During ebb tide, for each experiment, fifty Plexiglas
circular plates (∅ 7 cm) were placed in an intertidal
mudflat located in the Mondego estuary. To ensure the
attachment of macroalgal spores to the surface of the
Plexiglas plates, because the surface properties greatly
affect settlement success (Lobban and Harrison, 1994), the
plates had a rough surface,which favoured the adhesion of
the spores. The replicates were hung from a rope that
became submerged during high tide. They were placed
10 cm apart from each other and 20–30 cm above the
sediment surface, in order to prevent sediment particles
deposition. Two days later, the plates were collected and
transported to the laboratory in a cooler within 1 h.
In the lab, 5 plates were immediately treated for
quantification of spore biomass (see Experimental
procedure 2.3). Depending on the observed germlings
growth, each experiment lasted for 10–14 days wherein
each plate was placed separately in 500 ml of seawater
collected in a beach near the Mondego estuary —
Figueira da Foz, previously filtered (Whatman GF/F),
and enriched with PES — Provasoli Enriched Seawater
(modification of L. Provasoli, 1963, in Bold andWynne,
1978). Germanium dioxide (GeO2 — 0.5 mg l−1) was
added in order to suppress diatom growth (Lotze et al.,
2000). Temperature was kept constant (20 °C) in a 14:10
light:dark cycle and aeration was provided in each
500 ml container. Replication was five-fold per
treatment in experiments 3 and 4. Due to the loss of
some plates from the rope in the field, experiments 1 and
2 had 4 replicates per treatment (except in the
5 psu×2 μmol l−1 PO4–P treatment — experiment 1,
wherein n=3). The treatment media were exchanged
every 3 or 4 days (Lotze and Schramm, 2000). Nutrients
were added to the media using stock solutions of
(NH4)2SO4 (30000 μM) and KH2PO4 (7500 μM).
Nitrogen was added in the form of ammonium, as this
nitrogen form is preferred over NO3
− by E. intestinalis
(e.g. Cohen and Fong, 2004).
ระหว่างน้ำ สำหรับแต่ละการทดลอง Plexiglas 50แผ่นวงกลม (∅ 7 ซ.ม.) ถูกวางในการ intertidalmudflat ที่อยู่ในห้อง Mondego เพื่อให้การเพาะเฟิร์น macroalgal ที่แนบมากับพื้นผิวของการPlexiglas แผ่น เนื่องจากคุณสมบัติพื้นผิวอย่างมากมีผลต่อความสำเร็จของการชำระเงิน (Lobban และ Harrison, 1994), การแผ่นมีความขรุขระที่ผิวหน้า favoured ยึดระหว่างเพาะเฟิร์น เหมือนกับถูกแขวนจากเชือกที่กลายเป็นน้ำท่วมในระหว่างน้ำขึ้นสูง พวกเขาถูกวาง10 ซมจากกันและด้านบน 20 – 30 ซม.