2 Materials and methods2.1 Rearing

2 Materials and methods
2.1 Rearing of WFT
WFT were reared in ventilated plastic containers (29 cm × 29 cm × 16 cm) kept in a controlled temperature room set at 24 ± 2 °C, 50–60% RH and 16L:8D h photoperiod. Between 40 and 50 adult WFT were introduced into the containers and provided 3–4 pieces (8–9 cm length) of green bean (Phaseolus vulgaris L.) and 2–3 yellow chrysanthemum flowers. After three days, the egg infested beans were transferred to fresh ventilated plastic containers (28 cm × 20 cm × 10 cm). First instar larvae usually started to hatch 2 days later. Three days post-eclosion second instar larvae (L2) were collected for experimental use.

2.2 Fungal strain and maintenance
Metarhizium anisopliae strain V275 was used in this study, details of its selection, and steps to maintain its virulence are described in Shah et al. (2005). M. anisopliae strain V275, isolated from Codling Moth, Cydia pomonella L. (Lepidoptera: Tortricidae), was passed through mealworm, Tenebrio molitor L. (Coleoptera: Tenebrionidae) larva and isolated on Oatmeal dodine agar. Single spore colonies were transferred to Sabouraud Dextrose Agar (SDA) and culture incubated at 25 °C for 15 days in the dark, conidia obtained from 1st subculture were used for mass production of inoculum.

2.3 Production of conidia
Aerial conidia of M. anisopliae V275 was produced on broken Basmati rice (Jenkins et al., 1998) with slight modifications. The harvested conidia were air dried and 0.1 g suspended in 100 ml of 0.05% (v/v) aqueous Tween 80 and the number determined using a hemocytometer. The viability of the conidia was determined by the plate count technique on SDA (Goettel and Inglis, 1997) and always exceeded 98%.

2.4 Efficacy studies
Assays were done using 250 ml white opaque plastic pots (8 cm dia.) obtained from Tesco, UK. A 3 cm dia. hole was made into the centre of the lid to allow ventilation into the pot. To prevent thrips from escaping, thrips-proof nylon gauze (64 μm pore size) was glued onto the hole. A 5 cm × 4 cm yellow/blue sticky trap (AgriSense, UK) was attached to the inner part of the lid to trap emergent adults WFT. The efficacy of M. anisopliae V275 was determined in five different types of growing media kindly provided by Bord na Mona, Ireland. These included peat, coir, bark and peat blended with 10% and 20% composted green waste (CGW).

The following treatments were tested: M. anisopliae V275 was applied as a drench or premixed such that the final concentration was 1 × 1010 conidia/l of growing media. The chemical insecticides Provado® (Bayer a.i. 5% w/w imidacloprid) and Vi-Nil® (Certis, a.i. 1% fipronil) were applied as drench or premixed at the full concentration (FC) (65 ml and 1 g/l growing media) and pre-determined sublethal doses (SLD). A preliminary study showed that imidacloprid and fipronil SLD corresponded to 1% and 10% of the FC. Sublethal dose of insecticides were applied alone or combined with M. anisopliae V275. Control treatments were treated with water or 0.05% (v/v) Aqueous Tween 80. Preliminary study shows that there were no differences in WFT emergence in both control treatments so we included only one control (water) for data analysis.

For the drench application, 1 × 1010 conidia/l of growing media was diluted in 160 ml of Tween 80 and 20 ml of the homogeneous spore suspension was uniformly poured over the surface of the growing medium (125 ml volume per pot) and additional water was added to ensure the medium was at field capacity. For premixed applications, dried conidia were uniformly mixed into the growing media and water added so the compost reached field capacity. Similar adjustments were made for the chemical treatments. The final moisture levels of the growing media were ca. 45% (peat), 35% (coir), 25% (bark), 35% (10% CGW-peat blend) and 32% (20% CGW-peat blend).

