2.2. Microalgae preparation
The microalga used in this study was
C. protothecoides
(UTEX 256)
which was kindly provided by Dr. Terry Walker, Biosystems Engineering
Professor in the Department of Environmental Engineering and Earth
Sciences, Clemson University. The alga was cultivated on basal medium
supplemented with 30 g/L of glucose and 4 g/L of yeast extract. The basal
medium was modified from the BG-11 medium
[11]
. The initial pH of
the media was adjusted to 6.8 with 5 M KOH before the media was
sterilized by autoclave at 121 °C for 20 min. All cultures were incubated
under heterotrophic conditions (no light) in 500-mL
fl
asks with 200 mL
working volume in a shaking incubator (New Brunswick Scientific
Excella E24, Eppendorf, NY, USA) for 7 days until used. The incubation
temperature and shaking speed were 28 °C and 180 rpm, respectively.
When the optical density (OD) reached 1.5 at day 7, algal biomass
was harvested by centrifugation at 4000 rpm for 10 min and washed
with deionized (DI) water three times. All supernatants were discarded
and the concentrated algae biomass paste was stored at 4 °C for less
than 2 h until used while the algal biomass dry weight (BDW) was measured. According to the measured BDW, algal biomass was resuspended
in DI water to make 50 g/L of algal biomass suspension stock which was
held in a 4 °C ice bath until used.
2.2 เตรียมสาหร่าย
สาหร่ายที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้คือ
ซี protothecoides
(UTEX 256)
ซึ่งได้รับการให้ความกรุณาโดยดร. เทอร์รี่วอล์คเกอร์, ไบโอซิสเต็มส์วิศวกรรม
ศาสตราจารย์ในภาควิชาวิศวกรรมสิ่งแวดล้อมและโลก
วิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยเคลม สาหร่ายได้รับการปลูกฝังในสื่อฐาน
เสริมด้วย 30 กรัม / ลิตรของน้ำตาลกลูโคสและ 4 กรัม / ลิตรของสารสกัดจากยีสต์ มูลฐาน
กลางถูกดัดแปลงมาจากสื่อ BG-11 [11] ค่า pH เริ่มต้นของสื่อที่ถูกปรับให้ 6.8 5 M KOH ก่อนที่จะสื่อได้รับการฆ่าเชื้อโดยการนึ่งที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที ทุกวัฒนธรรมถูกบ่มภายใต้เงื่อนไข heterotrophic (ไม่มีไฟ) ใน 500 มิลลิลิตรFL ถามกับ 200 มิลลิลิตรปริมาณการทำงานในศูนย์บ่มเพาะสั่น (New Brunswick วิทยาศาสตร์Excella E24, Eppendorf, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) เป็นเวลา 7 วันจนกว่าจะใช้ บ่มอุณหภูมิและสั่นความเร็ว 28 องศาเซลเซียสและ 180 รอบต่อนาทีตามลำดับ. เมื่อความหนาแน่นของแสง (OD) ถึง 1.5 ในวันที่ 7, สาหร่ายชีวมวลได้รับการเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีและล้างด้วยปราศจากไอออน (DI) น้ำสาม ครั้ง supernatants ทั้งหมดถูกทิ้งและวางสาหร่ายชีวมวลที่มีความเข้มข้นได้รับการเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลาน้อยกว่า 2 ชั่วโมงจนนำมาใช้ในขณะที่สาหร่ายชีวมวลน้ำหนักแห้ง (BDW) วัด ตามที่วัด BDW, สาหร่ายชีวมวลถูก resuspended ในน้ำ DI ที่จะทำให้ 50 กรัม / ลิตรของการระงับหุ้นสาหร่ายชีวมวลซึ่งถูกจัดขึ้นในห้องอาบน้ำน้ำแข็ง 4 องศาเซลเซียสจนใช้
การแปล กรุณารอสักครู่..