พื้นผิวของตะกอน เพื่อป้องกันอนุภาคตะกอนสะสม สองวันต่อมา แผ่นถูกรวบรวม และขนส่งไปห้องปฏิบัติการในเย็นภายใน 1 ชั่วโมงในแล็บ 5 แผ่นได้ทันทีรับการรักษานับของชีวมวลสปอร์ (ดู Experimentalขั้นตอน 2.3) ขึ้นอยู่กับ germlings สังเกตเจริญเติบโต แต่ละการทดลองกินเวลา 10-14 วันนั้นแต่ละแผ่นถูกทำแยกต่างหากใน 500 ml ของน้ำทะเลรวบรวมในหาดใกล้ห้อง Mondego —โฟซโดดา Figueira ก่อนหน้านี้กรอง (Whatman GF/F),และอุดมไป ด้วย PES — Provasoli อุดมไปทะเล(ปรับเปลี่ยน L. Provasoli, 1963 ในตัวหนา andWynne1978) . เจอร์เมเนียมไดออกไซด์ (GeO2 — l−1 0.5 มิลลิกรัม) มีเพิ่มเพื่อระงับการเจริญเติบโตของไดอะตอม (Lotze et al.,2000) ถูกเก็บอุณหภูมิคง (20 ° C) ใน 14:10วงจรไฟ: มืดและ aeration ให้ในแต่ละคอนเทนเนอร์ขนาด 500 มล. จำลอง five-fold ต่อการรักษาในการทดลองที่ 3 และ 4 เนื่องจากการสูญเสียของบางแผ่นจากเชือกในฟิลด์ ทดลอง 1 และ2 มี 4 เหมือนกับต่อการรักษา (ยกเว้นในการ5 สงขลานครินทร์× 2 μmol l−1 PO4-P รักษาตัวทดลอง 1wherein n = 3) มีการแลกเปลี่ยนสื่อการรักษาทุก ๆ 3 หรือ 4 วัน (Lotze และ Schramm, 2000) สารอาหารถูกเพิ่มไปยังสื่อที่ใช้โซลูชั่นหุ้น(NH4) 2SO4 (30000 μM) และ KH2PO4 (7500 μM)มีเพิ่มไนโตรเจนในรูปของแอมโมเนีย เช่นนี้แบบฟอร์มไนโตรเจนจะต้องผ่าน NO3− โดย E. intestinalis(เช่นโคเฮนและฟง 2004)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ในช่วงน้ำลดลงสำหรับการทดลองแต่ละห้าสิบเรียงราย
แผ่นวงกลม (∅ 7 เซนติเมตร) ถูกวางไว้ใน intertidal
หาดโคลนที่ตั้งอยู่ในบริเวณปากแม่น้ำ Mondego เพื่อให้แน่ใจว่า
สิ่งที่แนบมาของสปอร์ macroalgal กับพื้นผิวของ
แผ่นเรียงรายเพราะคุณสมบัติของพื้นผิวเป็นอย่างมาก
ส่งผลกระทบต่อความสำเร็จของการตั้งถิ่นฐาน (Lobban และแฮร์ริสัน, 1994)
แผ่นมีพื้นผิวขรุขระซึ่งได้รับการสนับสนุนการยึดเกาะของ
สปอร์ ซ้ำถูกแขวนจากเชือกที่
กลายเป็นที่จมอยู่ใต้น้ำในช่วงน้ำขึ้นสูง พวกเขาถูกวางไว้
10 ซม. ห่างจากกันและ 20-30 เซนติเมตรเหนือ
ผิวตะกอนเพื่อป้องกันไม่ให้อนุภาคตะกอน
ทับถม สองวันต่อมาแผ่นถูกเก็บรวบรวมและ
ส่งไปยังห้องปฏิบัติการในเย็นภายใน 1 ชม.
ในห้องปฏิบัติการ 5 แผ่นได้รับการรักษาทันที
ปริมาณชีวมวลของสปอร์ (ดูการทดลอง
ขั้นตอนที่ 2.3) ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับข้อสังเกต germlings
การเจริญเติบโตของการทดลองแต่ละกินเวลานาน 10-14 วันนั้น
แต่ละจานถูกวางไว้แยกต่างหากใน 500 มล. ของน้ำทะเล
ที่เก็บรวบรวมในชายหาดที่อยู่ใกล้ปากแม่น้ำ Mondego -
Figueira da Foz กรองก่อนหน้านี้ (Whatman GF / F)
และอุดม กับ PES - Provasoli Enriched น้ำทะเล
(การเปลี่ยนแปลงของแอล Provasoli 1963 ในหนา andWynne,
1978) ก๊าซเจอร์เมเนียม (GeO2 - 0.5 มก. l-1) ได้รับการ
เพิ่มเพื่อที่จะยับยั้งการเจริญเติบโตไดอะตอม (. Lotze, et al,
2000) อุณหภูมิคง (20 ° C) ใน 14:10
แสง: วงจรมืดและอากาศถูกจัดให้ในแต่ละ
ภาชนะบรรจุ 500 มล. การจำลองแบบเป็นห้าเท่าต่อ
การรักษาในการทดลองที่ 3 และ 4 เนื่องจากการสูญเสียของ
แผ่นจากเชือกในด้านการทดลองที่ 1 และ
2 มี 4 ซ้ำต่อการรักษา (ยกเว้นใน
5 psu × 2 ไมโครโมล l-1 PO4- การรักษา P - ทดลองที่ 1
นั้น n = 3) สื่อการรักษามีการแลกเปลี่ยน
ทุก 3 หรือ 4 วัน (Lotze และ Schramm, 2000) สารอาหารที่
ถูกเพิ่มเข้าไปในสื่อใช้โซลูชั่นของหุ้น
(NH4) 2SO4 (30000 ไมครอน) และ KH2PO4 (7500 ไมครอน).
