3.2. Occurrence and influence of kil

3.2. Occurrence and influence of killer activity on laboratory second-fermentation of base wine under low-pressure conditions(LPC)
Low pressure second-fermentation of base wine-2 was done with the pre-selected yeasts, single (no killer activity) or mixed (killer activity expected) inoculated. Experimental conditions (pH 2.95 and 12 C) were those usual for industrial sparkling-wine making (pH 2.8e3.3 and 12e16 C), except for the first 15 days when the temperature was 18e19 C to promote yeast killer activity. All single and mixed yeasts properly completed second-fermentation to less than 0.05 g/L glucoseþfructose after 15 days. The amount of viable cells increased during the first five fermen-tation days, and progressively decreased thereafter, with Rod23-1B being the fastest to lose cell viability. Fair amounts of viable yeasts (102e105 CFU/mL) were still detected after nine months of aging (data not shown), contrary to the case of high-pressure second fermentation inwhich usually no viable yeasts are detected beyond three months of fermentation/aging (Feuillat and Charpentier, 1982; Martinez-Rodriguez et al., 2002; Núnez et al., 2005). Dur-ing the first thirty days, the proportion of dead cells increased more rapidly in the mixed-than in the single-inoculated fermentations (Fig. 2A and B), as was to be expected if there really were killer activity under these extreme environmental conditions. Indeed, the proportion of viable killer yeasts increased to dominate the fermentation while killer-sensitive yeasts decreased. The fastest killer effect was found for those mixes containing EX229 Klus-killer strain, while those mixes containing EX85 K2-killer strain showed slow killer effects (Fig. 2C and D). These results are discordant with those found in the killer plate assay in which EX229 presented the overall poorest killer activity (Fig. 1A and B). This may be because the second fermentation process took much longer than the killer plate assay, allowing the accumulation of Klus toxin in the wine to better kill the sensitive yeasts. EX229 efficiently killed the Rod23-1B K2N-killer strain (Fig. 2D), which is concordant with the killer plate assay result at pH 4 and 20 C.Overall, the amount of polysaccharides increased throughout the second fermentation until six months, and then decreased until the end of the process at nine months. The amount of proteins increased progressively from the beginning to the end of the pro-cess. Despite this different behaviour, the amounts of both poly-saccharides and proteins were always significantly greater in the phenotype against Rod23-1B under these conditions (Fig. 1A). In general, when the lawn yeast lacked killer virus and the corre-sponding