Then, to increase the specificity a

Then, to increase the specificity and sensitivity of RACE products, we
employed a mixture of both reactions for a subsequent PCR, in whichwe
used the gene-specific sequences AAGGAGGACATGCGGCTCACATandGGCTCACATTGCCCCCGTGTAas
nested reverse primers
(program: 2 min initial denaturation at 94C; 25 cycles: denaturation for
30 s at 94C; annealing for 30 s at 58C, elongation for 30 s at 72C; final
extension for 10 min at 72C). From this approach we obtained a useful
cDNAfragment of 180 bp (including 44 bp of the GeneRacerTM 5
oligo).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

จากนั้น เพิ่มความและความไวของการแข่งขัน เราใช้ส่วนผสมของปฏิกิริยาทั้งสองสำหรับการ PCR ต่อมา ใน whichweใช้ลำดับยีนเฉพาะ AAGGAGGACATGCGGCTCACATandGGCTCACATTGCCCCCGTGTAasไพรเมอร์ย้อนที่ซ้อนกัน(โปรแกรม: denaturation เริ่มต้น 2 นาทีที่ 94 C รอบ 25: denaturation สำหรับ30 s ที่ 94 C การหลอมสำหรับ s c เป็น 58 ยืด 30 30 s ที่ 72 C ขั้นสุดท้ายขยายสำหรับ 10 นาทีที่ 72 C) จากนี้ เรารับเป็นประโยชน์cDNAfragment ของ 180 bp (รวม 44 bp ของสารโอลิโก GeneRacerTM 5)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จากนั้นจะเพิ่มความจำเพาะและความไวของผลิตภัณฑ์การแข่งขันที่เรา
จ้างมาเป็นส่วนผสมในการเกิดปฏิกิริยาทั้งต่อมา PCR ใน whichwe
ใช้ลำดับยีนเฉพาะ AAGGAGGACATGCGGCTCACATandGGCTCACATTGCCCCCGTGTAas
ซ้อนไพรเมอร์กลับ
(โปรแกรม: 2 นาที denaturation เริ่มต้นที่ 94 C 25 รอบ? : denaturation สำหรับ
? 30 s 94 C; หลอมเป็นเวลา 30 วินาทีที่ 58 C, การยืดตัวเป็นเวลา 30 วินาทีที่ 72 C; สุดท้าย
? ส่วนขยายสำหรับ 10 นาทีที่ 72 C) จากวิธีการนี้เราได้รับประโยชน์
cDNAfragment 180 bp (รวม 44 bp ของ GeneRacerTM 5? Oligo)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แล้วเพิ่มความจำและความไวของผลิตภัณฑ์การแข่งขัน เราที่ใช้เป็นส่วนผสมของทั้งสองปฏิกิริยาสำหรับ PCR ที่ตามมาใน whichweใช้ลำดับยีนที่เฉพาะเจาะจง aaggaggacatgcggctcacatandggctcacattgcccccgtgtaasไพรเมอร์ที่ซ้อนกัน ย้อนกลับ( รายการ : 2 นาทีแรก ( ที่ 94c ; 25 รอบ : ( สำหรับ30 วินาทีที่ 94c ; ขนาด 30 S ที่ 58c ความยาว 30 วินาที ที่ 72c ; สุดท้ายส่วนขยายสำหรับ 10 นาทีที่ 72c ) เราได้รับประโยชน์จากวิธีการนี้cdnafragment 180 BP ( รวม 44 BP ของ generacertm 5 โอลิโก )