Preparing sampleTo obtain an accura

Preparing sample
To obtain an accurate estimate of the cell density of your sample the cells need to be evenly suspended in your culture vessel before you remove an aliquot for counting. The method will vary depending on your culture method. For algae, you might be sampling from a flask or test tube. For cell cultures you probably are sampling from a Petri dish. To resuspend cells in a flask or test tube you simply swirl the flask or invert the test tube and then quickly remove your aliquot of cells. For a cell culture growing in a Petri dish, you need to resuspend the cells growing on the bottom of the dish by gently using a pipette to remove cells and media from a dish and then gently expelling them back into the dish. This aspiration of the contents of the petri dish should be completed several times, each time expelling the cells and media while moving the pipette across the bottom of the dish to gently discharge cells growing on the entire surface. After resuspension the aliquot is quickly removed from the vessel before the cells settle to the bottom again.
For cell culture applications cells are often stained with Trypan Blue so that dead cell can be distinguished from live cells. For example, a 0.5 ml suspension of cells would be removed from the Petri dish and mixed with 0.5 ml Trypan Blue solution in an Eppendorf or small test tube. Trypan Blue is a stain that selectively stains dead cells. For algal cells, Lugol’s solution is commonly used to stain an aliquot of cells in a small test tube. The Lugol’s solution will immobilize and kill the algal cells. The amount of stain used to dilute the cell suspension must be measured and recorded so that you can apply it as your dilution factor in the final calculation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เตรียมตัวอย่างการขอรับการประเมินความถูกต้องของเซลล์ความหนาแน่นของตัวอย่างของเซลล์ต้องถูกเสมอถูกระงับในเรือของวัฒนธรรมก่อนที่จะเอาเป็นส่วนลงตัวสำหรับการตรวจนับ วิธีการจะแตกต่างกันขึ้นอยู่กับวิธีการวัฒนธรรม สำหรับสาหร่าย คุณอาจจะเด็ดจากหนาวหรือหลอดทดสอบ สำหรับวัฒนธรรมเซลล์ คุณอาจจะมีการสุ่มตัวอย่างจากจานเพาะเชื้อ Resuspend เซลล์ในหนาวหรือหลอดทดสอบคุณเพียง swirl หนาว หรือสลับหลอดทดสอบ การเอาของส่วนลงตัวของเซลล์อย่างรวดเร็ว สำหรับวัฒนธรรมเซลล์ที่เติบโตในจานเพาะเชื้อ คุณต้อง resuspend เซลล์ที่เติบโตในด้านล่างของจานโดยใช้เปตต์เป็นการเอาออกเซลล์และสื่อจากจานเบา ๆ แล้ว ค่อย ๆ เพิ่มไปไว้จาน ปณิธานนี้ของเนื้อหาของจานเพาะเชื้อควรจะเสร็จหลายครั้ง แต่ละครั้งเพิ่มเซลล์และสื่อขณะย้ายเปตต์ที่ด้านล่างของจานเบา ๆ ปลดเซลล์ที่เติบโตบนพื้นผิวทั้งหมด หลังจาก resuspension ตะกอนส่วนลงตัวได้อย่างรวดเร็วได้ถูกเอาออกจากเรือก่อนเซลล์ชำระไปด้านล่างอีกครั้งสำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์ เซลล์โปรแกรมประยุกต์มักจะสีกับ Trypan Blue เพื่อให้เซลล์ที่ตายแล้วสามารถแตกต่างไปจากเซลล์อยู่ ตัวอย่าง ระงับเซลล์ 0.5 ml จะสามารถออกจากจานเพาะเชื้อ และผสมกับโซลูชัน Trypan Blue ใน Eppendorf หรือหลอดทดสอบขนาดเล็ก 0.5 ml Trypan Blue เป็นคราบที่เลือกคราบสกปรกเซลล์ตาย สำหรับเซลล์ algal, Lugol ของโซลูชั่นเหมาะสำหรับใช้ติดเป็นส่วนลงตัวของเซลล์ในหลอดทดสอบขนาดเล็ก โซลูชันของ Lugol จะ immobilize และฆ่าเซลล์ algal จำนวนคราบใช้ dilute ระงับเซลล์ต้องสามารถวัด และบันทึกไว้เพื่อให้คุณสามารถใช้เป็นปัจจัยการเจือจางในการคำนวณขั้นสุดท้าย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมตัวอย่าง
เพื่อขอรับการประเมินความถูกต้องของความหนาแน่นเซลล์ของคุณตัวอย่างเซลล์ต้องทั่วถึง แขวนลอยในเรือวัฒนธรรมของคุณก่อนที่คุณจะลบส่วนที่หารลงตัวสำหรับนับ วิธีการจะแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับวิธีการที่วัฒนธรรมของคุณ สาหร่าย , คุณอาจจะสุ่มจากขวดหรือหลอดทดลอง เซลล์วัฒนธรรมคุณอาจมีตัวอย่างจากจานเพาะเชื้อเพื่อ resuspend เซลล์ในขวดหรือหลอดทดลอง คุณเพียงแค่หมุนขวดหรือสลับหลอดทดลองและรีบลบส่วนลงตัวของเซลล์ สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ในจานเพาะเชื้อ คุณต้อง resuspend เซลล์เติบโตบนก้นจาน โดยค่อย ๆใช้ปิเปตลบเซลล์และสื่อจากจาน แล้วค่อย ๆไล่พวกเขากลับลงไปในจานนี้โดยเนื้อหาของจานเลี้ยงเชื้อควรทำหลาย ๆครั้ง แต่ละครั้งขับไล่เซลล์และสื่อในขณะที่ย้ายไปเปต ในด้านล่างของจานเบา ๆปล่อยเซลล์เติบโตบนพื้นผิวทั้งหมด หลังจาก resuspension ที่ส่วนลงตัวจะถูกลบออกได้อย่างรวดเร็ว จากเรือก่อนที่เซลล์ตกลงไปด้านล่างอีกครั้ง
สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ใช้เซลล์มักเปื้อนไตรแพนสีฟ้าเพื่อให้เซลล์ที่ตายจะแตกต่างจากเซลล์มีชีวิต ตัวอย่างเช่น , 0.5 ml ระงับเซลล์จะถูกเอาออกจากจานเพาะเชื้อและผสมกับ 0.5 มล. ไตรแพนบลูโซลูชั่นในเพนดอร์ฟ หรือหลอดทดลองขนาดเล็ก ไตรแพนสีฟ้า เป็นคราบที่เลือกคราบเซลล์ที่ตายแล้ว สำหรับสาหร่ายเซลล์lugol เป็นโซลูชั่นที่ใช้กันทั่วไปเพื่อคราบเป็นส่วนลงตัวของเซลล์ในหลอดทดลองขนาดเล็ก ของ lugol ทางออกจะหยุดและฆ่าเซลล์สาหร่าย . ปริมาณของคราบใช้เจือจางเซลล์แขวนลอยต้องสามารถวัดและบันทึกเพื่อให้คุณสามารถใช้มันเป็นปัจจัย 4 ในการคำนวณขั้นสุดท้าย