The aim of the present study was to

The aim of the present study was to describe the main
aspects of the natural history of S. agalactiae infection incultured Nile tilapia in Brazil and to study the phenotypic
diversity, virulence and infection routes of this pathogen.
Materials and methods
During the period 2003–2007, outbreaks of meningoencephalitis
and septicemia in Nile tilapia cultivated in
nine different fish farms in six Brazilian states were
investigated. Six to twenty’ fish of each farm showing
typical clinical signs were sampled immediately transported
to the laboratory. For each farm, data were collected
on the type of culture system used, water temperature,
mortality record and weight range of fish affected.
For bacterial isolation, swabs of brain and kidney of each
fishwere sampled aseptically, streaked onto 5% sheep blood
agar and incubated at 28 8C for 72 h. The isolates were
characterized phenotypically and serologically using API20
STREP and Slidex Latex Agglutination kits (both from
BioMerieux, France), respectively. Amplification and
sequencing of the 16S rRNA gene were performed for all
strains identified as S. agalactiae. Total DNA was extracted
usinga commercialDNeasykit (Qiagen,Germany).16S rRNA
was amplified by PCR with the universal primers C70 (50-
AGA GTT TGA TYMTGG C-30) and B37 (50-TAC GGY TAC CTT
GTT ACG A-30), according to described by Fox et al. (1995).
PCR products were purified using a Wizard PCR Preps kit
(Promega, USA) and sequenced. Sequencing reactions were
performed using a BigDyeTM Terminator Cycle sequencing
kit (Applied Biosystems, CA, USA) and run on an ABI 3730XL
genetic analyzer (Applied Biosystems). Sequences were
alignedandthencomparedtosequenceof reference strain of
S. agalactiae ATCC 13813 (GenBank accession number
DQ303183) using the BLASTn algorithm. The limit fixed
for identification of a bacterial species was 98% nucleotide
identity in the 16S rRNA gene fragment sequenced.
To compare the virulence of S. agalactiae isolated from
different farms, five strains were selected for LD50 determination
(SA 01-03, SA 05-04, SA 08-05, SA 16-06 and SA 20-
06). The selected strains were inoculated in BHI and
incubated at28 8Cfor48 hunder lowagitation.The bacterial
suspension was then adjusted to an absorbance of 0.530 at
600 nm, corresponding to 108 CFU/mL. Nile tilapia fingerlings
(S. agalactiae free) were acquired from a commercial
hatchery at an average weight of 41.86  11.57 g for LD50
determination. Each experimental group comprised ten fish