Each pot was inoculated with 20 L2 WFT to a small piece of bean (2 cm length provided as a source of food) placed on the top of the growing media with the help of fine camel hair brush. The experiments were conducted in a controlled temperature (24 ± 2 °C, 50–60% RH and 16L:8LD photoperiods). Four days after the introduction of the L2, adult WFT started to emerge. These adhered to the sticky traps or were found on top of the growing media or the side of pot. Adult emergence was monitored using a binocular microscope over a 7 day period until no more WFT were observed. Adults trapped on sticky cards were incubated in Petri dishes lined with moist filter paper and examined under a binocular microscope to see if they were infected with M. anisopliae. The surviving adults were placed on the sticky traps and monitored for mycoses as described above. Both the number of mycosed cadavers and healthy adults were recorded. Each treatment consisted of five replicates (20 L2/replicate) and the whole experiment repeated 7 days after the first assay using another batch of the laboratory colony. There were no significant differences between r

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2 วัสดุและวิธีการ2.1 การเลี้ยง WFTWFT ถูกเลี้ยงในอากาศบรรจุภัณฑ์พลาสติก (29 ซม. × 29 ซม.× 16 ซม.) เก็บไว้ในห้องควบคุมอุณหภูมิ 24 ± 2 ° C, 50 – 60% RH และช่วงแสง 16 L: 8D h ระหว่าง 40 และ 50 ผู้ใหญ่ WFT ถูกนำมาใช้เป็นภาชนะบรรจุและให้ 3-4 ชิ้น (ความยาว 8-9 ซม) ถั่วเขียว (ถั่วผด L.) และ 2 – 3 ดอกเบญจมาศสีเหลือง หลังจากสามวัน ถั่วไข่รบกวนถูกโอนย้ายไปภาชนะพลาสติกระบายอากาศสด (28 ซม. × 20 ซม.× 10 ซม.) ครั้งแรก instar อ่อนมักจะเริ่มฟักภายหลัง 2 วัน สามวันหลัง eclosion สอง (L2) ตัวอ่อน instar ถูกรวบรวมสำหรับการทดลองใช้2.2 เชื้อราสายพันธุ์และการบำรุงรักษาMetarhizium anisopliae พันธุ์ V275 ใช้ในการศึกษานี้ มีรายละเอียดของตัวเลือก และขั้นตอนการรักษาความรุนแรงของอธิบายในชาห์ et al. (2005) สายพันธุ์ M. anisopliae V275 แยกจาก Codling Moth, Cydia pomonella L. (ผีเสื้อ: Tortricidae), ส่งผ่านผ่านหนอนนก โมลิเตอร์ Tenebrio L. (Coleoptera: Tenebrionidae) ตัวอ่อน และแยกบนอาหารเลี้ยงเชื้อ dodine ข้าวโอ๊ต อาณานิคมเดียวสปอร์ถูกโอนไป Sabouraud เดกซ์โทรสวุ้น (SDA) และวัฒนธรรมที่ได้รับการกกที่ 25 ° C 15 วันใน conidia มืด ที่ได้รับมาจากวัฒนธรรมย่อย 1 ใช้สำหรับการผลิตมวลของ inoculum2.3 ผลิต conidiaConidia ทางอากาศของ M. anisopliae V275 เขาผลิตข้าวหัก (เจงกินส์ et al. 1998) การแก้ไขเล็กน้อย Conidia หวงถูกอากาศแห้ง และ 0.1 กรัมถูกระงับใน 100 มิลลิลิตรของ 0.05% (v/v) ละลายโลก 80 และหมายเลขที่ใช้เป็น hemocytometer Viability ของ conidia ที่กำหนด โดยเทคนิคการนับแผ่นใน SDA (Goettel และ Inglis, 1997) และมักจะเกิน 98%2.4 การศึกษาประสิทธิภาพทำ assays ใช้กระถางพลาสติกทึบแสงสีขาว 250 มล. (8 ซม.เส้นผ่าศูนย์กลาง) ได้รับจากเทสโก้ สหราชอาณาจักร รูเส้นผ่าศูนย์กลาง 3 ซม.ทำเป็นศูนย์กลางของฝาให้ระบายลงในหม้อ การป้องกันเพลี้ยไฟหนี ตาข่ายไนล่อนป้องกันเพลี้ยไฟ (64 μ m ขนาดของรูพรุน) ติดกาวลงบนหลุม 5 ซม. × 4 ซม.สีเหลือง/น้ำเงินเหนียวกับดัก (AgriSense, UK) ได้แนบกับส่วนด้านในของฝากับดักผู้ใหญ่ฉุกเฉิน WFT ประสิทธิภาพของ M. anisopliae V275 กำหนดในห้าสื่อชนิดต่าง ๆ เติบโตกรุณาโดย Bord นาโมนา ไอร์แลนด์ เหล่านี้รวมพรุ ใยมะพร้าว เปลือก และพรุผสมกับ 10% และ 20% หมักขยะสีเขียว (CGW)ทดสอบการรักษาต่อไปนี้: M. anisopliae V275 ถูกนำไปใช้เป็นแบบเปียกโชก หรือหยดเช่นที่ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1 × 1010 conidia/l ของการเพาะปลูก ยาฆ่าแมลงเคมี Provado® (ไบเออร์จักร 5% w/w imidacloprid) และ Vi-Nil® (Certis, fipronil 1% จักร) ถูกนำไปใช้เป็นเปียกโชก หรือหยดที่เข้มข้นเต็มที่ (FC) (65 มล.และ 1 g/l สื่อการเติบโต) และกำหนดปริมาณ sublethal (SLD) การศึกษาเบื้องต้นพบว่า imidacloprid และ fipronil SLD corresponded ให้ 1% และ 10% ของ FC Sublethal ปริมาณของยาฆ่าแมลงถูกใช้คนเดียว หรือรวมกับ M. anisopliae V275 รักษาควบคุมได้รับการรักษา ด้วยน้ำหรือ 0.05% (v/v) แต่ละลาย 80 การศึกษาเบื้องต้นแสดงว่า มีไม่มีความแตกต่างใน WFT เกิดขึ้นในการรักษาทั้งสองควบคุมดังนั้นเรารวมตัวควบคุมเดียวเท่านั้น (น้ำ) สำหรับการวิเคราะห์ข้อมูลสำหรับโปรแกรมที่เปียกโชก 1 × 1010 conidia/l ของการเพาะปลูกถูกเจือจางในโลก 80 160 มล. และ 20 ml ของสปอร์เหมือนกันกระเทือนถูกเทอย่างสม่ำเสมอบนพื้นผิวของสื่อเพิ่มขึ้น (ปริมาณ 125 มล.ต่อหม้อ) และน้ำเพิ่มเติมถูกเพิ่มเพื่อให้แน่ใจว่า สื่อคือเวลาฟิลด์กำลังการผลิต สำหรับหยด conidia แห้งถูกผสมอย่างสม่ำเสมอในสื่อและน้ำเพิ่มเพื่อให้การหมักถึงฟิลด์กำลังการผลิตเติบโต คล้ายมีปรับสำหรับเคมีบำบัด ระดับความชื้นสุดท้ายของสื่อเติบโตได้ ca. 45% (พรุ), 35% (ใยมะพร้าว), 25% (เปลือก), 35% (10% ผสมพรุ CGW) และ 32% (20% ผสมพรุ CGW)Each pot was inoculated with 20 L2 WFT to a small piece of bean (2 cm length provided as a source of food) placed on the top of the growing media with the help of fine camel hair brush. The experiments were conducted in a controlled temperature (24 ± 2 °C, 50–60% RH and 16L:8LD photoperiods). Four days after the introduction of the L2, adult WFT started to emerge. These adhered to the sticky traps or were found on top of the growing media or the side of pot. Adult emergence was monitored using a