3.3. Application of the method to c

3.3. Application of the method to contaminated pig tissue samples
In addition to the examination of the method performance for spiked samples, the assay was also applied to real world samples for two of the analytes, AOZ and AMOZ.

In the course of an animal feeding study (see also Experimental section), furazolidone and furaltadone were administered in therapeutic doses to pigs over a period of 3 days. After the pigs had been slaughtered, muscle samples were collected, stored at −20°C and analysed by the developed LC–MS–MS method. Due to the scope of the feeding study, tissue samples of nitrofurazone- and nitrofurantoin-treated pigs (leading to free and bound SC and AH metabolites) were not available to us; however, a comparison with literature data could be made with the samples we obtained.

Chromatograms of respective meat samples of the pigs are shown in Fig. 5. Both AOZ and AMOZ could be identified unambiguously and quantified at levels of 100 and 30 ng g−1, respectively. The determined content of the AOZ metabolite is of the same magnitude as the concentration values obtained by McCracken et al. [15] and [16] when similar amounts of furazolidone were applied, considering that no discrimination between free and bound metabolites was made in our work.

The half-life of AOZ residues in vivo has been determined to be between 4 and 9 days [10], depending on the nature of the tissue, with the highest stability in muscle tissues. Judging from these data and from the detection limits of the present method, the illegal use of this group of antibacterial drugs should be detectable at least for several weeks after the last administration depending on the tissue and the individual analyte.

Furthermore, it has been reported that AOZ concentrations in liver tissue are several times higher than in muscle tissue [10], [11], [15] and [16]. This indicates that detection of nitrofuran type antibiotics would be possible over an even longer period of time. Since the nature of the liver matrix is considered to be different and/or more difficult for sufficient isolation of the metabolites and removal of possibly interfering matrix constituents, the developed LC–MS–MS method needs to be tested in more detail for its applicability also to this matrix. This is a matter for further investigations in our laboratory.

