3.2. Method developmentThe extracti

3.2. Method developmentThe extraction of PFASs from milk has been performed in bothacidic and alkaline conditions. Acidic conditions were obtainedwith formic acid; however elevated concentration of formic acidcould determine a contamination of PFOA, while lower concentra-tion negatively impacted the method detection limit [15]. Alkalineconditions were obtained with methanolic NaOH for about 16 h, todigest sample before extraction [21]. More recently, alkaline con-ditions and acidic conditions were both used for rapid extractionof PFASs with satisfactory results [5,15]. It appears that, with milk,fast extraction could be a prerequisite to avoid strong interactionsof PFASs with proteins or fats. Then, usually, a clean-up step with aweak anion exchange resin was performed to reduce the interfer-ence. Only in a recent published method, after a QuEChERS (Quick,Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe) extraction, an aliquot ofsample was directly injected, but matrix matched calibration wasnecessary. We selected for clean-up of the raw extract a GCB col-umn. The choice of this material for cleaning-up the extracts wasdue to its peculiar characteristics. As formerly reported, this sor-bent can behave both as RP and as anion-exchanger sorbent. Thesecharacteristics make it suitable for isolating acidic substances fromneutral and basic ones [30,32], and therefore it could be a suitableadsorbent for our purpose to isolate acidic PFAS from milk extract.DoEs were used to study the sample preparation conditions.When using an experimental design, variables that might affectmethod performances should be located in the early stage, to avoidreiteration of the DoE. In our study we reduced the DoE variablesby fixing the amount of milk and type and size of the SPE column onthe bases of previous method development experiences [22]. Fourvariables were supposed to influence the recoveries from the milksample: two qualitative, such as the solvent for protein precipita-tion (acetonitrile, acetone, and methanol) and the acidification ofsamples (no acidification, acidification to pH 2 before adding thedeproteinizing solvent), and two quantitative: temperature (V1)and the ratio solvent-to-sample (V2). The knowledge about thenature of the GCB surface and the previous experiences [23,33]enabled us in limiting the number of the variables of the clean-upprocedure. Therefore, two variables, such as sample dilution (V3)and/or sample acidification (V7), were supposed that could affectthe analyte retention on SPE column. Moreover, for analyte elutionfrom GCB column, the volume of