binocular microscope over a 7 day period until no more WFT were observed. Adults trapped on sticky cards were incubated in Petri dishes lined with moist filter paper and examined under a binocular microscope to see if they were infected with M. anisopliae. The surviving adults were placed on the sticky traps and monitored for mycoses as described above. Both the number of mycosed cadavers and healthy adults were recorded. Each treatment consisted of five replicates (20 L2/replicate) and the whole experiment repeated 7 days after the first assay using another batch of the laboratory colony. There were no significant differences between r

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2 วัสดุและวิธีการ
2.1 การอบรมเลี้ยงดูของ WFT
WFT ถูกเลี้ยงในภาชนะพลาสติกที่มีการระบายอากาศ (29 ซม. × 29 ซม. × 16 ซม.) เก็บไว้ในอุณหภูมิห้องที่ควบคุมไว้ที่ 24 ± 2 องศาเซลเซียส 50-60% RH และ 16L: 8 ชั่วโมงต่อช่วงแสง . ระหว่าง 40 และ 50 สำหรับผู้ใหญ่ WFT ถูกนำมาใส่ในภาชนะและให้ 3-4 ชิ้น (8-9 ซม. ยาว) ของถั่วเขียว (ถั่วแขก L. ) และ 2-3 ดอกเบญจมาศสีเหลือง สามวันหลังจากที่ไข่ถั่วเหม็นถูกโอนไปยังภาชนะพลาสติกสดระบายอากาศ (28 ซม. × 20 ซม. x 10 ซม.) ตัวอ่อนวัยแรกมักจะเริ่มต้นที่จะฟัก 2 วันต่อมา สามวันหลัง eclosion วัยสองตัวอ่อน (L2) ที่ถูกเก็บรวบรวมสำหรับการใช้งานทดลอง. 2.2 เชื้อราสายพันธุ์และการบำรุงรักษาMetarhizium anisopliae ความเครียด V275 ถูกใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีรายละเอียดของการเลือกของตนและขั้นตอนในการรักษาความรุนแรงจะมีการอธิบายไว้ในอิหร่าน, et al (2005) M. anisopliae V275 สายพันธุ์ที่แยกได้จาก Codling ผีเสื้อ Cydia pomonella ลิตร (Lepidoptera: Tortricidae) ได้ผ่าน mealworm, Tenebrio Molitor ลิตร (Coleoptera: Tenebrionidae) ตัวอ่อนและ isolated บนข้าวโอ๊ต dodine วุ้น อาณานิคมของสปอร์เดี่ยวถูกย้ายไป Sabouraud Dextrose Agar (SDA) และวัฒนธรรมบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 วันในที่มืดสปอร์ที่ได้รับจากวัฒนธรรมที่ 1 ถูกนำมาใช้สำหรับการผลิตมวลของเชื้อ. 2.3 การผลิตสปอร์สปอร์อากาศ M. anisopliae V275 ถูกผลิตในเสียข้าวบาสมาติก (เจนกินส์ et al., 1998) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย conidia เก็บเกี่ยวถูกอากาศแห้งและ 0.1 กรัมระงับใน 100 มล. 0.05% (v / v) Tween น้ำ 80 และจำนวนที่กำหนดโดยใช้ hemocytometer ความมีชีวิตของสปอร์ที่ถูกกำหนดโดยเทคนิคจำนวนจุลินทรีย์ใน SDA (Goettel และ Inglis, 1997) และมักจะเกิน 98%. 