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีจุดมุ่งหมายของการศึกษาปัจจุบันเพื่อ อธิบายหลัก
ด้านธรรมชาติวิทยาของการติดเชื้อ S. agalactiae incultured นิล ในบราซิล และเรียนไทป์
หลากหลาย virulence และติดเส้นทางของการศึกษานี้
วัสดุและวิธีการ
ในระหว่างรอบระยะเวลา 2003–2007 ระบาด meningoencephalitis
และบริการในปลานิลที่เพาะปลูกใน
มีฟาร์มปลาต่าง ๆ เก้าในอเมริกาบราซิล 6
สอบสวน หกถึงยี่สิบ ' ปลาของแต่ละฟาร์มแสดง
อาการแสดงทางคลินิกทั่วไปมีตัวอย่างส่งทันที
เพื่อห้องปฏิบัติการ ได้เก็บข้อมูลในแต่ละฟาร์ม
น้ำกับชนิดของระบบวัฒนธรรมที่ใช้ อุณหภูมิ,
ช่วงคอร์ดและน้ำหนักของการตายของปลาที่ได้รับผลกระทบ
สำหรับแยกเชื้อแบคทีเรีย swabs ของสมองและไตแต่ละ
ตัวอย่าง aseptically, fishwere ลายบนเลือดแกะ 5%
agar และ incubated ที่ 8C 28 สำหรับ 72 h แยกได้
ลักษณะ phenotypically และ serologically ใช้ API20
STREP และ Slidex ยาง Agglutination ชุด (ทั้งจาก
BioMerieux ฝรั่งเศส), ตามลำดับ ขยาย และ
ดำเนินลำดับ 16S rRNA ยีนทั้งหมด
เป็น S. agalactiae สายพันธุ์ มีสกัดดีเอ็นเอรวม
usinga commercialDNeasykit (Qiagen เยอรมนี) .16S rRNA
ขยาย โดย PCR กับไพรเมอร์สากล C70 (50-
AGA GTT TGA TYMTGG C-30) และ B37 (มาตรวัด 50 GGY มาตรวัด CTT
GTT จีบ A-30), ตามอธิบายโดยฟ็อกซ์และ al. (1995)
ผลิตภัณฑ์ PCR ได้บริสุทธิ์ใช้ชุด Preps PCR ช่วย
(Promega, USA) และตามลำดับ ลำดับปฏิกิริยาถูก
ใช้ลำดับรอบเทอร์มิเนเตอร์ BigDyeTM
ชุด (ใช้ Biosystems, CA, USA) และรันบน 3730XL เป็นลักชัวรี่
วิเคราะห์ทางพันธุกรรม (Biosystems ใช้) ลำดับถูก
alignedandthencomparedtosequenceof ต้องใช้อ้างอิงของ
S. agalactiae ATCC 13813 (เลขทะเบียน GenBank
DQ303183) โดยใช้อัลกอริทึม BLASTn วงเงินถาวร
สำหรับการระบุชนิดแบคทีเรียมีนิวคลีโอไทด์ 98%
เอกลักษณ์ในส่วน rRNA 16S ยีนเรียงลำดับ
การเปรียบเทียบ virulence ของ S. agalactiae โดดเดี่ยว
ฟาร์มต่าง ๆ สายพันธุ์ห้าถูกเลือกสำหรับการกำหนด LD50
(SA 01-03, SA 05-04, SA 08-05, SA 16 06 และ 20 SA-
06) สายพันธุ์ที่เลือกถูก inoculated ใน BHI และ
incubated lowagitation at28 8Cfor48 ฮันเดอร์แบคทีเรีย
ระงับถูกปรับไปเป็น absorbance 0.530 ที่
600 nm ที่สอดคล้องกับ 108 CFU/mL ชนิดปลานิลแม่น้ำไนล์
(S. agalactiae free) ได้รับมาจากการค้า
โรงเพาะที่มีน้ำหนักเฉลี่ยของ 41.86 11.57 สำหรับ LD50
กำหนด แต่ละกลุ่มการทดลองประกอบด้วยปลาสิบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการอธิบายหลัก
แง่มุมของประวัติศาสตร์ธรรมชาติของการติดเชื้อเอ agalactiae incultured ปลานิลในบราซิลและในการศึกษาฟีโนไทป์
ความหลากหลายทางความรุนแรงและการติดเชื้อของเส้นทางนี้เชื้อโรค
วัสดุและวิธีการ
ในช่วงระยะเวลา 2003-2007 ระบาดของสมองอักเสบ
และโลหิตเป็นพิษในปลานิลที่เพาะปลูกใน
ฟาร์มเลี้ยงปลาเก้าที่แตกต่างกันในหกรัฐของบราซิลได้
รับการตรวจสอบ หกถึงยี่สิบ 'ปลาของฟาร์มแต่ละการแสดง
อาการทางคลินิกทั่วไปทำการเก็บตัวอย่างได้ทันทีส่ง
ไปยังห้องปฏิบัติการ สำหรับแต่ละฟาร์มถูกเก็บรวบรวมข้อมูล
เกี่ยวกับชนิดของระบบวัฒนธรรมที่ใช้อุณหภูมิน้ำ
บันทึกการตายและช่วงน้ำหนักของปลาที่ได้รับผลกระทบ
สำหรับการแยกเชื้อแบคทีเรีย swabs ของสมองและไตของแต่ละ
fishwere ตัวอย่าง aseptically, ลายลง 5% แกะเลือด
และวุ้น บ่มที่ 28 8C 72 ชั่วโมง สายพันธุ์ที่ถูก
ลักษณะ Phenotypically และ serologically ใช้ API20
Strep และ Slidex ยาง Agglutination ชุด (ทั้งจาก
BIOMERIEUX, ฝรั่งเศส) ตามลำดับ การขยายและ
ลำดับของยีน 16S rRNA ได้ดำเนินการสำหรับทุก
สายพันธุ์ระบุว่าเป็นเอส agalactiae ดีเอ็นเอรวมการสกัด
usinga commercialDNeasykit (Qiagen, เยอรมนี) .16 S rRNA
ถูกขยายโดยวิธี PCR กับ C70 ไพรเมอร์สากล (50 -
AGA GTT TGA TYMTGG C-30) และ B37 (50-TAC ggy TAC CTT
GTT ACG-30) ตามที่อธิบายโดยฟ็อกซ์และอัล (1995)
ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการทำให้บริสุทธิ์โดยใช้ชุดตัวช่วยสร้าง PCR Preps
(Promega, สหรัฐอเมริกา) และติดใจ ปฏิกิริยาลำดับที่ถูก
ดำเนินการโดยใช้วงจรลำดับ BigDyeTM Terminator
ชุด (Applied Biosystems, CA, USA) และทำงานใน ABI 3730XL
วิเคราะห์ทางพันธุกรรม (Applied Biosystems) ลำดับเป็น
สายพันธุ์อ้างอิง alignedandthencomparedtosequenceof ของ
เอส agalactiae ATCC 13813 (GenBank ภาคยานุวัติจำนวน
DQ303183) โดยใช้ขั้นตอนวิธีการ BLASTn จำกัด คงที่
เพื่อระบุตัวตนของสายพันธุ์แบคทีเรียที่เป็นเบื่อหน่าย 98%
เอกลักษณ์ในส่วนของยีน 16S rRNA ติดใจ
เพื่อเปรียบเทียบความรุนแรงของ S. agalactiae ที่แยกได้จาก
ฟาร์มที่แตกต่างกันห้าสายพันธุ์ที่ถูกเลือกสำหรับการกำหนด LD50
(SA 01-03, SA 05 -04, SA 08-05, 16-06 และ SA SA 20 -
06) สายพันธุ์ที่ถูกเชื้อใน BHI และ
บ่ม at28 8Cfor48 hunder lowagitation.The แบคทีเรีย
ระงับการปรับแล้วการดูดกลืนแสงของ 0.530 ที่
600 นาโนเมตรสอดคล้องกับ 108 โคโลนี / มิลลิลิตร ไนล์พันธุ์ปลานิล
(S. agalactiae ฟรี) ที่ได้มาจากการค้า
โรงเพาะฟักที่น้ำหนักเฉลี่ย 41.86? 11.57 กรัม LD50
กำหนด แต่ละกลุ่มทดลองประกอบด้วยสิบปลา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จุดมุ่งหมายของการศึกษาคือ เพื่ออธิบายประเด็นหลัก
ของประวัติศาสตร์ธรรมชาติของการติดเชื้อ S . แลคเตีย incultured ปลานิลในบราซิล และเพื่อศึกษาความหลากหลายคุณสมบัติ
, โรคและการติดเชื้อเส้นทางของเชื้อโรคนี้ และวิธี