killer phenotype, the killer activity increased, especially at 20 C (pH 3.2 or 4). The exception was the Klus strain EX229 which still showed very low or undetectable killer activity. The K2 EX85 and K2N Rod23-1B strains showed promising killer activity at both low pH (3.2) and low temperature (12 C), but this activity became almost undetectable when these circumstances were combined, i.e., at pH 3.2 and 12 C (Fig. 1B). These results are not surprising given that these conditions are far fromthose considered optimal for S. cerevisiae killer activity (pH 4e5.8, 25e30 C) (Gulbiniene et al., 2004; Marquina et al., 2002; Perez et al., 2001; Rodríguez-Cousino et al., 2011). Moreover, Klus yeasts have been described as having a broad killer spectrum, but low intensity and slow killer phenotype (Rodríguez-Cousino et al., 2011). The killer plate assay took 4e8 days to perform, and killer toxin may require more time to diffuse through the agar medium.Based on the results of this preliminary characterization of the yeast strains, we pre-selected EX85, EX85R, EX229, EX229-R1, and Rod23-1B for further analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2. เกิดขึ้นและโน้มน้าวใจกลุ่มของนักฆ่ากิจกรรมในห้องปฏิบัติการสองหมักไวน์ฐานภายใต้แรงดันต่ำ conditions(LPC) ทำฐานไวน์-2 วินาทีความดันต่ำหมัก ด้วยยีสต์ที่เลือกไว้ล่วงหน้า เดี่ยว (ไม่มีกิจกรรมนักฆ่า) หรือผสม (กิจกรรมนักฆ่าที่คาด) inoculated เงื่อนไขทดลอง (pH 2.95 และ 12 C) คนเหล่านั้นปกติสำหรับอุตสาหกรรมการทำไวน์ประกาย (pH 2.8e3.3 และ 12e16 C), ยกเว้นแรก 15 วันเมื่ออุณหภูมิเป็น C 18e19 เพื่อส่งเสริมกิจกรรมนักฆ่ายีสต์ เดี่ยว และแบบผสมยีสต์ทั้งหมดอย่างถูกต้องสมบูรณ์น้อยกว่า 0.05 g/L glucoseþfructose การหมักสองหลังจาก 15 วัน จำนวนของเซลล์ทำงานได้เพิ่มขึ้นในระหว่างวัน fermen-tation ด้านแรก และความก้าวหน้าลดลงหลังจากนั้น กับ Rod23-1B เร็วที่สุดเสียชีวิตเซลล์ จำนวนยีสต์ทำงานได้ (102e105 CFU/มิลลิลิตร) ยุติธรรมยังคงตรวจพบของริ้วรอย (ไม่แสดงข้อมูล) ขัดกับกรณีของแรงดันสูงสองหมักซึ่งมักจะ ตรวจพบยีสต์ทำงานได้ไม่เกินสามเดือนของหมัก/อายุ (Feuillat และชาร์ป็องตีเย 1982 มาร์ติเนเกซ et al. 2002 Núnez et al. 2005) แรกสามสิบวัน Dur ing สัดส่วนของเซลล์เพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วในการผสมมากกว่าในหมักแหนมที่ inoculated เดี่ยว (รูป 2A และ B), เป็นที่คาดหวังถ้าจริง ๆ มีกิจกรรมภายใต้สภาพแวดล้อมเหล่านี้มากนักฆ่าได้ จริง สัดส่วนของงานนักฆ่ายีสต์ขึ้นครองหมักในขณะที่ไวต่อการฆ่ายีสต์ลดลง ผลฆ่าเร็วที่พบสำหรับผสมที่ประกอบด้วยสายพันธุ์ EX229 Klus นักฆ่า ในขณะที่เพลงเหล่านั้นที่ประกอบด้วย EX85 K2-นักฆ่าสายพันธุ์พบว่าผลกระทบฆ่าช้า (รูปที่ 2C และ D) ผลลัพธ์เหล่านี้จะไม่ปรองดองกันกับที่พบในการทดสอบแผ่นนักฆ่าที่ EX229 นำเสนอกิจกรรมนักฆ่ายากจนโดยรวม (รูป 1A และ B) ซึ่งอาจเนื่องจากกระบวนการหมักสองเอานานกว่าทดสอบแผ่นนักฆ่า ทำให้การสะสมของสารพิษ Klus ในไวน์เพื่อฆ่าดีกว่ายีสต์สำคัญ EX229 efficiently ฆ่าสายพันธุ์ Rod23-1B K2N-นักฆ่า (รูปที่ 2D), ซึ่งเป็น concordant กับผลทดสอบแผ่นนักฆ่าที่ pH 4 และ 20 C.Overall ปริมาณของสารที่เพิ่มขึ้นตลอดการหมักสองจนถึงหกเดือน และลดลงจนจบกระบวนการที่นั ปริมาณของโปรตีนที่เพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ จากจุดเริ่มต้นจะสิ้นสุดอัตราเงินสงเคราะห์ปีที่โป แม้ มีพฤติกรรมนี้แตกต่างกัน ปริมาณโพลี-saccharides และโปรตีนได้เสมอ significantly มากขึ้นในกนิกับ Rod23 1B ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ (รูปที่ 1A) ทั่วไป เมื่อยีสต์หญ้าขาดนักฆ่าไวรัสและกนินักฆ่าของคอร์ sponding กิจกรรมนักฆ่าเพิ่มขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ 20 C (pH 3.2 หรือ 4) สายพันธุ์ Klus EX229 ซึ่งยัง แสดงให้เห็นกิจกรรมนักฆ่าที่ต่ำมาก หรือไม่สามารถตรวจจับข้อยกเว้นได้ สายพันธุ์ K2 EX85 และ Rod23 K2N-1B แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมนักฆ่าสัญญาทั้งที่ค่า pH ต่ำ (3.2) และอุณหภูมิต่ำ (12 C), แต่กิจกรรมนี้เป็นจิตวิทยาเกือบเมื่อสถานการณ์เหล่านี้ถูกรวมกัน เช่น pH 3.2 และ 12 C (รูปที่ 1B) ผลลัพธ์เหล่านี้จะไม่น่าแปลกใจว่าเงื่อนไขเหล่านี้เป็น fromthose ไกลถือว่าเหมาะสมที่สุดสำหรับ S. cerevisiae กิจกรรมนักฆ่า (pH 4e5.8, 25e30 C) (Gulbiniene et al. 2004 Marquina et al. 2002 เปเรซ et al. 2001 Rodríguez-Cousino et al. 2011) นอกจากนี้ ยีสต์ Klus ไว้ว่า มีนักฆ่า สเปกตรัม แต่ความเข้มข้นต่ำ และช้านักฆ่ากนิ (ปี Cousino et al. 2011) ทดสอบแผ่นนักฆ่าเอาวัน 4e8 การดำเนินการ และนักฆ่าพิษอาจต้องใช้เวลาในการกระจายสื่อวุ้น จากผลการจำแนกลักษณะนี้เบื้องต้นของสายพันธุ์ยีสต์ เราไว้ EX85, EX85R, EX229, EX229 R1 และ Rod23-1B เพื่อการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 เกิดขึ้นและอิทธิพลต่อฟลอริด้าของกิจกรรมนักฆ่าในห้องปฏิบัติการที่สองการหมักไวน์ฐานภายใต้สภาวะความดันต่ำ (LPC)
ความดันต่ำสองหมักฐานไวน์ 2 ทำกับยีสต์ที่เลือกไว้ก่อนเดียว (กิจกรรมฆาตกรไม่ได้) หรือผสม ( กิจกรรมนักฆ่าคาดว่า) เชื้อ เงื่อนไขการทดลอง (pH 2.95 และ 12 C) เหล่านั้นตามปกติสำหรับอุตสาหกรรมการทำประกายไวน์ (2.8e3.3 ค่า pH และ 12e16 C) ยกเว้น Fi จะ RST 15 วันเมื่ออุณหภูมิเป็น 18e19 C เพื่อส่งเสริมกิจกรรมของนักฆ่ายีสต์ ทั้งหมดยีสต์เดี่ยวและผสมเสร็จสมบูรณ์ถูกต้องสองหมักน้อยกว่า 0.05 กรัม / ลิตรglucoseþfructoseหลังจาก 15 วัน ปริมาณของเซลล์ที่มีชีวิตเพิ่มขึ้นในช่วง Fi แรกวันชนะวัน fermen-tation และความก้าวหน้าที่ลดลงหลังจากนั้นมี Rod23-1B เป็นที่เร็วที่สุดที่จะสูญเสียชีวิตของเซลล์ จำนวนเงินที่ยุติธรรมของยีสต์ที่ทำงาน (102e105 CFU / มิลลิลิตร) ตรวจพบยังคงหลังจากเก้าเดือนของริ้วรอย (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ตรงกันข้ามกับกรณีของแรงดันสูงหมักสอง inwhich มักจะไม่ยีสต์ทำงานได้มีการตรวจพบเกินสามเดือนของการหมัก / ริ้วรอย ( Feuillat และ Charpentier 1982. มาร์ติเน Rodriguez, et al., 2002; Nunez et al, 2005) Dur ไอเอ็นจี RST Fi สามสิบวัน, สัดส่วนของเซลล์ที่ตายแล้วเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วในกิจกรรมนักฆ่าผสมกว่าในการหมักแหนมเดียวเชื้อ (รูป. 2A และ b) ที่เป็นที่คาดหวังว่าถ้ามีจริงๆภายใต้สิ่งแวดล้อมที่รุนแรง เงื่อนไข แท้จริงแล้วสัดส่วนของยีสต์นักฆ่าที่ทำงานได้เพิ่มขึ้นไปครองในขณะที่การหมักยีสต์นักฆ่าที่มีความไวลดลง ผลนักฆ่าที่เร็วที่สุดก็พบว่าสำหรับผู้ที่มีการผสมสายพันธุ์ EX229 Klus ฆ่าในขณะที่ผู้ที่มีการผสมสายพันธุ์ EX85 K2 ฆ่าแสดงให้เห็นผลกระทบที่ฆาตกรช้า (รูป. 2C และ D) ผลลัพธ์เหล่านี้มีไม่ปรองดองกันกับที่พบในการทดสอบแผ่นนักฆ่าที่นำเสนอโดยรวม EX229 กิจกรรมนักฆ่าที่ยากจนที่สุด (รูป. 1A และ B) ซึ่งอาจเป็นเพราะกระบวนการหมักที่สองเอานานกว่าการทดสอบแผ่นนักฆ่าที่ช่วยให้เกิดการสะสมของสารพิษ Klus ในไวน์ที่ดีกว่าการฆ่ายีสต์ที่มีความสำคัญ EX229 อย่างมีประสิทธิภาพ Fi EF ฆ่าสายพันธุ์ Rod23-1B K2N ฆ่า (รูป. 2D) ซึ่งเป็นสอดคล้องกับผลการทดสอบแผ่นนักฆ่าที่ pH 4 และ 20 C.Overall ปริมาณของ polysaccharides เพิ่มขึ้นตลอดการหมักครั้งที่สองจนถึงหกเดือนแล้ว ลดลงจนถึงจุดสิ้นสุดของกระบวนการที่เก้าเดือน ปริมาณของโปรตีนที่เพิ่มขึ้นมีความก้าวหน้าจากจุดเริ่มต้นถึงจุดสิ้นสุดของ Pro-Cess แม้จะมีพฤติกรรมที่แตกต่างนี้จำนวนของทั้งสองโพลีแซคคาและโปรตีนได้เสมออย่างมีนัยสำคัญมากขึ้นในฟีโนไทป์กับ Rod23-1B ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ (รูป. 1A) โดยทั่วไปเมื่อยีสต์สนามหญ้าขาดไวรัสนักฆ่าและ Corre-sponding ฟีโนไทป์นักฆ่ากิจกรรมนักฆ่าที่เพิ่มขึ้นโดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ 20 C (pH 3.2 หรือ 4) ยกเว้นในกรณีที่เป็นสายพันธุ์ EX229 Klus ซึ่งยังคงแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมนักฆ่าที่ต่ำมากหรือตรวจสอบไม่พบ K2 EX85 และ K2N Rod23-1B สายพันธุ์พบว่ามีแนวโน้มกิจกรรมนักฆ่าทั้งค่า pH ต่ำ (3.2) และอุณหภูมิต่ำ (12 C) แต่กิจกรรมนี้แทบจะกลายเป็น undetectable เมื่อสถานการณ์เหล่านี้มารวมกันคือที่ pH 3.2 และ 12 C (รูปที่ . 1B) ผลการเหล่านี้ไม่น่าแปลกใจว่าเงื่อนไขเหล่านี้จะไกล fromthose ถือว่าเหมาะสมที่สุดสำหรับกิจกรรม S. cerevisiae นักฆ่า (4e5.8 ค่า pH 25e30 C) (Gulbiniene et al, 2004;. Marquina, et al., 2002;. เปเรซ, et al 2001 . Rodríguez-Cousino et al, 2011) นอกจากนี้ยีสต์ Klus ได้รับการอธิบายว่ามีฆาตกรสเปกตรัมกว้าง แต่ความเข้มต่ำและฟีโนไทป์นักฆ่าช้า (Rodríguez-Cousino et al. 2011) การทดสอบแผ่นฆาตกรเอาวัน 4e8 ในการดำเนินการและสารพิษฆาตกรอาจต้องใช้เวลามากขึ้นเพื่อกระจายผ่านวุ้น medium.Based เกี่ยวกับผลของลักษณะเบื้องต้นของยีสต์สายพันธุ์ที่เราเลือกไว้ล่วงหน้า EX85, EX85R, EX229, EX229-R1 และ Rod23-1B สำหรับการวิเคราะห์ต่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . ที่เกิดขึ้นในfl uence ของนักฆ่าในกิจกรรมปฏิบัติการฐานที่สองการหมักไวน์ภายใต้สภาวะความดันต่ำ ( LPC )ความดันต่ำที่สองการหมักของฐาน wine-2 เสร็จแล้วก่อนเลือกยีสต์เดี่ยว ( ไม่มีนักฆ่ากิจกรรม ) หรือผสม ( นักฆ่ากิจกรรมคาด ) แต่ . เงื่อนไขการทดลอง ( pH 2.95 และ 12 C ) เป็นปกติสำหรับอุตสาหกรรมไวน์ทำให้ pH และ 2.8e3.3 12e16 C ) ยกเว้นจึงตัดสินใจเดินทาง 15 วันเมื่อมีอุณหภูมิ 18e19 C เพื่อส่งเสริมกิจกรรมฆ่ายีสต์ ยีสต์เดี่ยวและผสมทั้งหมดอย่างถูกต้องสมบูรณ์การหมักที่สองน้อยกว่า 