2.4 ประสิทธิภาพการศึกษาตรวจได้กระทำโดยใช้ 250 มล. สีขาวกระถางพลาสติกทึบแสง (8 ซม. Dia.) ที่ได้รับจากเทสโก้ สหราชอาณาจักร 3 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลาง หลุมก็กลายเป็นศูนย์กลางของฝาเพื่อให้การระบายอากาศลงไปในหม้อ เพื่อป้องกันไม่ให้เพลี้ยไฟหนีออกมาจากเพลี้ยไฟหลักฐานไนลอนผ้ากอซ (64 ไมครอนขนาดรูขุมขน) ได้รับการติดกาวลงบนหลุม 5 ซม. × 4 ซม. สีเหลือง / น้ำเงินดักเหนียว (AgriSense สหราชอาณาจักร) ติดอยู่กับส่วนด้านในของฝาผู้ใหญ่ดักฉุกเฉิน WFT ประสิทธิภาพของ M. anisopliae V275 ถูกกำหนดในห้าชนิดที่แตกต่างกันของสื่อการเจริญเติบโตให้ความกรุณาโดยบอร์ดนาโมนา, ไอซ์แลนด์ เหล่านี้รวมถึงพีท, มะพร้าว, เปลือกไม้และพีทผสมกับ 10% และ 20% หมักขยะสีเขียว (CGW.) ทรีทเม้นดังต่อไปนี้ได้รับการทดสอบ: M. anisopliae V275 ถูกนำไปใช้เป็นแช่หรือผสมดังกล่าวที่ความเข้มข้นสุดท้ายเป็น 1 × 1010 สปอร์ / L ของสื่อการเจริญเติบโต ยาฆ่าแมลงสารเคมีProvado® (ไบเออร์ ai 5% w / W imidacloprid) และ VI-Nil® (Certis, ai 1% fipronil) ถูกนำมาใช้เป็นที่แชหรือผสมที่ความเข้มข้นเต็มรูปแบบ (FC) (65 มล. และ 1 g / l การเจริญเติบโต สื่อ) และก่อนกำหนดปริมาณ sublethal (SLD) การศึกษาเบื้องต้นพบว่า imidacloprid และ fipronil SLD ตรงกับ 1% และ 10% ของเอฟซี ยาเฉียบพลันยาฆ่าแมลงที่ถูกนำไปใช้อย่างเดียวหรือรวมกับ M. anisopliae V275 การรักษาควบคุมได้รับการรักษาด้วยน้ำหรือ 0.05% (v / v) น้ำ Tween 80. การศึกษาเบื้องต้นแสดงให้เห็นว่ามีความแตกต่างในการ WFT เกิดขึ้นทั้งในการรักษาควบคุมดังนั้นเราจึงรวมเฉพาะควบคุม (น้ำ) สำหรับการวิเคราะห์ข้อมูล. สำหรับการประยุกต์ใช้แช่ 1 × 1010 สปอร์ / L ของสื่อการเติบโตถูกเจือจางใน 160 มิลลิลิตร Tween 80 และ 20 มล. ของสปอร์แขวนลอยเป็นเนื้อเดียวกันเทเหมือนกันกว่าพื้นผิวของสื่อที่เติบโต (125 มล. ปริมาณต่อหม้อ) และน้ำเพิ่มเติมถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้แน่ใจว่า ขนาดกลางอยู่ที่ความจุของสนาม สำหรับการใช้งานผสม, สปอร์แห้งผสมสม่ำเสมอลงในวัสดุปลูกและน้ำเพิ่มเพื่อความจุสนามปุ๋ยหมักถึง การปรับเปลี่ยนที่คล้ายกันถูกสร้างขึ้นมาสำหรับการรักษาทางเคมี ระดับความชื้นสุดท้ายของวัสดุปลูกอยู่แคลิฟอร์เนีย 45% (พีท) 35% (มะพร้าว) 25% (เปลือก) 35% (10% CGW พรุผสมผสาน) และ 32% (20% CGW พรุผสมผสาน). แต่ละหม้อได้รับเชื้อด้วย 20 L2 WFT ไป ชิ้นเล็ก ๆ ของถั่ว (ความยาว 2 ซม. ให้เป็นแหล่งที่มาของอาหาร) ที่วางอยู่ด้านบนของสื่อที่เติบโตด้วยความช่วยเหลือของแปรงขนอูฐดี การทดลองดำเนินการในการควบคุมอุณหภูมิ (24 ± 2 องศาเซลเซียส 50-60% RH และ 16L: photoperiods 8LD) สี่วันหลังจากการแนะนำของ L2 ที่ผู้ใหญ่ WFT เริ่มปรากฏ เหล่านี้ยึดติดกับดักกาวเหนียวหรือถูกพบอยู่ด้านบนของสื่อการเจริญเติบโตหรือด้านข้างของหม้อ การเกิดขึ้นเป็นผู้ใหญ่ตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์สองตาเป็นระยะเวลากว่า 7 วันจนกว่าถูกตั้งข้อสังเกตไม่มาก WFT