eluent was fixed to 10 mL, whilethe choice for the variable of the eluent was reduced to methanolor a mixture methanol:methylene chloride 1:1 (v/v) (V4), with theaddition, as displacer from the anion exchange sites [34], of a saltsuch as HCOONH4, soluble in the solvent mixture and compati-ble with MS, at two concentration levels (V5). Finally, owing thesolubility problem of the compounds, the reconstituting solventwas supposed might be critical. Fixed the reconstitution volumeafter solvent evaporation (0.5 mL) and sonication (10 min), the ratiomethanol to water in the solvent was also tested (V6). Some of theseparameters could vary both quantitatively and qualitatively, givingrise to a very complex DoE. Therefore, the variable level of valuestested for each quantitative feature was, in the first instance, two(−1 and +1).The DoE could be much simplified if the three steps had beenconsidered independent from each other. However, our long expe-rience in SPE with GCB, suggested to us that interaction was notonly possible, but also highly probable to occur. Then, because oftheir economy in terms of the number of experiments to be per-formed when a certain number of factors has to be screened, sixfractional factorial designs 2(7–4), which allowed the use of a sat-urated 8 experiments scheme for each of them were chosen assuitable for this study. In the first DoE, acetone was chosen as depro-teinization/extraction solvent, and acidification of sample beforeand after extraction as another variable. In the second DoE, theacidification step was not applied. The same scheme was used withmethanol and acetonitrile. Four experiments, applied to the centralpoint, were used to measure the variability due to random errorsand can therefore be employed to compute the standard devia-tion of the effects under the assumption of the null hypothesis.Results for the extraction solvent acetone are shown on Tables 2Sand 3S.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2. วิธี developmentThe สกัด PFASs จากนมมีการ bothacidic และสภาพด่าง เงื่อนไขเปรี้ยวมีกรด obtainedwith ความเข้มข้นสูงแต่ของ formic acidcould กำหนดปนของ PFOA ขณะ concentra-สเตรชันต่ำส่งผลกระทบต่อวิธีการตรวจสอบขีดจำกัด [15] Alkalineconditions ได้รับกับ NaOH methanolic สำหรับประมาณ 16 h ตัวอย่าง todigest ก่อนสกัด [21] เมื่อเร็ว ๆ นี้ คอน ditions ด่างและกรดเงื่อนไขทั้งสองใช้สำหรับ extractionof อย่างรวดเร็ว PFASs กับผลลัพธ์ที่น่าพอใจ [5,15] ดูเหมือนว่า กับนม สกัดอย่างรวดเร็วอาจจะเป็นข้อกำหนดเบื้องต้นเพื่อหลีกเลี่ยงการ PFASs interactionsof แข็งแรง มีโปรตีนหรือไขมัน แล้ว มัก จะ ทำขั้นตอนการล้าง ด้วย aweak anion exchange resin เพื่อลด interfer-ence ในวิธีเผยแพร่ล่าสุด