Annexin v.PE-/7-AAD assay for detec

Annexin v.PE-/7-AAD assay for detection of cell apoptosis To determine the degree of apoptosis after exposure to HCV inocula or NHP, cells were stained with annexin v conjugated with phycoerythrin (PE), or 7 established aminoactinomycin D (7-AAD), as previously 16]. Briefly, 1 x 105 cells were washed with annexin buffer containing 10 mM HEPES (Invitrogen), 5 mM NaCl, 5 mM KC1 and 2 mM CaCl2 and centrifuged at 1,500 rpm for 10 min at 4 °C. Then, a cocktail containing 50 ug/mL of 7-AAD (Invitrogen) and 50 Hg/mL of annexin-V-PE (Invitrogen) were prepared in annexin buffer. Cells were suspended in 100 HL of apoptosis cocktail and kept on ice for 30 min. After staining, cells were washed once with annexin buffer, spun down and suspended in 500 HL of [1 annexin buffer to be analyzed by flow cytometry

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Annexin v.PE- / 7-AAD assay ตรวจของ apoptosis ในเซลล์เพื่อกำหนดระดับของการ apoptosis หลังจากสัมผัสกับสายของ inocula หรือ NHP เซลล์ถูกสี ด้วย annexin v กลวงกับ phycoerythrin (PE), หรือ 7 aminoactinomycin D (7-AAD), ก่อตั้ง 16 ก่อนหน้านี้] สั้น ๆ 1 x 105 เซลล์ถูกล้าง ด้วย annexin บัฟเฟอร์ประกอบด้วย 10 มม. HEPES (Invitrogen), 5 mM NaCl, CaCl2 2 มม.และ 5 มม. KC1 และ centrifuged ที่ 1500 rpm สำหรับ 10 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส แล้ว เป็นค็อกเทลที่มี 50 ยู จี/mL ของ 7-AAD (Invitrogen) และ 50 Hg/mL ของ annexin-V-PE (Invitrogen) ถูกเตรียมใน annexin บัฟเฟอร์ เซลล์ถูกหยุดชั่วคราวใน HL 100 ของค็อกเทล apoptosis และเก็บไว้ในน้ำแข็ง 30 นาที หลังจากย้อมสี เซลล์ล้างครั้งเดียว ด้วย annexin บัฟเฟอร์ ปั่นลง และหยุดใน HL 500 [annexin บัฟเฟอร์จะวิเคราะห์ โดยเซลล์กระแส 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Annexin v.PE- / 7-AAD ทดสอบสำหรับการตรวจสอบการตายของเซลล์ในการกำหนดระดับของการตายหลังจากการสัมผัสกับไวรัสตับอักเสบซี inocula หรือ NHP เซลล์ถูกย้อมด้วยสี annexin วีผันกับ phycoerythrin (PE) หรือ 7 จัดตั้ง aminoactinomycin D ​​(7 อ๊าด) เช่นก่อนหน้านี้ 16] สั้น ๆ , 1 x 105 เซลล์ถูกล้างด้วยบัฟเฟอร์ annexin มี 10 มิลลิ HEPES (Invitrogen) 5 มิลลิโซเดียมคลอไรด์ 5 มิลลิ KC1 และ 2 mM CaCl2 และหมุนเหวี่ยงที่ 1,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส จากนั้นค๊อกเทลที่มี 50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร 7 อ๊าด (Invitrogen) และ 50 ปรอท / มิลลิลิตร annexin-V-PE (Invitrogen) ได้จัดทำในบัฟเฟอร์ annexin เซลล์ที่ถูกระงับใน 100 HL ค๊อกเทลของการตายและเก็บไว้บนน้ำแข็งเป็นเวลา 30 นาที หลังจากการย้อมสีเซลล์ถูกล้างครั้งเดียวกับกันชน annexin หมุนลงและระงับใน 500 HL ของ [1 บัฟเฟอร์ annexin จะได้รับการวิเคราะห์โดยโฟ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจหาเซลล์ของเซลล์ v.pe-/7-aad assay พบว่าระดับของการสนับสนุนหลังการปลูกถ่าย inocula หรือ nhp เซลล์ที่ถูกย้อมด้วยสีของเซลล์ ( conjugated กับไฟโคอิริทริท ( PE ) หรือ 7 ตั้งขึ้น aminoactinomycin D ( 7-aad ) ก่อนหน้านี้เป็น 16 ] สั้น ๆ , 1 x 105 เซลล์ถูกล้างบัฟเฟอร์ที่มีของเซลล์ 10 มิลฮีเปส ( Invitrogen ) ขนาด 5 มิลลิเมตร2 มม. และ 5 มม. KC1 ผลิตไฟฟ้า 1 , 500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที ที่อุณหภูมิ 4 องศา จากนั้นเป็นค็อกเทลที่มี 50 ml ไมโครกรัม / 7-aad ( Invitrogen ) และ 50 มิลลิลิตรปรอท annexin-v-pe ( Invitrogen ) เตรียมของเซลล์ในบัฟเฟอร์ เซลล์ที่ถูกระงับใน 100 HL ของการตาย ค็อกเทล และเก็บไว้ในที่เย็นเป็นเวลา 30 นาที หลังจากการย้อมสีเซลล์ถูกซักครั้งกับของเซลล์ บัฟเฟอร์ปั่นลงและแขวนลอยใน 500 HL [ 1 ของเซลล์บัฟเฟอร์จะวิเคราะห์โดยเครื่องนับเซลล์