Two experiments have been performed

Two experiments have been performed to clone the bucardo, an extinct wild goat. The karyoplasts were thawed fibroblasts
derived from skin biopsies, obtained and cryopreserved in 1999 from the last living specimen, a female, which died in 2000.
Cytoplasts were mature oocytes collected from the oviducts of superovulated domestic goats. Oocytes were enucleated and coupled
to bucardo’s fibroblasts by electrofusion. Reconstructed embryos were cultured for 36 h or 7 d and transferred to either Spanish ibex
or hybrid (Spanish ibex male domestic goat) synchronized recipients. Embryos were placed, according to their developmental
stage, into the oviduct or into the uterine horn ipsilateral to an ovulated ovary. Pregnancy was monitored through their plasmatic
PAG levels. In Experiment 1, 285 embryos were reconstructed and 30 of them were transferred at the 3- to 6-cells stage to 5
recipients. The remaining embryos were further cultured to day 7, and 24 of them transferred at compact morula/blastocyst stage to
8 recipients. In Experiment 2, 154 reconstructed embryos were transferred to 44 recipients at the 3- to 6-cells stage. Pregnancies
were attained in 0/8 and 7/49 of the uterine and oviduct-transferred recipients, respectively. One recipient maintained pregnancy to
term, displaying very high PAG levels. One morphologically normal bucardo female was obtained by caesarean section. The
newborn died some minutes after birth due to physical defects in lungs. Nuclear DNA confirmed that the clone was genetically
identical to the bucardo’s donor cells. To our knowledge, this is the first animal born from an extinct subspecies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สองการทดลองได้รับการดำเนินการโคลน Bucardo ซึ่งเป็นแพะป่าสูญพันธุ์ karyoplasts ถูกละลายเซลล์
ที่ได้มาจากการตรวจชิ้นเนื้อผิวหนังที่ได้รับและแช่แข็งในปี 1999 จากชิ้นสุดท้ายในชีวิตที่เป็นเพศหญิงซึ่งเสียชีวิตในปี 2000
Cytoplasts เป็นเซลล์ไข่ผู้ใหญ่ที่เก็บจากท่อนำไข่ของ superovulated แพะในประเทศ เซลล์ไข่ถูก enucleated และควบคู่
ไปรบรา Bucardo โดย electrofusion ตัวอ่อนที่สร้างขึ้นใหม่มาเลี้ยงสำหรับ 36 ชั่วโมงหรือ 7 วันและโอนไปยังทั้ง Ibex สเปน
ผู้รับหรือไฮบริด (สเปนใส่ไฟชายแพะในประเทศ) ตรงกัน ตัวอ่อนที่ถูกวางไว้ตามการพัฒนาของพวกเขา
บนเวทีเข้าไปในท่อนำไข่หรือเข้าไปในฮอร์นมดลูก ipsilateral ไปยังรังไข่ตก การตั้งครรภ์ได้รับการตรวจสอบผ่าน plasmatic ของพวกเขา
ในระดับ PAG ในการทดลองที่ 1, 285 ตัวอ่อนที่ถูกสร้างขึ้นใหม่และ 30 ของพวกเขาถูกถ่ายโอนที่ 3- 6 เซลล์เวทีถึง 5
ผู้รับ ตัวอ่อนที่เหลืออยู่ต่อไปเพาะเลี้ยงในวันที่ 7 และ 24 ของพวกเขาที่มีขนาดกะทัดรัดโอนเวทีมอรูล่า / ตัวอ่อนไป
8 ผู้รับ ในการทดลองที่ 2 154 ตัวอ่อนสร้างขึ้นใหม่ถูกโอนไปยัง 44 ผู้รับที่ 3- 6 เซลล์เวที การตั้งครรภ์ที่
ได้รับการบรรลุใน 0/8 และ 7/49 ของมดลูกท่อนำไข่และผู้รับโอนตามลำดับ ผู้รับหนึ่งเก็บรักษาไว้เพื่อการตั้งครรภ์
ระยะแสดงระดับ PAG สูงมาก ผู้หญิงคนหนึ่ง Bucardo ปกติของสัณฐานวิทยาได้มาจากการผ่าตัดคลอด
แรกเกิดเสียชีวิตบางนาทีหลังคลอดเนื่องจากความบกพร่องทางร่างกายในปอด นิวเคลียร์ดีเอ็นเอยืนยันว่าโคลนเป็นทางพันธุกรรม
เหมือนกันกับ Bucardo ของผู้บริจาคเซลล์ เพื่อความรู้ของเรานี้เป็นสัตว์ที่แรกที่เกิดจากการสูญพันธุ์อย่างช่ำชอง