However, the sensitivity of the present method and its straightforward clean-up procedure, which may have to be modified for liver tissue samples, may qualify this assay as a suitable tool for the determination of nitrofuran antibiotic residues in muscle tissue, especially considering that there are cases where liver samples might not be readily available for analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.3 การประยุกต์วิธีการที่จะปนเปื้อนหมูเนื้อเยื่อตัวอย่างนอกจากการตรวจสอบประสิทธิภาพการทำงานวิธีตัวอย่างที่ถูกแทง การทดสอบยังใช้ตัวอย่างโลกสอง analytes, AOZ และ AMOZในหลักสูตรการให้อาหารสัตว์ศึกษา (โปรดดูส่วนทดลอง) furazolidone และ furaltadone ถูกจัดการในปริมาณยาให้สุกรระยะเวลา 3 วัน หลังจากมีการฆ่าสุกร ตัวอย่างกล้ามเนื้อรวบรวม จัดเก็บที่ −20 ° C และ analysed โดยวิธี LC – MS – MS ที่พัฒนา เนื่องจากขอบเขตของการศึกษาให้อาหาร ตัวอย่างเนื้อเยื่อรับ nitrofurazone และ nitrofurantoin สุกร (นำฟรี และผูก SC และ AH metabolites) ไม่ว่างเรา อย่างไรก็ตาม สามารถทำการเปรียบเทียบกับข้อมูลเอกสารประกอบการ ด้วยตัวอย่างที่เราได้รับChromatograms ตัวอย่างแต่ละเนื้อของสุกรจะแสดงใน Fig. 5 AOZ และ AMOZ อาจจะระบุอย่างชัดเจน และ quantified ที่ระดับ 30 และ 100 g−1, ng ตามลำดับ เนื้อหาที่กำหนดของ AOZ metabolite เป็นขนาดเดียวกันเป็นค่าความเข้มข้นที่ได้รับโดย al. et แมคแครคเก้นคัน [15] [16] เมื่อใช้จำนวน furazolidone คล้าย พิจารณาว่า ทำไม่แบ่งแยกระหว่าง metabolites ฟรี และถูกผูกไว้ในการทำงานของเราHalf-life ของ AOZ ตกค้างในสัตว์ทดลองได้แล้วว่าอยู่ระหว่าง 4 และ 9 วัน [10], ขึ้นอยู่กับลักษณะของเนื้อเยื่อ มีความเสถียรสูงสุดในเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อ ตัดสิน จากข้อมูลเหล่านี้ และ จากการตรวจสอบขีดจำกัดของวิธีการนำเสนอ การใช้ยาต้านเชื้อแบคทีเรียกลุ่มนี้ไม่ถูกต้องควรตรวจน้อยหลายสัปดาห์หลังจากบริหารสุดท้ายขึ้นอยู่กับเนื้อเยื่อและ analyte ละนอกจากนี้ มีรายงาน AOZ ความเข้มข้นในเนื้อเยื่อตับหลายครั้งสูงกว่าในเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อ [10], [11], [15] [16] และ บ่งชี้ว่า ตรวจพบยาปฏิชีวนะชนิด nitrofuran จะเป็นไปได้เป็นระยะเวลานานแม้ เนื่องจากลักษณะของเมทริกซ์ตับถือเป็นแตกต่างกัน และ/หรือยากแยก metabolites เพียงพอและกำจัด constituents เมทริกซ์อาจจะรบกวน วิธี LC – MS – MS พัฒนาต้องมีทดสอบในรายละเอียดเพิ่มเติมของความเกี่ยวข้องของยังกับเมทริกซ์นี้ นี้เป็นเรื่องการสอบสวนเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการของเราอย่างไรก็ตาม ความไวของวิธีการนำเสนอและความตรงไปตรงมาล้างตอน ซึ่งอาจจะต้องปรับเปลี่ยนตัวอย่างเนื้อเยื่อตับ อาจรับรองทดสอบนี้เป็นเครื่องมือที่เหมาะสมสำหรับการกำหนด nitrofuran ยาปฏิชีวนะตกค้างในเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อ โดยเฉพาะอย่างยิ่งพิจารณาที่ มีกรณีที่ตัวอย่างตับอาจไม่พร้อมสำหรับการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.3 การประยุกต์ใช้วิธีการตัวอย่างเนื้อเยื่อหมูปนเปื้อน
นอกจากการตรวจสอบประสิทธิภาพการทำงานวิธีการสำหรับกลุ่มตัวอย่างที่ได้ถูกแทง, การทดสอบถูกนำไปใช้ยังตัวอย่างโลกแห่งความจริงสำหรับสองวิเคราะห์, AOZ และ AMOZ. ในหลักสูตรของการศึกษาอาหารสัตว์ ( ดูในส่วนของการทดลองยัง), furazolidone และ furaltadone เป็นยาในปริมาณการรักษาไปยังสุกรในช่วง 3 วัน หลังจากสุกรที่ได้รับการฆ่าตัวอย่างกล้ามเนื้อได้รับการเก็บรวบรวมจัดเก็บที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสและวิเคราะห์โดยพัฒนาวิธี LC-MS-MS เนื่องจากขอบเขตของการศึกษาการให้อาหาร, ตัวอย่างเนื้อเยื่อของ nitrofurazone- และสุกร nitrofurantoin รับการรักษา (ที่นำไปสู่ ​​SC ฟรีและผูกพันและสาร AH) ไม่สามารถใช้ได้กับเรา; แต่เมื่อเปรียบเทียบกับข้อมูลจากเอกสารอาจจะทำกับกลุ่มตัวอย่างที่เราได้รับ. chromatograms ของตัวอย่างเนื้อสัตว์ตามลำดับของสุกรจะแสดงในรูป 5. ทั้งสอง AOZ และ AMOZ สามารถระบุได้อย่างไม่น่าสงสัยและวัดที่ระดับ 100 และ 30 กรัมศึกษา-1 ตามลำดับ เนื้อหามุ่งมั่นของ metabolite AOZ เป็นขนาดเดียวกับค่าความเข้มข้นที่ได้จากการ McCracken และคณะ [15] และ [16] เมื่อปริมาณที่ใกล้เคียงกัน furazolidone ถูกนำไปใช้พิจารณาว่าการเลือกปฏิบัติระหว่างสารฟรีและผูกพันไม่ได้ทำในการทำงานของเรา. ครึ่งชีวิตของสารตกค้างในร่างกาย AOZ ได้รับการพิจารณาจะอยู่ระหว่าง 4 และ 9 วัน [ 10] ขึ้นอยู่กับลักษณะของเนื้อเยื่อที่มีความมั่นคงสูงที่สุดในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ ตัดสินจากข้อมูลเหล่านี้และจากการตรวจสอบข้อ จำกัด ของวิธีการปัจจุบันใช้ที่ผิดกฎหมายของกลุ่มยาต้านเชื้อแบคทีเรียนี้ควรจะตรวจพบอย่างน้อยเป็นเวลาหลายสัปดาห์หลังจากที่การบริหารงานที่ผ่านมาขึ้นอยู่กับเนื้อเยื่อและการวิเคราะห์ของแต่ละบุคคล. นอกจากนี้ยังได้รับรายงาน ที่ความเข้มข้นของ AOZ ในเนื้อเยื่อตับมีหลายครั้งสูงกว่าในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ [10] [11] [15] และ [16] นี้บ่งชี้ว่าการตรวจสอบของยาปฏิชีวนะชนิด nitrofuran จะเป็นไปได้ในระยะเวลาได้อีกต่อไปของเวลา เนื่องจากธรรมชาติของเมทริกซ์ตับจะถือเป็นที่แตกต่างกันและ / หรือยากมากขึ้นสำหรับการแยกเพียงพอของสารและการกำจัดของอาจจะรบกวนองค์ประกอบเมทริกซ์พัฒนาวิธี LC-MS-MS จะต้องมีการทดสอบในรายละเอียดมากขึ้นสำหรับการบังคับใช้ยัง เพื่อเมทริกซ์นี้ นี้เป็นเรื่องของการสืบสวนต่อไปในห้องปฏิบัติการของเรา. อย่างไรก็ตามความไวของวิธีการปัจจุบันและขั้นตอนการทำความสะอาดขึ้นมันตรงไปตรงมาซึ่งอาจจะต้องมีการปรับเปลี่ยนสำหรับตัวอย่างเนื้อเยื่อตับอาจมีคุณสมบัติการทดสอบนี้เป็นเครื่องมือที่เหมาะสำหรับความมุ่งมั่นของ ยาปฏิชีวนะตกค้าง nitrofuran ในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อโดยเฉพาะการพิจารณาว่ามีกรณีที่กลุ่มตัวอย่างตับอาจจะไม่พร้อมสำหรับการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.3 . การประยุกต์ใช้วิธีการปนเปื้อนในตัวอย่างเนื้อเยื่อหมู
นอกจากการตรวจสอบประสิทธิภาพวิธีการอย่างถูกแทง ( ยังใช้กับตัวอย่างจริงของโลกสำหรับสองของสาร aoz , และ อามอส

