Canthaxanthin is a natural diketo d

Canthaxanthin is a natural diketo derivative of β-carotene primarily used by the food and feed industries. Mucor circinelloides is a β-carotene-accumulating zygomycete fungus and one of the model organisms to study the carotenoid biosynthesis in fungi. In this study, the β-carotene ketolase gene (crtW) of the marine bacterium Paracoccus sp. N81106 fused with fungal promoter and terminator regions was integrated into the M. circinelloides genome to construct stable canthaxanthin-producing strains. Different transformation methods including polyethylene glycol-mediated transformation with linear DNA fragments, restriction enzyme-mediated integration and Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation were tested to integrate the crtW gene into the Mucor genome. Mitotic stability, site of integration and copy number of the transferred genes were analysed in the transformants, and several stable strains containing the crtW gene in high copy number were isolated. Carotenoid composition of selected transformants and effect of culturing conditions, such as temperature, carbon sources and application of certain additives in the culturing media, on their carotenoid content were analysed. Canthaxanthin-producing transformants were able to survive at higher growth temperature than the untransformed strain, maybe due to the effect of canthaxanthin on the membrane fluidity and integrity. With the application of glucose, trehalose, dihydroxyacetone and l-aspartic acid as sole carbon sources in minimal medium, the crtW-expressing M. circinelloides strain, MS12+pCA8lf/1, produced more than 200 μg/g (dry mass) of canthaxanthin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Canthaxanthin จะเป็นอนุพันธ์ธรรมชาติ diketo β-แคโรทีนใช้ โดยอาหาร และอุตสาหกรรมอาหาร Mucor circinelloides เป็น zygomycete ที่βแคโรทีนสะสมเชื้อราและสิ่งมีชีวิตรูปแบบการศึกษาชีวสังเคราะห์แคในเชื้อราอย่างใดอย่างหนึ่ง ในการศึกษานี้ ketolase ยีนβ-แคโรทีน (crtW) ของแบคทีเรียทะเล Paracoccus เอสพี N81106 ผสมผสานกับเชื้อราโปรโมเตอร์และกำหนดภูมิภาครวมเข้ากับพันธุ circinelloides M. สร้างสายพันธุ์ผลิต canthaxanthin เสถียร วิธีการแปลงที่แตกต่างกันรวมทั้งมีเอทิลีนไกลคอลแปลงกับชิ้นส่วนดีเอ็นเอเส้น มีเอนไซม์จำกัดและการแปลงมี tumefaciens อโกรแบคทีเรียมถูกทดสอบรวมยีน crtW เข้าพันธุ Mucor Mitotic เสถียรภาพ รวมและจำนวนสำเนาการถ่ายโอนยีนที่ถูกวิเคราะห์ในการ transformants และหลายสายพันธุ์มีความเสถียรที่ประกอบด้วยยีน crtW ในจำนวนสำเนาสูงก็แยก ส่วนผสมแค transformants เลือกและผลของเงื่อนไข อุณหภูมิ แหล่งคาร์บอน และแอพลิเคชันของสารบางอย่างในสื่อ culturing เนื้อหาของแค culturing ถูกนำมาวิเคราะห์ ผลิต Canthaxanthin transformants ก็สามารถที่จะอยู่รอดในอุณหภูมิเติบโตสูงกว่าสายพันธุ์ untransformed อาจเนื่องจากผลของ canthaxanthin ไหลเยื่อและความซื่อสัตย์ ด้วยการประยุกต์กรดน้ำตาลกลูโคส trehalose, dihydroxyacetone และแอสพารา กิน l เป็นแหล่งคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียวในกลางน้อยที่สุด crtW ถ่ายทอดสายพันธุ์ circinelloides M., MS12 + pCA8lf/1 ผลิตมากกว่า 200 ไมโครกรัม/กรัม (น้ำหนักแห้ง) ของ canthaxanthin

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Canthaxanthin เป็นอนุพันธ์ diketo ตามธรรมชาติของβแคโรทีนในเบื้องต้นโดยใช้อาหารและอาหารสัตว์อุตสาหกรรม Mucor circinelloides เป็นβ-แคโรทีนสะสมเชื้อรา zygomycete และเป็นหนึ่งในรูปแบบของสิ่งมีชีวิตเพื่อศึกษาการสังเคราะห์ carotenoid ในเชื้อรา ในการศึกษานี้ยีนβแคโรทีน ketolase (crtW) ของแบคทีเรียทะเล Paracoccus SP N81106 ผสมกับเชื้อราโปรโมเตอร์และ Terminator ภูมิภาคถูกรวมอยู่ในเอ็ม circinelloides จีโนมที่จะสร้างเสถียรภาพสายพันธุ์ canthaxanthin ผลิต วิธีการเปลี่ยนแปลงที่แตกต่างกันรวมทั้งเอทิลีนไกลคอลการเปลี่ยนแปลงสื่อแบบเส้นตรงดีเอ็นเอ จำกัด บูรณาการการทำงานของเอนไซม์สื่อและการเปลี่ยนแปลง Agrobacterium tumefaciens พึ่งได้รับการทดสอบเพื่อบูรณาการการแสดงออกของยีน crtW เข้าไปในจีโนม Mucor ความมั่นคงทิคส์, เว็บไซต์ของการรวมกลุ่มและจำนวนสำเนาของยีนที่โอนมาวิเคราะห์ใน transformants และสายพันธุ์ที่มีความเสถียรที่มีหลายยีน crtW จำนวนสำเนาสูงถูกแยก องค์ประกอบของ carotenoid transformants เลือกและผลกระทบของภาวะการเพาะเลี้ยงเช่นอุณหภูมิแหล่งคาร์บอนและการประยุกต์ใช้สารเติมแต่งบางอย่างในสื่อการเพาะเลี้ยงบนเนื้อหา carotenoid ของพวกเขาถูกนำมาวิเคราะห์ transformants Canthaxanthin ผลิตก็สามารถที่จะอยู่รอดได้ในอุณหภูมิที่สูงกว่าการเติบโตของสายพันธุ์ untransformed อาจเนื่องจากผลกระทบของ canthaxanthin บนไหลเยื่อและความซื่อสัตย์ ด้วยการประยุกต์ใช้กลูโคสทรีฮาโล, dihydroxyacetone และกรด L-aspartic เป็นแหล่งคาร์บอนในระดับปานกลางน้อยที่สุดที่ crtW-แสดงเอ็ม circinelloides ความเครียด MS12 + pCA8lf / 1, การผลิตมากกว่า 200 ไมโครกรัม / กรัม (มวลแห้ง) ของ canthaxanthin .