ไนโตรเจนถูกเพิ่มเข้ามาในรูปแบบของแอมโมเนียมเช่นนี้
รูปแบบไนโตรเจนเป็นที่ต้องการมากกว่า NO3
- อี intestinalis
(เช่นโคเฮน และฟง, 2004)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ระหว่างกระแสน้ำลง แต่ละการทดลองห้าสิบเพล็กซิกลาส
แผ่นวงกลม ( ∅ 7 ซม. ) อยู่ในเขตน้ำขึ้นน้ำลง
หาดตั้งอยู่ในมอนเดโกปากแม่น้ำ เพื่อให้สามารถ macroalgal
แนบกับพื้นผิวของ
แผ่นกระจกทนความร้อนแผ่น เพราะคุณสมบัติของพื้นผิวอย่างมาก
มีผลต่อการตั้งถิ่นฐานสำเร็จ ( ล็อบเบิน และแฮร์ริสัน , 1994 ) ,
แผ่นมีพื้นผิวขรุขระ ซึ่งชื่นชอบการยึดติด
สปอร์ . ส่วนแบบถูกแขวนจากเชือกที่
กลายเป็นจมในน้ำทะเลขึ้น พวกเขาถูกวางไว้
10 ซม. ห่างจากแต่ละอื่น ๆและ 20 – 30 ซม. เหนือผิวดิน
เพื่อป้องกันตะกอนอนุภาค
ฝาก สองวันต่อมา จานถูกเก็บและ
ส่งไปยังห้องปฏิบัติการในเย็นภายใน 1 h .
ในแลป 5 แผ่นได้ทันทีการรักษา
ปริมาณมวลชีวภาพของเชื้อรา ( ดูทดลอง
ขั้นตอน 2.3 ) ขึ้นอยู่กับลักษณะการเติบโต germlings
แต่ละการทดลองใช้เวลา 10 - 14 วัน ซึ่งแต่ละจานวางไว้ต่างหาก
เก็บ 500 มิลลิลิตรน้ำทะเลชายหาดใกล้มอนเดโกปากน้ำ -
ฟิกุยรา ดา ฟอซ ก่อนหน้านี้กรอง ( whatman GF / F )
- provasoli อุดมอุดมกับ PES และน้ำทะเล
( แก้ไข provasoli L . ,1963 ในตัวหนา andwynne
, 1978 ) เจอร์เมเนียมไดออกไซด์ ( geo2 - 0.5 mg L − 1 )
เพิ่มเพื่อปราบปรามการเจริญเติบโตของไดอะตอม ( lotze et al . ,
2 ) อุณหภูมิคงที่ ( 20 ° C ) ใน 14 : 10
แสง : วงจรมืดและอากาศก็ให้ในแต่ละ
500 มล. ภาชนะ คำตอบคือ ห้าเท่าต่อ
รักษาในการทดลองที่ 3 และ 4 เนื่องจากการสูญเสียของ
บางแผ่นจากเชือกในฟิลด์ การทดลองที่ 1 และ
2 มี 4 ซ้ำต่อรักษา ( ยกเว้นใน
5 มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์× 2 μโมล L − 1 po4 – p รักษา - การทดลองที่ 1
เมื่อ n = 3 ) การรักษาสื่อถูกแลกเปลี่ยน
ทุก 3 หรือ 4 วัน ( lotze และชแรมม์ , 2000 ) รัง
ถูกเพิ่มไปยังสื่อที่ใช้โซลูชั่นของหุ้น
( NH4 ) 2so4 ( 30 , 000 μ M ) และ kh2po4 ( 7 , 500 μ M )
ไนโตรเจนเพิ่มในรูปของแอมโมเนียมไนโตรเจนนี้
3
แบบฟอร์มที่ต้องผ่าน บริษัท เวสเทิร์น โดยintestinalis
( เช่น Cohen และฟง , 2004 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