ในหลักสูตรของการศึกษา ( ดูให้อาหารสัตว์ทดลองส่วน ) ,ฟูราโซลิโดน และฟูราลทาโดนได้รับในปริมาณรักษาสุกรตลอดระยะเวลา 3 วัน หลังจากหมูถูกฆ่า ตัวอย่างกล้ามเนื้อถูกเก็บที่อุณหภูมิ− 20 ° C และวิเคราะห์โดยการพัฒนา LC MS MS ––วิธีการ เนื่องจากขอบเขตของการให้การศึกษาตัวอย่างเนื้อเยื่อของไนโตรฟูราโซน - ไนถือว่าหมู ( นำไปสู่การฟรีและผูก SC และอา metabolites ) ไม่สามารถใช้ได้กับเรา อย่างไรก็ตาม การเปรียบเทียบกับข้อมูลวรรณกรรมได้ด้วยตัวอย่างที่เราได้

กลิ่นเนื้อของแต่ละตัวอย่างของสุกรที่แสดงในรูปที่ 5และสามารถระบุได้ทั้ง aoz อามอส และวัดกันที่ระดับ 100 และ 30 ng G − 1 ตามลำดับ การกำหนดเนื้อหาของ aoz ไลท์เป็นขนาดเดียวกันเป็นสมาธิได้โดย Mccracken et al . [ 15 ] [ 16 ] เมื่อที่คล้ายกันปริมาณฟูราโซลิโดนใช้ พิจารณาว่า การไม่เลือกปฏิบัติระหว่างฟรีและผูกไว้หลายชนิด ทำให้งานของเรา
.
ครึ่งชีวิตของ aoz ตกค้างในร่างกายได้ถูกกำหนดให้อยู่ระหว่าง 4 และ 9 วัน [ 10 ] ขึ้นอยู่กับลักษณะของเนื้อเยื่อที่มีเสถียรภาพมากที่สุดในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ ดูจากข้อมูลเหล่านี้ และจากการตรวจสอบข้อจำกัดของวิธีการในปัจจุบันการใช้ที่ผิดกฎหมายของกลุ่มต้านยาเสพติดควรจะตรวจอย่างน้อยเป็นเวลาหลายสัปดาห์หลังจากที่ผ่านมาการบริหารขึ้นอยู่กับเนื้อเยื่อ และครูแต่ละคน

นอกจากนี้ มันได้รับรายงานว่า aoz ความเข้มข้นในตับสูงกว่าในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ [ 10 ] หลายๆครั้ง [ 11 ] , [ 15 ] และ [ 16 ]นี้บ่งชี้ว่า การตรวจหาชนิดของยาปฏิชีวนะไนโตรฟูแรนจะเป็นไปได้ในช่วงถึงเวลานาน เนื่องจากธรรมชาติของตับเมทริกซ์ถือว่าแตกต่างกันและ / หรือยากการเพียงพอของ metabolites และการกำจัดอาจรบกวนทางเมทริกซ์การพัฒนาความต้องการ LC MS MS ––วิธีการได้รับการทดสอบในรายละเอียดเพิ่มเติมของการบังคับใช้ยังเมทริกซ์นี้ นี้เป็นเรื่องของการสืบสวนเพิ่มเติมในห้องปฏิบัติการของเรา

อย่างไรก็ตามความไวของวิธีการที่ใช้ในปัจจุบันและกระบวนการล้างที่ตรงไปตรงมา ซึ่งอาจจะต้องมีการแก้ไขสำหรับตับตัวอย่างเนื้อเยื่ออาจมีคุณสมบัติในการทดสอบนี้เป็นเครื่องมือที่เหมาะสำหรับการหาปริมาณไนโตรฟูแรนยาปฏิชีวนะตกค้างในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อ โดยเฉพาะเมื่อพิจารณาว่ามีกรณีที่ตัวอย่างตับอาจไม่พร้อมใช้งานสำหรับการวิเคราะห์