he cellobiohydrolase II (CBH II) ge

he cellobiohydrolase II (CBH II) gene cbh2 from Trichoderma reesei was cloned and its codons were optimized in accordance with the codon usage frequencies of the host Pichia pastoris. The AOX1 strong promoter inducible by methanol was employed to efficiently express the foreign gene cbh2 in P. pastoris. It was found that 5.84 ± 0.42 U cm−3 CBH II was obtained at 96 h using the synthetic cbh2 gene whose codons were optimized, 2.02-fold higher than using the native cbh2 gene (2.89 ± 0.32 U cm−3), indicating that the codon optimization strategy was an effective approach to enhance the heterologous expression of CBH II in P. pastoris. The product of recombinant P. pastoris CBH II had an approximate molecular weight 58 kDa. Its optimal pH and temperature were 5.0 and 50 °C, respectively. The recombinant CBH II was used to enhance the yields of the enzymatic hydrolysis of the corn stover and rice straw pretreated with sodium hydroxide by improving the exo-exo-synergism between CBH II and CBH I in T. reesei cellulase. The yields 94.7% and 83.3% were achieved in the enzymatic hydrolysis of corn stover and rice straw pretreated by sodium hydroxide, respectively.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เขา cellobiohydrolase II (CBH II) ยีน cbh2 จาก Trichoderma reesei ถูกโคลน แล้ว codons ของถูกปรับให้เหมาะสมตามความถี่ในการใช้รหัสพันธุกรรมของโฮสต์ Pichia pastoris ที่ AOX1 แข็งแกร่งโปรโมเตอร์ inducible โดยเมทานอลถูกจ้างได้อย่างมีประสิทธิภาพแสดง cbh2 ยีนต่างใน P. pastoris มันถูกค้นพบที่ cm−3 U 5.84 ± 0.42 CBH II กล่าวที่ h 96 ใช้ยีน cbh2 สังเคราะห์ codons ได้เพิ่มประสิทธิภาพ 2.02-fold สูงกว่าการใช้ยีน cbh2 พื้นเมือง (2.89 ±$ 0.32 U cm−3), ซึ่งบ่งชี้ว่า กลยุทธ์การเพิ่มประสิทธิภาพของรหัสพันธุกรรมเป็นวิธีมีประสิทธิภาพเพื่อเพิ่มนิพจน์ heterologous CBH สองใน P. pastoris วททช P. pastoris CBH II ผลิตภัณฑ์ที่ได้มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 58 kDa ของ pH ที่เหมาะสมและอุณหภูมิ 5.0 และ 50 ° C ตามลำดับ Recombinant CBH II ถูกใช้เพื่อเพิ่มผลผลิตของไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของ stover ข้าวโพด และฟางข้าว pretreated ด้วยโซเดียมไฮดรอกไซด์ โดยการปรับปรุงการเอกโซเอกโซ-synergism CBH II และ CBH ฉันในต. reesei cellulase อัตราผลตอบแทน 94.7% และ 83.3% บรรลุในไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของข้าวโพด stover และข้าวฟาง โดยโซเดียมไฮดรอกไซด์ pretreated ตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เขา cellobiohydrolase ii (CBH II) cbh2 ยีนจากเชื้อรา Trichoderma reesei ถูกโคลนและ codons ที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมสอดคล้องกับการใช้งานความถี่ codon ของโฮสต์ Pichia pastoris AOX1 ก่อการแข็งแกร่ง inducible โดยเมทานอลถูกจ้างให้มีประสิทธิภาพการแสดง cbh2 ยีนต่างประเทศในพี pastoris มันก็พบว่า 5.84 ± 0.42 U ซม-3 CBH ครั้งที่สองที่ได้รับใน 96 ชั่วโมงโดยใช้ยีนสังเคราะห์ cbh2 มี codons ถูกที่ดีที่สุด 2.02 เท่าสูงกว่าการใช้ยีน cbh2 พื้นเมือง (2.89 ± 0.32 U ซม-3) แสดงให้เห็นว่า ยุทธศาสตร์การเพิ่มประสิทธิภาพ codon เป็นแนวทางที่มีประสิทธิภาพเพื่อเพิ่มการแสดงออกของ heterologous CBH ที่สองในพี pastoris ผลิตภัณฑ์ของ recombinant พี pastoris CBH ครั้งที่สองมีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 58 กิโลดาลตัน พีเอชที่เหมาะสมและมีอุณหภูมิ 5.0 และ 50 องศาเซลเซียสตามลำดับ recombinant CBH ครั้งที่สองถูกนำมาใช้เพื่อเพิ่มอัตราผลตอบแทนของการย่อยของเอนไซม์ของซังข้าวโพดฟางข้าวและปรับสภาพกับโซดาไฟโดยการปรับปรุง EXO-EXO-เสริมฤทธิ์ระหว่าง CBH ครั้งที่สองและ CBH ผม T. reesei เซลลูเลส อัตราผลตอบแทน 94.7% และ 83.3% กำลังประสบความสำเร็จในการย่อยของเอนไซม์ของซังข้าวโพดและฟางข้าวปรับสภาพโดยโซดาไฟตามลำดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เขา cellobiohydrolase II ( CBH cbh2 จาก Trichoderma reesei II ) ของยีน ras ถูกโคลนและเหมาะสมสอดคล้องกับความถี่ของ codon ที่ใช้โฮสต์ pichia pastoris . การ aox1 แข็งแรงส่งเสริม inducible ด้วยเมทานอลได้ถูกนำมาใช้อย่างมีประสิทธิภาพแสดงยีนต่างประเทศ cbh2 ในหน้า pastoris . พบว่า ให้การยอมรับ± 042 U cm − 3 CBH II ได้ 96 ชั่วโมงโดยใช้ cbh2 ยีนสังเคราะห์ที่เหมาะสม 2.02-fold ras , สูงกว่าการใช้ยีน cbh2 พื้นเมือง ( 2.89 ± 0.32 u cm − 3 ) แสดงว่าการส่งเสริมกลยุทธ์การเพิ่มประสิทธิภาพเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพเพื่อเพิ่มการแสดงชนิดของ CBH 2 หน้า pastoris . สินค้าของรีคอมบิแนนท์หน้า pastoris CBH II มีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 58 กิโลดาลตันของ pH ที่เหมาะสมและอุณหภูมิ คือ 5.0 และ 50 องศาองศาเซลเซียส ตามลำดับ II CBH รีคอมบิแนนท์ที่ใช้ในการเพิ่มผลผลิตของการย่อยสลายด้วยเอนไซม์ของข้าวโพดฝักและฟางข้าวที่ได้รับกับโซเดียมไฮดรอกไซด์ โดยการปรับปรุง exo exo การเกื้อกูลระหว่าง CBH II และฉันใน CBH T . reesei เซล . อัตราผลตอบแทนที่ร้อยละ 94.7 83 .3 ร้อยละในการย่อยได้ของเอนไซม์ ส่วนข้าวโพดและฟางข้าวกรัมโซเดียมไฮดรอกไซด์ ตามลำดับ