หลังจากการสกัดแบบ QuEChERS (ด่วน สบาย ถูก มีประสิทธิภาพ Rugged และปลอดภัย) การ ofsample aliquot ถูกฉีดโดยตรง แต่เมตริกซ์คู่เทียบ wasnecessary เราเลือกสำหรับล้างสารสกัดดิบเป็น GCB คอลัมน์-umn ตัวเลือกการล้างข้อมูล wasdue สารสกัดจากการมีลักษณะเฉพาะของวัสดุนี้ เป็นรายงานเดิม ซอโค้งนี้สามารถทำงานทั้ง เป็น RP และ anion-ดูดซับแลกเปลี่ยน Thesecharacteristics ทำให้เหมาะสำหรับการแยกสารกรด fromneutral และ basic คน [30,32], และดังนั้นมันอาจจะ suitableadsorbent สำหรับวัตถุประสงค์เพื่อแยกกรด PFAS จากสารสกัดจากน้ำนมใช้ในการศึกษาสภาพการเตรียมตัวอย่างเมื่อใช้การออกแบบการทดลอง ตัวแปรที่อาจแสดง affectmethod ควรจะอยู่ในระยะเริ่มต้น การ avoidreiteration ของการป้องกัน ในการศึกษาของ เราลดลง variablesby ป้องกันแก้ไขจำนวนนม และชนิดและขนาดของคอลัมน์ SPE บนฐานของการพัฒนาวิธีการก่อนหน้านี้ประสบการณ์ [22] Fourvariables ควรจะมีผล recoveries จาก milksample: สอง เชิงคุณภาพเช่นตัวทำละลายสำหรับ precipita โปรตีนสเตรชัน (acetonitrile อะซิโตน และเมทานอล) และ ofsamples ยู (ไม่มียู ยูกับค่า pH 2 ก่อนที่จะเพิ่มตัวทำละลาย thedeproteinizing), และสองเชิงปริมาณ: อุณหภูมิ (V1) และอัตราส่วนตัวทำละลายการตัวอย่าง (V2) ความรู้เกี่ยวกับ thenature ของผิว GCB และประสบการณ์ก่อนหน้านี้ [23,33] เปิดใช้งานให้เราในการจำกัดจำนวนตัวแปรของการทำความสะอาด-upprocedure สองตัวแปร เช่นตัวอย่างเจือจาง (V3) และ/หรือตัวอย่างยู (V7), ดังนั้น ไม่ควรที่สามารถรักษา analyte affectthe บนคอลัมน์ SPE นอกจากนี้ สำหรับ analyte elutionfrom GCB คอลัมน์ กำหนดปริมาณ eluent การ 10 mL, whilethe ทางเลือกสำหรับตัวแปรของ eluent ถูกลดลงเป็น methanolor เป็นส่วนผสมเมทานอล: เมทิลีนไดคลอไรด์ 1:1 (v/v) (V4), กับ theaddition เป็น displacer จากเว็บไซต์แลกเปลี่ยน anion [34], ของ saltsuch ที่เป็น HCOONH4 ละลายในตัวทำละลายผสมและ compati ble กับ MS ที่สองระดับความเข้มข้น (V5) สุดท้าย owing thesolubility ปัญหาของสารประกอบ solventwas reconstituting ควรอาจร้ายแรง ถาวร reconstitution volumeafter เป็นตัวทำละลายระเหย (0.5 mL) และ sonication (10 นาที), ratiomethanol น้ำในตัวทำละลายถูกยังทดสอบ (V6) บาง theseparameters อาจ quantitatively และ qualitatively, givingrise เพื่อป้องกันมากซับซ้อนแตกต่างกันไป ดังนั้น valuestested สำหรับแต่ละคุณลักษณะเชิงปริมาณระดับตัวแปรถูก ตัว two(−1 and 1)ป้องกันการสามารถทำได้มากง่ายขึ้นถ้าขั้นตอนสาม beenconsidered เป็นอิสระจากกัน อย่างไรก็ตาม เรายาว expe rience ใน SPE มี GCB แนะนำให้เราโต้ตอบที่ถูก notonly ได้ แต่ยังสูงน่าเป็นไป แล้ว เนื่องจาก oftheir เศรษฐกิจในแง่ของจำนวนการทดลองเพื่อจะต่อเกิดขึ้นเมื่อจำนวนของปัจจัยจะมีฉาย sixfractional ออกแบบแฟก 2(7–4) ซึ่งได้รับอนุญาตใช้แผนการทดลอง 8 เสาร์-urated สำหรับแต่ละของพวกเขา ได้เลือก assuitable สำหรับการศึกษานี้ ในการป้องกันครั้งแรก อะซิโตนถูกเลือกเป็น depro-teinization/สกัด ตัวทำละลาย และยูของ beforeand ตัวอย่างหลังการแยกเป็นตัวแปรอีกตัว ในการป้องกันที่สอง ขั้นตอน theacidification ไม่ใช้ โครงร่างเดียวกันที่ใช้ withmethanol และ acetonitrile ทดลอง 4 กับ centralpoint ใช้ในการวัดสำหรับความผันผวนเนื่องจาก errorsand สุ่มสามารถดังนั้นลูกจ้างจะคำนวณแบบมาตรฐาน devia-สเตรชันของผลกระทบภายใต้สมมติฐานของสมมติฐานว่างผลลัพธ์สำหรับอะซีโตนเป็นตัวทำละลายสกัดถูกแสดงอยู่ในตาราง 2Sand 3S

