกรณ์ (Roche, Geman) ที่ไพรเมอร์ของยีนเฉพาะที่เกี่ยวข้องจะแสดงในตารางที่ 2วิธี 2-ΔΔCT ถูกใช้เพื่อคำนวณญาติเสียงบรรยาย abundances (Schmittgen และ Livak, 2008)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอถูกสกัดจากการพัฒนาเมล็ด (ที่ 3, 6, 9
และ 12 DAF) ของ flo7 และ WT ใช้ SDSTrizol
วิธี (Li และเคล็ดลับ, 2005) หลังจากการรักษาด้วย DNase ฉันสาระ cDNA แรกที่ถูกสังเคราะห์ขึ้นอยู่กับOligo (dT) รองพื้น โปรไฟล์ถอดความจากflo7 WT และได้รับการดำเนินการโดยใช้เวลาจริงเชิงปริมาณPCR (qPCR) ผู้กำกับที่ชุดของการสังเคราะห์แป้งที่เกี่ยวข้องกับยีนข้าวโปรตีนนี้(GenBank: X16280) ยีนเป็นลำดับอ้างอิง 20 ไมโครลิตร qPCRs มีพื้นฐานอยู่บนSYBR พรีมิกซ์อดีต TaqII (Toyobo ญี่ปุ่น) และวิ่งบนแสง Cycler 480 อุปกรณ์ (Roche, Geman) ไพรเมอร์ยีนเฉพาะที่เกี่ยวข้องจะแสดงในตารางที่ 2 วิธีที่ 2 ΔΔCTถูกใช้ในการคำนวณญาติอนุภาคหลักฐาน(Schmittgen และ Livak 2008)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ซึ่งสกัดจากการพัฒนาเมล็ด ( 3 , 6 , 9 และ 12 บาน
) ทั้ง flo7 WT และใช้วิธี sdstrizol
( Li และเคล็ดลับ , 2005 ) หลังจากการรักษา
กับตรวจหา ADNase ผมเกลียวดีเอ็นเอแรกถูกสังเคราะห์
ตามโอลิโก ( DT ) รองพื้น . ถอดความโปรไฟล์ของ
flo7 WT ได้ โดยใช้เวลาและปริมาณ
PCR ( qpcr ) หมายถึงชุดของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์แป้ง
,ข้าวกับแอกทิน ( ขนาด : x16280 ) ยีนเป็น
การอ้างอิงลำดับ 20 μผม qpcrs ขึ้นอยู่
บน SYBR ใช้ taqii ( อดีต toyobo , ญี่ปุ่น ) และ รัน
บนอุปกรณ์รอบ 480 จุด ( โรเช่ , geman )
ยีนที่เกี่ยวข้องโดยเฉพาะจะแสดงในตารางที่ 2
2 - วิธี CT ΔΔถูกใช้เพื่อคำนวณ abundances .
( และญาติ schmittgen livak , 2008 )