ผู้ใหญ่ที่ติดอยู่บนบัตรเหนียวถูกบ่มในจานเลี้ยงเชื้อเรียงรายไปด้วยกระดาษกรองชื้นและตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์สองตาเพื่อดูว่ามีการติดเชื้อ M. anisopliae ผู้ใหญ่ที่ยังมีชีวิตรอดอยู่ในกับดักกาวเหนียวและตรวจสอบสำหรับ mycoses ตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ทั้งจำนวนศพ mycosed และผู้ใหญ่ที่มีสุขภาพที่ถูกบันทึกไว้ การรักษาแต่ละครั้งประกอบด้วยห้าซ้ำ (20 L2 / ซ้ำ) และการทดสอบทั้งซ้ำแล้วซ้ำอีก 7 วันหลังจากการทดสอบครั้งแรกที่ใช้ชุดของอาณานิคมห้องปฏิบัติการอื่น ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่าง R

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 วัสดุและวิธีการ2.1 ศึกษา wftwft ถูกเลี้ยงในภาชนะพลาสติกโปร่ง ( 29 cm × 29 cm × 16 ซม. ) เก็บไว้ในการควบคุมอุณหภูมิห้องชุดที่ 24 ± 2 ° C , 50 - 60 เปอร์เซ็นต์ และช่วงแสง 16L : 8D H . ระหว่าง 40 และ 50 wft ผู้ใหญ่แนะนำลงในคอนเทนเนอร์ และให้ 3 – 4 ชิ้น ( 8 – 9 ความยาวเซนติเมตร ) ของถั่วเขียว ( phaseolus vulgaris L . ) และ 2 – 3 ดอกเบญจมาศสีเหลือง หลังจาก 3 วัน ไข่เหม็นถั่วถูกย้ายสดโปร่ง พลาสติกคอนเทนเนอร์ ( 28 cm × 20 cm × 10 ซม. ) ตัวอ่อนวัยแรกจะเริ่มฟักเป็นตัวในอีก 2 วัน สามวันหลังตันสองหนอน ( L2 ) ครั้งนี้ เพื่อใช้ทดลอง2.2 เชื้อราสายพันธุ์และการบํารุงรักษาเชื้อรา Metarhizium anisopliae สายพันธุ์ v275 ถูกใช้ในการศึกษารายละเอียดของการเลือก และขั้นตอนการรักษาของโรคจะอธิบายใน Shah et al . ( 2005 ) M . anisopliae สายพันธุ์ v275 , แยกจากคอดมอด , Cydia pomonella ลิตร ( Lepidoptera : Tortricidae ) คือผ่านวัสดุ tenebrio โมลิเตอร์ , L . ( Coleoptera : เทนีบริโอนิดี้ ) และแยกในข้าวโอ๊ตและจดหมายข่าวอิเล็กทรอนิกส์วุ้น อาณานิคมสปอร์เดี่ยวโอนให้ sabouraud dextrose agar ( SDA ) และวัฒนธรรมที่อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 15 วัน ในที่มืด , conidia ได้มาจาก 1 เปอร์เซ็นต์ถูกใช้สำหรับการผลิตมวลของเชื้อ .2.3 การผลิตของโคนิเดียภาพถ่ายทางอากาศของ M . anisopliae v275 นี้ถูกผลิตบนหักข้าวบาสมาติก ( เจนกินส์ et al . , 1998 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย เก็บเกี่ยวชนิดแห้ง 0.1 g ระงับ 100 มิลลิลิตร 0.05 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) สารละลาย Tween 80 และตัวเลขกำหนดใช้ hemocytometer . ชีวิตของโคนิเดียถูกกำหนดโดยจานนับ ( goettel SDA และเทคนิคใน Inglis , 1997 ) และมักจะเกิน 98%2.4 ประสิทธิภาพการศึกษาวิธีทำใช้ 250 ml . กระถางพลาสติกสีขาวขุ่น ( 8 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลาง ) ได้มาจากเทสโก้ สหราชอาณาจักร ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 3 ซม. หลุมผลิตในศูนย์ของฝาเพื่อให้ระบายลงในหม้อ ป้องกันเพลี้ยไฟหนีเพลี้ยไฟพิสูจน์ไนลอนตาข่าย ( 64 μ M ขนาดรูพรุน ) คือติดกาวลงบนหลุม 5 cm × 4 เซนติเมตร สีเหลือง / สีฟ้าเหนียวกับดัก ( agrisense , UK ) แนบกับด้านในของฝากับดักอารมณ์ผู้ใหญ่ wft . ประสิทธิภาพของเชื้อรา v275 เมตรถูกกำหนดในห้าประเภทที่แตกต่างกันของการใช้กรุณาให้บอร์ดนาโมนาไอร์แลนด์ ได้แก่ พีท , มะพร้าว , เปลือกและ พีทผสม 10% และ 20% หมักขยะสีเขียว ( cgw )การรักษาต่อไปนี้ : M . anisopliae v275 นำมาประยุกต์เป็นแช่หรือผสมที่ความเข้มข้นสุดท้ายคือ 1 × 1010 conidia / L ของการสื่อ สารเคมีกำจัดแมลง provado ( ไบเออร์®สมองกล 5% w / w Imidacloprid ) และไวนิล® ( certis สมองกล 1% , ฟิโปรนิล ) แบบแช่หรือผสมที่เข้มข้นเต็ม ( FC ) ( 65 กรัมและ 1 กรัมต่อลิตรและปริมาณการเติบโตของสื่อ ) ก่อนกำหนด ( SLD ) การศึกษาเบื้องต้นพบว่าและเพื่อกำจัดของ ฟิโปรนิล 1 % และ 10 % ของ FC ปริมาณพิษยาฆ่าแมลงที่ใช้คนเดียวหรือรวมกับ M . anisopliae v275 . การรักษาควบคุมได้รับการรักษาด้วยน้ำ หรือ 0.05 % ( v / v ) สารละลาย Tween 80 การศึกษาเบื้องต้น พบว่า ไม่มีความแตกต่างในการรักษา wft ทั้งในการควบคุมเพื่อให้เรารวมการควบคุมเพียงหนึ่ง ( น้ำ ) ในการวิเคราะห์ข้อมูลใช้สำหรับแช่ 1 × 1010 conidia / L ของวัสดุปลูกที่เจือจางใน 160 มิลลิลิตรของ Tween 80 และ 20 ml ของสารแขวนลอยสปอร์เป็นเนื้อเดียวกันได้โดยเทผ่านพื้นผิวของการเจริญเติบโตปานกลาง ( ปริมาณ 125 ml ต่อหม้อ ) และน้ำที่เพิ่มเติมเข้ามา เพื่อให้แน่ใจว่าอาหารที่ความจุสนาม สำหรับการใช้งานพื้นฐานชนิดแห้ง , ผสมลงในวัสดุปลูก และโดยการเพิ่มน้ำเพื่อให้ปุ๋ยหมักถึงความจุสนาม การปรับที่เหมือนกันคือทำให้สารเคมี สุดท้ายระดับความชื้นของวัสดุปลูกได้ประมาณ 45 % ( peat ) 35% ( มะพร้าว ) , 25 % ( เห่า ) , 35 % ( 10 % cgw พีทผสม ) และ 32% ( 20% cgw พีทกลืน )แต่ละกระถาง เป็นเชื้อที่มี 20 L2 wft เพื่อชิ้นเล็ก ๆของถั่ว ( ความยาว 2 เซนติเมตร จัดเป็นแหล่งของอาหารที่วางอยู่บนด้านบนของวัสดุปลูกด้วยความช่วยเหลือของแปรงขนอูฐดี การทดลองในแบบควบคุมอุณหภูมิ ( 24 ± 2 ° C , 50 - 60 เปอร์เซ็นต์ และ 16L : 8ld photoperiods ) 4 วัน หลังจากการแนะนำของ L2 , ผู้ใหญ่ wft เริ่มที่จะโผล่ออกมา เหล่านี้ที่ติดกับกับดักกาวเหนียว หรือ ถูกพบบนวัสดุปลูกหรือด้านข้างของหม้อ การตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์กล้องส่องทางไกลเป็นผู้ใหญ่กว่า 7 วัน wft ระยะเวลาจนกว่าจะไม่พบ . ผู้ใหญ่ติดบนบัตรเหนียวถูกเลี้ยงในจานเลี้ยงเชื้อที่เรียงรายไปด้วยกระดาษ กรองความชื้น และตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์กล้องส่องทางไกลเพื่อดูว่าพวกเขามีการติดเชื้อ M . anisopliae . หญิงผู้ใหญ่อยู่ในกับดักกาวเหนียว และการตรวจสอบไมโคซิสตามที่อธิบายไว้ข้างต้น จำนวน mycosed ศพและผู้ใหญ่สุขภาพดีที่ถูกบันทึกไว้ . การรักษาแต่ละประกอบด้วยห้านาที ( 20 L2 / ทำซ้ำ ) และการทดลองซ้ำ ทั้ง 7 วันแรกหลังการใช้ชุดอื่นของห้องปฏิบัติการในอาณานิคม มี differenc ไม่แตกต่างกัน