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 วิธีการสกัด developmentThe ของ PFASs จากนมที่ได้รับการดำเนินการในเงื่อนไข bothacidic และด่าง สภาพที่เป็นกรดเป็นกรดฟอร์มิ obtainedwith; ความเข้มข้นสูง แต่ของฟอร์มิ acidcould ตรวจสอบการปนเปื้อนของ PFOA ในขณะที่ต่ำกว่าความเข้มข้น-tion ลบส่งผลกระทบต่อขีด จำกัด การตรวจสอบวิธีการ [15] Alkalineconditions ได้รับด้วยเมทานอล NaOH ประมาณ 16 ชั่วโมงตัวอย่าง todigest ก่อนที่จะสกัด [21] ๆ นี้อัลคาไลน์ con-ditions และเงื่อนไขที่เป็นกรดทั้งสองใช้สำหรับ extractionof อย่างรวดเร็ว PFASs กับผลลัพธ์ที่น่าพอใจ [5,15] ปรากฏว่ามีน้ำนมสกัดอย่างรวดเร็วอาจจะจำเป็นเพื่อหลีกเลี่ยงการที่แข็งแกร่ง interactionsof PFASs กับโปรตีนหรือไขมัน นั้นมักจะมีขั้นตอนการทำความสะอาดขึ้นด้วยเรซินแลกเปลี่ยนไอออน aweak ได้ดำเนินการเพื่อลด interfer-ence เฉพาะในวิธีการตีพิมพ์เมื่อเร็ว ๆ นี้หลังจากที่ QuEChERS (ด่วนง่ายราคาถูกที่มีประสิทธิภาพทนทานและปลอดภัย) การสกัด ofsample หารถูกฉีดโดยตรง แต่เมทริกซ์ที่ตรงกับการสอบเทียบ wasnecessary เราเลือกสำหรับการทำความสะอาดขึ้นของสารสกัดดิบ GCB เทือกเขา-UMN ทางเลือกของวัสดุนี้สำหรับการทำความสะอาดขึ้นสารสกัดจาก wasdue กับลักษณะเฉพาะของ ในฐานะที่เคยรายงานนี้ sor งอสามารถทำตัวเป็นทั้ง RP และในขณะที่แอนไอออน-แลกเปลี่ยนตัวดูดซับ Thesecharacteristics ทำให้มันเหมาะสำหรับการแยกสารที่เป็นกรดและพื้นฐาน fromneutral คน [30,32] และดังนั้นจึงอาจจะ suitableadsorbent เพื่อจุดประสงค์ของเราที่จะแยกกรด PFAS จาก extract.DoEs นมถูกนำมาใช้ในการศึกษาการจัดทำตัวอย่าง conditions.When ใช้ทดลอง ออกแบบตัวแปรที่อาจ affectme​​thod การแสดงควรจะอยู่ในระยะเริ่มต้นเพื่อ avoidreiteration ของกวาง ในการศึกษาของเราลดลงกวาง variablesby กำหนดปริมาณของนมและชนิดและขนาดของคอลัมน์ SPE onthe ฐานของประสบการณ์การพัฒนาวิธีการก่อนหน้า [22] Fourvariables เขาควรจะมีอิทธิพลต่อการกลับคืนจาก milksample: สองคุณภาพเช่นตัวทำละลายโปรตีนฝนไม่ tion (acetonitrile อะซิโตนและเมทานอล) และ ofsamples กรด (ไม่มีกรดกรด, ค่าพีเอช 2 ก่อนที่จะเพิ่ม thedeproteinizing ตัวทำละลาย) และ สองปริมาณอุณหภูมิ (V1) และอัตราส่วนของตัวทำละลายไปตัวอย่าง (V2) ความรู้เกี่ยวกับ thenature ของพื้นผิว GCB และประสบการณ์ก่อนหน้านี้ [23,33] ช่วยให้เราในการ จำกัด จำนวนของตัวแปรของการทำความสะอาด upprocedure ดังนั้นสองตัวแปรเช่นตัวอย่างเจือจาง (V3) และ / หรือตัวอย่างกรด (V7) ก็ควรที่จะเก็บรักษาวิเคราะห์ affectthe ในคอลัมน์เอสพีอี นอกจากนี้สำหรับคอลัมน์ GCB elutionfrom วิเคราะห์ปริมาณของตัวชะก็คงถึง 10 มิลลิลิตร