The steroidogenic acute regulatory

The steroidogenic acute regulatory protein (StAR) is critical to the regulated synthesis of steroids in vertebrates. We have isolated cDNA sequences encoding StAR in the freshwater stingrays Potamotrygon hystrix and P. motoro. A single P. hystrix StAR transcript (3376 bp) and two overlapping P. motoro StAR transcripts (1272 and 3365 bp) were isolated. The P. hystrix and P. motoro StAR transcripts contain open reading frames encoding proteins of 284 amino acids that are 99% identical to each other and 56–64% identical to other StAR proteins. Pregnenolone synthesis by green monkey kidney (COS-1) cells transfected with an expression construct encoding a human cholesterol side chain cleavage/adrenodoxin reductase/adrenodoxin fusion protein was increased 16-fold by coexpression with a pCMV5/P. motoro StAR expression construct. Northern blot analysis revealed a single 4000 bp StAR transcript in the P. motoro interrenal gland, but RT-PCR indicates StAR mRNA is also expressed in the brain, gonads, atria, ventricle, gill (female only) and muscle (female only). Expression in extragonadal and extraadrenocortical tissues is an indication that StAR may be critical to processes other than steroidogenesis. The longest P. motoro StAR transcript contains a sequence with great similarity to short interspersed repetitive elements found in other elasmobranchs. This study is the first to isolate and characterize elasmobranch StAR cDNA sequences and to demonstrate the activity of a nonmammalian StAR protein in a heterologous expression system.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Steroidogenic เฉียบพลันทางโปรตีน (ดาว) มีความสำคัญต่อการควบคุมการสังเคราะห์ของสเตอรอยด์ใน vertebrates เราได้มาแยกต่างหากเข้ารหัสดาวปลา stingrays Potamotrygon hystrix และ P. motoro ลำดับ cDNA เสียงบรรยายดาว hystrix เดียว P. (3376 bp) และใบแสดงผลดาว P. motoro (bp 1272 และ 3365) ที่ทับซ้อนสองได้แยก P. hystrix และใบแสดงผลดาว P. motoro ประกอบด้วยเปิดอ่านเฟรมที่เข้ารหัสโปรตีนกรดอะมิโน 284 ที่ 99% เหมือนกันและเหมือนกับโปรตีนอื่น ๆ ดาว 56-64% Transfected Pregnenolone สังเคราะห์ โดยเซลล์ไต (COS-1) ลิงสีเขียว ด้วยการนิพจน์สร้างเข้ารหัสเป็นไขมันมนุษย์ด้านโซ่ ปริ/adrenodoxin reductase/adrenodoxin อาหารโปรตีนเพิ่มขึ้น 16-fold โดย coexpression กับ motoro pCMV5/P. ดาวนิพจน์สร้าง คืนในตาเหนือวิเคราะห์เปิดเผยเสียงบรรยายดาว 4000 bp เดียวในต่อม interrenal P. motoro แต่ RT-PCR บ่งชี้ยังมีแสดงดาว mRNA ในสมอง ต่อมบ่งเพศ ทเรีย อวัยวะ กลวง เหงือก (เฉพาะผู้หญิง) และกล้ามเนื้อ (เฉพาะผู้หญิง) นิพจน์ใน extragonadal และเนื้อเยื่อ extraadrenocortical เป็นตัวบ่งชี้ว่า ดาวอาจจะสำคัญกับกระบวนการอื่นที่ไม่ใช่ steroidogenesis เสียงบรรยายดาว P. motoro ที่ยาวที่สุดประกอบด้วยลำดับมีคล้ายคลึงกับสั้น ๆ กระจายองค์ประกอบซ้ำ ๆ ที่พบใน elasmobranchs อื่น ๆ การศึกษานี้เป็นครั้งแรกใน การแยก และลักษณะลำดับ cDNA ดาว elasmobranch และแสดง ให้เห็นถึงกิจกรรมของ nonmammalian ดาวโปรตีนในระบบ heterologous นิพจน์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนกฎระเบียบ steroidogenic เฉียบพลัน (ดาว) มีความสำคัญต่อการควบคุมการสังเคราะห์ของเตียรอยด์ในสัตว์มีกระดูกสันหลัง เราได้แยกการเข้ารหัสลำดับยีนดาวปลากระเบนน้ำจืด hystrix Potamotrygon พี motoro สำเนาพี hystrix ดาวดวงเดียว (3376 bp) และสองที่ทับซ้อนกันจิตบำบัด motoro พีสตาร์ (1272 และ 3365 bp) ถูกแยก hystrix พีพี motoro จิตบำบัด StAR มีกรอบการแสดงกำลังเปิดการเข้ารหัสโปรตีนกรดอะมิโน 284 ที่มี 99% เหมือนกันและ 56-64% เหมือนโปรตีน StAR อื่น ๆ การสังเคราะห์ Pregnenolone โดยไตลิงสีเขียว (COS-1) เซลล์ transfected กับการแสดงออกสร้างการเข้ารหัสด้านคอเลสเตอรอลมนุษย์แตกแยกโซ่ / adrenodoxin reductase / adrenodoxin โปรตีนฟิวชั่นเพิ่มขึ้น 16 เท่าโดย coexpression กับ pCMV5 / P motoro StAR สร้างการแสดงออก การวิเคราะห์ blot ภาคเหนือเปิดเผยหลักฐาน 4000 bp ดาวดวงเดียวในพี motoro ต่อม interrenal แต่ RT-PCR บ่งชี้ StAR mRNA ยังจะแสดงในสมองอวัยวะเพศ, Atria, ช่อง, เหงือก (หญิงเท่านั้น) และกล้ามเนื้อ (หญิงเท่านั้น) การแสดงออกในเนื้อเยื่อ extragonadal extraadrenocortical และข้อบ่งชี้ว่า StAR อาจมีความสำคัญต่อกระบวนการอื่น ๆ กว่า steroidogenesis หลักฐานพี motoro StAR ที่ยาวที่สุดมีความคล้ายคลึงกันกับลำดับที่ดีในการองค์ประกอบซ้ำสั้นสลับพบใน elasmobranchs อื่น ๆ การศึกษาครั้งนี้เป็นครั้งแรกที่แยกและลักษณะ elasmobranch StAR ลำดับยีนและเพื่อแสดงให้เห็นถึงการทำงานของโปรตีน StAR nonmammalian ในระบบการแสดงออก heterologous

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ steroidogenic เฉียบพลันโปรตีน ( ดาว ) มีการควบคุมการสังเคราะห์สเตียรอยด์ในกระดูกสันหลัง เราได้แยกยีน ลำดับการเข้ารหัส ดาวในปลากระเบนน้ำจืดวิทริไนต์ hystrix , โมโตโร่ . หน้า hystrix ดาวใบเดียว ( ผู้ BP ) และสองใบซ้อนกัน ( 1272 หน้า โมโตโร่ ดาวและ BP 3365 ) แยก หน้า hystrix .โมโตโร่ ดาวใบประกอบด้วย open reading frames การเข้ารหัสโปรตีนของกรดอะมิโนที่ 284 99% เหมือนกันกับแต่ละอื่น ๆและ 56 – 64 เหมือนกับโปรตีน ดาวอื่น ๆการสังเคราะห์เพรกนีโนโลนโดยไตลิงเขียว ( cos-1 ) เซลล์ transfected ด้วยการแสดงออกที่สร้างโดยมนุษย์ไขมันข้างตัว adrenodoxin โซ่ / และ / adrenodoxin โปรตีนเพิ่มขึ้นเป็น 16 เท่า โดย coexpression กับ pcmv5 / หน้านิพจน์ โมโตโร่ ดาวสร้าง Northern blot analysis พบเดียว 4000 BP ดาวบันทึกในหน้า โมโตโร่ interrenal ต่อมแต่พบว่า mRNA นี้ดาวยังแสดงสมอง พัฒนาบน , หัวใจห้องล่าง กิลล์ ( เพศหญิงเท่านั้น ) และกล้ามเนื้อ ( เพศหญิงเท่านั้น ) การแสดงออกใน extragonadal และเนื้อเยื่อ extraadrenocortical เป็นข้อบ่งชี้ว่า ดาวอาจจะสำคัญกว่ากระบวนการอื่น ๆ steroidogenesis . ที่หน้าโมโตโร่ ดาวหลักฐานประกอบด้วยลำดับดี สั้นๆ เหมือนสลับองค์ประกอบที่พบใน elasmobranchs อื่น ๆ การศึกษาครั้งนี้เป็นครั้งแรกเพื่อแยกและวิเคราะห์ยีน elasmobranch ดาวลำดับและเพื่อแสดงให้เห็นถึงกิจกรรมของโปรตีนในระบบสตาร์ nonmammalian การแสดงออกเป็นชนิด .