วัสดุในช่วงปี 2546 – 2550 การระบาดของเยื่อหุ้มสมองกับสมองอักเสบ และภาวะโลหิตเป็นพิษในปลานิลที่เลี้ยง
ใน
เก้าที่แตกต่างกันปลาฟาร์มใน 6 รัฐของบราซิลถูก
สอบสวน หกยี่สิบ ' ปลาแต่ละฟาร์ม แสดงอาการทางคลินิกทั่วไปจำนวน

ส่งทันทีไปยังห้องปฏิบัติการ แต่ละฟาร์ม เก็บข้อมูล
กับชนิดของระบบการเลี้ยงที่ใช้ อุณหภูมิน้ำ และน้ำหนักของช่วงของบันทึก

สำหรับปลาที่ได้รับผลกระทบ จากการแยกจากสมองและไตของแต่ละ
fishwere ตัวอย่าง aseptically ลายลง 5% , แกะเลือด
วุ้นและบ่มที่อุณหภูมิ 28 8C 72 ชั่วโมง ไอโซเลท และคนที่ใช้ลักษณะ phenotypically

และ api20 Strep slidex ยางเกาะติดกันอิสระ ( ทั้งจาก
biomerieux , ฝรั่งเศส ) , ตามลำดับ และการเพิ่มจำนวนของยีน 16S rRNA

ได้ทุกสายพันธุ์ที่ระบุว่าเป็นเอสแลคเตีย . ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกสกัด
การ commercialdneasykit ( QIAGEN , เยอรมนี ) เบส 16S rRNA
ถูกขยายโดยวิธี PCR ไพรเมอร์กับ C70 สากล ( 50 -
AGA gtt TGA tymtgg c-30 ) และ b37 ( 50-tac G TAC ซีทีที
gtt ACG a-30 ) ตามที่อธิบายไว้โดยฟ็อกซ์ et al . ( 2538 ) .
ผลิตภัณฑ์ PCR เป็นบริสุทธิ์ใช้พ่อมด PCR Preps Kit
( promega , USA ) และนี้ ปฏิกิริยาดังกล่าวมีการใช้ bigdyetm Terminator รอบ

ลำดับชุด ( Applied Biosystems , CA , USA ) และวิ่งบนปลาย 3730xl
พันธุกรรมวิเคราะห์ ( Applied Biosystems ) ลำดับถูก
alignedandthencomparedtosequenceof อ้างอิงเมื่อย
S . แลคเตีย ) 13 , 813 ( ขนาดเข้าเบอร์
dq303183 ) ใช้ blastn ขั้นตอนวิธี วงเงินถาวร
การจำแนกชนิดของแบคทีเรียสายพันธุ์คือ 98% นิวคลีโอไทด์ในยีน 16S rRNA
เอกลักษณ์
ส่วนนี้เปรียบเทียบความรุนแรงของ S . แลคเตียแยกจาก
ฟาร์มที่แตกต่างกันห้าสายพันธุ์ที่คัดเลือก ld50 ความมุ่งมั่น
( ซา 01-03 ซา 05-04 ซา 08-05 ซา 16-06 20 - ซา
06 ) การคัดเลือกสายพันธุ์เชื้อบ่มใน BHI และ
at28 8cfor48 hunder lowagitation . การระงับแบคทีเรีย
แล้วปรับเป็นค่า 0.530 ที่
600 nm ที่ 108 CFU / mlปลานิลลูกปลา
( S . แลคเตียฟรี ) ได้มาจากพาณิชย์
โรงเพาะฟักที่น้ำหนักเฉลี่ย 41.86  11.57 G สำหรับ ld50
ความมุ่งมั่น แต่ละกลุ่มประกอบด้วยสิบปลา