whilethe ทางเลือกสำหรับตัวแปรของตัวชะเหลือ methanolor เมทานอลเป็นส่วนผสม: คลอไรด์เมทิลีน 01:01 (v / v) (V4) กับ theaddition เป็น displacer จากเว็บไซต์แลกเปลี่ยนไอออน [34] ของ saltsuch เป็น HCOONH4 ละลายในตัวทำละลายผสมและเข้ากันได้-เบิ้ลกับ MS ที่สองระดับความเข้มข้น (V5) สุดท้ายเนื่องจากปัญหา thesolubility ของสาร, solventwas สร้างมันใหม่ควรอาจจะมีความสำคัญ คงละลายระเหยตัวทำละลาย volumeafter (0.5 มิลลิลิตร) และ sonication (10 นาที), ratiomethanol น้ำเป็นตัวทำละลายในการทดสอบยัง (V6) บางส่วนของ theseparameters อาจแตกต่างกันทั้งในเชิงปริมาณและเชิงคุณภาพ givingrise กับกวางที่ซับซ้อนมาก ดังนั้นระดับของตัวแปร values​​tested สำหรับแต่ละคุณลักษณะเชิงปริมาณเป็นในกรณีแรกสอง (-1 และ +1). กวางอาจจะง่ายมากถ้าสามขั้นตอนได้ beenconsidered เป็นอิสระจากกัน แต่ยาว expe-rience ใน SPE ด้วย GCB ของเราบอกกับเราว่าการทำงานร่วมกันเป็นไปได้ notonly แต่ยังน่าจะเป็นสูงที่จะเกิดขึ้น แล้วเพราะ oftheir เศรษฐกิจในแง่ของจำนวนของการทดลองที่จะเกิดขึ้นต่อเมื่อจำนวนที่แน่นอนของปัจจัยที่จะต้องมีการคัดกรองการออกแบบปัจจัย sixfractional 2 (7-4) ซึ่งได้รับอนุญาตให้ใช้นั่ง-urated 8 โครงการทดลอง สำหรับแต่ละส่วนของพวกเขาได้รับการแต่งตั้ง assuitable สำหรับการศึกษานี้ ในครั้งแรกกวางอะซิโตนรับเลือกให้เป็นตัวทำละลาย depro-teinization/extraction และกรดของกลุ่มตัวอย่างก่อนและหลังการสกัดเป็นตัวแปรอื่น ในกวางที่สองขั้นตอน theacidification ไม่ได้นำไปใช้ โครงการเดียวกันถูกนำมาใช้ withmethanol และ acetonitrile สี่การทดลองนำไปใช้กับ centralpoint ถูกนำมาใช้ในการวัดความแปรปรวนเนื่องจาก errorsand สุ่มจึงสามารถใช้ในการคำนวณมาตรฐาน Devia ชั่นของผลกระทบภายใต้สมมติฐานของ hypothesis.Results null สำหรับการสกัดด้วยตัวทำละลายอะซิโตนจะแสดงบนตาราง 2Sand 3S

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . วิธี developmentthe การสกัดจากนม pfass ได้รับการปฏิบัติใน bothacidic และสภาวะด่าง มีสภาพเป็นกรดเป็น obtainedwith กรด อย่างไรก็ตามระดับความเข้มข้นของมิค acidcould ตรวจสอบการปนเปื้อนของ pfoa ในขณะที่ลดผลกระทบจำกัด tion ครุ่นคิดวิธีตรวจจับ [ 15 ] alkalineconditions ไฮดรอกไซด์เมทานอลได้ประมาณ 16 ชั่วโมงtodigest ตัวอย่างก่อนการสกัด [ 21 ] เมื่อเร็วๆ นี้ ditions con ด่างและมีสภาพเป็นกรดมีทั้งใช้ pfass extractionof อย่างรวดเร็วด้วยความพอใจผล [ 5,15 ] ปรากฏว่า , นม , การสกัดอย่างรวดเร็ว อาจจะต้องหลีกเลี่ยง pfass interactionsof แข็งแรงกับโปรตีนหรือไขมัน แล้วปกติขั้นตอนการล้างด้วยเรซินแลกเปลี่ยนไอออน aweak ได้ลด interfer ENCE . ในล่าสุดวิธีการเผยแพร่ หลังจาก quechers ( เร็ว , ง่าย , ราคาถูก , มีประสิทธิภาพ , ทนทานและปลอดภัย ) แยกเป็นส่วนลงตัวตัวอย่างโดยตรงฉีด แต่แบบจับคู่การสอบเทียบ wasnecessary . เราเลือกความสะอาดของวัตถุดิบสารสกัดจากรูปภาพ Col อืม .