0.05 กรัมต่อลิตรและกลูโคส ฟรุคโตสþหลังจาก 15 วัน จํานวนเซลล์เพิ่มขึ้นในช่วงสายจึงตัดสินใจเดินทางจึงได้ fermen tation วัน และค่อยๆ ลดลง หลังจากนั้น กับ rod23-1b เป็นเร็วที่สุดที่จะสูญเสียเซลล์ . ยุติธรรม ปริมาณของยีสต์ได้ 102e105 cfu / ml ) ยังตรวจพบหลังจากเก้าเดือนของอายุ ( ข้อมูลไม่แสดง ) , ตรงข้ามกับกรณีของแรงดันสูงที่สองการหมักยีสต์โดยมักจะไม่ได้ตรวจพบเกินกว่าสามเดือนของอายุและการหมัก / ( feuillat charpentier , 1982 ; มาร์ติเนซ โรดริเกซ et al . , 2002 ; n úเนซ et al . , 2005 ) ช่วงไอเอ็นจีจึงตัดสินใจเดินทางไป 30 วัน ทำให้เซลล์ตายเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วในการผสมมากกว่าเชื้อเดี่ยว fermentations ( รูปที่ 2A และ b ) ดังที่ได้ถ้ามีจริงๆคือนักฆ่ากิจกรรมภายใต้สภาพแวดล้อมเหล่านี้มาก . แน่นอน สัดส่วนของนักฆ่ายีสต์ได้เพิ่มขึ้นไปครอง ในขณะที่นักฆ่าที่มีการหมักยีสต์ลดลง ผลนักฆ่าที่เร็วที่สุดพบผู้ที่มีความเครียด klus ผสม ex229 นักฆ่า ในขณะที่ผู้ที่มีความเครียดผสม ex85 K2 นักฆ่านักฆ่าได้ผลช้า ( รูปที่ 2C D ) ผลลัพธ์เหล่านี้จะไม่ปรองดองกันกับที่พบในจานที่ ex229 เสนอวิธีฆ่าโดยนักฆ่าที่กิจกรรม ( รูปที่ 1A และ B ) ซึ่งอาจเป็นเพราะกระบวนการหมักที่สองใช้เวลานานกว่านักฆ่าจานโดยให้มีการสะสมของสารพิษใน klus ไวน์ดีกว่าฆ่ายีสต์อ่อนไหว ex229 EF จึง ciently ฆ่า rod23-1b k2n นักฆ่าสายพันธุ์ ( รูปที่ 2 ) ซึ่งสอดคล้องกันกับผลการทดสอบแผ่นนักฆ่าที่ pH 4 และ 20 C . โดยรวม , ปริมาณพอลิแซกคาไรด์ที่เพิ่มขึ้นตลอดการหมักครั้งที่สองถึงหกเดือน และลดลงจนสิ้นสุดกระบวนการในเก้าเดือน ปริมาณของโปรตีนเพิ่มขึ้นทุกที จากจุดเริ่มต้นไปยังจุดสิ้นสุดของโปรเซส . แม้จะมีพฤติกรรมที่แตกต่างกันนี้ ปริมาณของพอลิโพลีแซคคาร์ไรด์และโปรตีนก็ signi จึงลดลงอย่างมีนัยสําคัญเมื่อมากขึ้นในการต่อต้าน rod23-1b ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ ( รูปที่ 1A ) โดยทั่วไปเมื่อสนามหญ้ายีสต์ขาดนักฆ่าไวรัสและการโทรศัพท์ sponding นักฆ่า , นักฆ่าที่กิจกรรมที่เพิ่มขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่ 20 C ( pH 3.2 หรือ 4 ) ข้อยกเว้นคือ klus เมื่อย ex229 ซึ่งยังคงมีต่ำมากหรือกิจกรรมนักฆ่าอม . ex85 K2 และพบกิจกรรม k2n rod23-1b สายพันธุ์นักฆ่าสัญญาที่ทั้งต่ำ ( pH 3.2 ) และอุณหภูมิต่ำ ( 12 องศาเซลเซียส แต่กิจกรรมนี้ก็เกือบได้เมื่อสถานการณ์เหล่านี้รวมกัน ได้แก่ พีเอช 3.2 และ 12 C ( รูปที่ 1A ) ผลลัพธ์เหล่านี้ไม่น่าแปลกใจที่ได้รับเงื่อนไขเหล่านี้จะ fromthose ไกลถือว่าเหมาะสมสำหรับ S . cerevisiae นักฆ่ากิจกรรม ( pH 4e5.8 25e30 , C ) ( gulbiniene et al . , 2004 ; marquina et al . , 2002 ; เปเรซ et al . , 2001 ; ลุยส์โรดรีเกซ มาร์ติน cousino et al . , 2011 ) นอกจากนี้ klus ยีสต์ได้ถูกอธิบายว่ามีสเปกตรัมกว้างและนักฆ่า แต่ความเข้มต่ำการฆ่าช้า ( ลุยส์โรดรีเกซ มาร์ติน cousino et al . , 2011 ) นักฆ่าจาน ( เอา 4e8 วันแสดง และนักฆ่าสารพิษอาจต้องใช้เวลา เพื่อกระจายผ่านสื่อต่างๆ ตามผลการศึกษานี้เบื้องต้นของยีสต์สายพันธุ์ที่เราเลือก ex85 ex85r ex229 ก่อน , , , ex229-r1 และ rod23-1b สำหรับการวิเคราะห์ต่อไป