Protein of purified particles of ph

Protein of purified particles of phage
Bacteriophages particles by centrifugation through a glycerol step gradient were determined by Sambrook and Russell. (2001) after purified particles were subjected to SDS-PAGE on precast 4 to 15% gradient TRIS acrylamidegels (BioRad) along with protein molecular weight markers (Kropinski et al., 2012). The phage suspensions (approximately 1010 pfu/ml) were boiled for 5 min and separated by SDS-PAGE loading buffer (50 mM Tris-HCl, 3% SDS, 1% β-mercaptoethanol, 20% glycerol, 0.7% bromophenol blue pH 6.8) on 12.5% acrylamide gel. Electrophoresis was initiated at 80 V until samples had run through the stacking gel (approximately 30 min). The voltage was subsequently increased to 120 V and electrophoresis was continued until the tracking dye had reached the bottom of the gel (approximately 2 h). Proteins were stained with Coomassie Brilliant Blue R-250 (Sigma-Aldrich).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรตีนของอนุภาคบริสุทธิ์ของ phageอนุภาค bacteriophages โดย centrifugation ผ่านไล่ขั้นกลีเซอรถูกกำหนด โดย Sambrook และรัสเซล อนุภาค (2001) หลังจากที่บริสุทธิ์ถูกต้ององค์กรหน้าบนสะพาน 4-15% ไล่ระดับตรี acrylamidegels (BioRad) กับโปรตีนน้ำหนักโมเลกุลเครื่องหมาย (Kropinski et al., 2012) บริการ phage (ประมาณ 1010 pfu/มล) ถูกต้มใน 5 นาที และคั่น ด้วย SDS หน้าโหลดบัฟเฟอร์ (50 มม.ตรี-HCl, SDS 3%, 1% β-mercaptoethanol, 20% กลีเซอร 0.7% bromophenol blue pH 6.8) บน 12.5% อะคริลาไมด์เจล Electrophoresis เป็นจุดเริ่มต้นที่ 80 V จนมีการเรียกใช้ตัวอย่างผ่านเจซ้อน (ใช้เวลาประมาณ 30 นาที) แรงดันไฟฟ้าเพิ่มขึ้นมา 120 V และ electrophoresis มีอย่างต่อเนื่องจนย้อมติดตามมาถึงด้านล่างของเจล (ประมาณ 2 h) โปรตีนถูกสีด้วย Coomassie Brilliant บลู R-250 (ซิก-Aldrich)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โปรตีนบริสุทธิ์ของอนุภาคของฟา
แบคทีริโอฟาดจ์อนุภาคโดยปั่นผ่านขั้นตอนการพิจารณาจาก sambrook เป็นกลีเซอรอลและ รัสเซล ( 2001 ) หลังจากแยกอนุภาคถูกเอนไซม์ในระบบ 4 15% ลาดโดย acrylamidegels ( biorad ) พร้อมกับโปรตีนโมเลกุลเครื่องหมาย ( kropinski et al . , 2012 )ว่ารับน้ำหนัก ( ประมาณ 1010 พีเอฟยู / มิลลิลิตร ต้มนาน 5 นาที และแยกจากกันโดย SDS-PAGE โหลดบัฟเฟอร์ ( 50 มม. โดย HCl 3 % SDS , 1% บีตา - mercaptoethanol 20 % กลีเซอรอล 0.7% โบรโมฟีนอลบลูพีเอช 6.8 ) 12.5% อะคริลาไมด์เจล วิธีเริ่มต้นที่ 80 V จนคนวิ่งผ่านการซ้อนเจล ( ประมาณ 30 นาที )แรงดันไฟฟ้าและเพิ่มขึ้นเป็น 120 V และ electrophoresis คือการติดตามอย่างต่อเนื่องจนย้อมได้ถึงด้านล่างของเจล ( ประมาณ 2 ชั่วโมง ) โปรตีนที่ถูกย้อมด้วยสีเหล่านี้น่าจะเป็น r-250 สีฟ้าสดใส ( ซิกม่า Aldrich )