ทางเลือกของวัสดุสำหรับทำความสะอาด สารสกัด wasdue คุณลักษณะเฉพาะ . ตามที่รายงานก่อนนี้เสียงอสามารถทำตัวเป็นทั้ง RP และดูดซับแลกเปลี่ยนไอออน . นอกจากนี้ ทำให้มันเหมาะสำหรับการแยกกรดและสาร fromneutral พื้นฐานที่ 30,32 [ ] , และดังนั้นจึงอาจจะ suitableadsorbent สำหรับวัตถุประสงค์ของเราเพื่อแยกกรด pfas สารสกัดจากนมจะถูกใช้เพื่อศึกษาการเตรียมตัวอย่างไม่มีเงื่อนไข เมื่อใช้การออกแบบการทดลอง ตัวแปรที่อาจ affectmethod การแสดงควรจะตั้งอยู่ในช่วงแรก เพื่อ avoidreiteration ของโด ในการศึกษาเราลด โด variablesby แก้ไขปริมาณของนม และ ชนิดและขนาดของคอลัมน์ SPE บนฐานของการพัฒนาก่อนหน้านี้วิธีการประสบการณ์ [ 22 ]fourvariables ควรจะอิทธิพลกลับคืนจาก milksample : สองเชิงคุณภาพ เช่น ละลายโปรตีน precipita tion ( ไนอะซีโตนและเมทานอล ) และกรดในประเทศไทย ( ไม่มีกรดกรด pH 2 , ก่อนที่จะเพิ่ม thedeproteinizing ตัวทำละลาย ) และสองเชิงปริมาณ : อุณหภูมิ ( V1 ) และอัตราส่วนของตัวทำละลาย ( v2 กับตัวอย่าง )ความรู้เกี่ยวกับรูปภาพซึ่งปัจจัยแวดล้อมของพื้นผิว และประสบการณ์ที่ผ่านมา [ 23,33 ] เปิดใช้งานเราในการจํากัดจํานวนตัวแปรของความสะอาด upprocedure . ดังนั้น สองตัวแปร เช่นตัวอย่างเจือจาง ( V3 ) และ / หรือตัวอย่างกรด ( V7 ) ควรที่จะส่งผลกระทบต่อครู ความคงทนในคอลัมน์ SPE . นอกจากนี้ ครู elutionfrom รูปภาพคอลัมน์ปริมาตรของสารละลายที่ได้คงที่ 10 ml , ตัวเลือกและสำหรับตัวแปรของตัว ก็ลดลง methanolor ส่วนผสมเมทานอล : เมทิลีนคลอไรด์ 1 : 1 ( v / v ) ( V4 ) พร้อมเพิ่มเป็น displacer จากแลกเปลี่ยนแอนไอออนเว็บไซต์ [ 34 ] , ของ saltsuch เป็น hcoonh4 ละลายในตัวทำละลาย และส่วนผสม อัตรา ble กับ MS ที่ความเข้มข้น 2 ระดับ ( V5 ) ในที่สุดเนื่องจากปัญหาของ thesolubility สารตัวทำละลาย , reconstituting ควรอาจจะเข้าขั้นวิกฤต ซ่อมเอง volumeafter ตัวทำละลายระเหย ( 0.5 มิลลิลิตร ) และ sonication ( 10 นาที ) , ratiomethanol น้ำในตัวทำละลายยังทดสอบ ( V6 ) บางส่วนของ theseparameters อาจแตกต่างกันไป ทั้งในเชิงปริมาณและคุณภาพ givingrise เป็นโดที่ซับซ้อนมาก ดังนั้นตัวแปรระดับ valuestested สำหรับแต่ละคุณลักษณะเชิงปริมาณ คือ ในกรณีแรกที่ สอง ( − 1 ) กวางอาจจะง่ายมาก ถ้าสามขั้นตอนมี beenconsidered อิสระจากแต่ละอื่น ๆ อย่างไรก็ตาม rience expe ของเราที่ยาวนานในเอสพีกับรูปภาพที่ชวนให้เราได้ นอกจากการปฏิสัมพันธ์ที่เป็นไปได้ แต่ยังเป็นไปได้สูงมากที่จะเกิดขึ้น จากนั้นเพราะของเศรษฐกิจในแง่ของจำนวนของการทดลองจะถูกต่อขึ้นเมื่อจํานวนหนึ่งของปัจจัยที่จะต้องคัดกรอง sixfractional การทดลองแบบ 2 ( 7 ) 4 ) ที่อนุญาตให้ใช้ของนั่ง urated 8 การทดลองรูปแบบสำหรับแต่ละของพวกเขาถูกเลือก assuitable สำหรับการศึกษานี้ ในรายการแรก อะซิโตน ได้รับเลือกเป็น depro teinization / การสกัดตัวทำละลายกรดและตัวอย่างก่อนและหลังการแยกเป็นอีกตัวแปร . ในขั้นตอนการสร้างกรดโด 2 ยังไม่ใช้ โครงการเดียวกันและใช้ withmethanol ไน . 4 การทดลองใช้กับ centralpoint , ,ถูกใช้เพื่อวัดความแปรปรวนเนื่องจากสุ่ม errorsand จึงสามารถใช้คำนวณมาตรฐานเดเวียร์ tion ผลภายใต้สมมติฐานสมมติฐานโมฆะ ผลสำหรับการสกัดด้วยตัวทำละลายอะซิโตนแสดงบนโต๊ะ 2sand 3s