2.4. HPLC–DAD analysis
Analysis of the compounds in tea was performed on a Shimadzu
(Kyoto, Japan) HPLC system equipped with a diode array detector
(DAD) and an LC-10A pump. The chromatographic separation was
carried out on a Kromasil C18 column (250 mm × 4.6 mm, 5 μm;
Zhonghuida Co. Ltd., China), maintained at 35 °C. The UV absorbance
was monitored at 210 nm. The mobile phase was acetonitrile (A) and
0.05% phosphoric acid aqueous solution (B) with a gradient program
as follows: 0–8 min, linear gradient 5–8% A; 8–28 min, linear gradient
8–10% A; 28–40 min, 10% A isocratic elution; 40–55 min, linear
gradient 10–14% A; 55–80 min, linear gradient 14–24% A and
80–90 min, 24% A isocratic elution at a flow rate of 1 mL/min. All injection
volumes of samples and standard solutions were 20 μL.
The calibration curves and linear equations of peak area: concentration
ratios were determined using the aforementioned HPLC
program conditions for the seven standard analytes. The limit of detection
(LOD) and the limit of quantification (LOQ) were determined
at a signal-to-noise ratio (S/N) of about 3 and 10 respectively by a further
diluting of the standard solutions. In addition, precision, repeatability,
stability for 12 h and recovery were all carried out to validate
the HPLC method.
2.4 HPLC-DAD
วิเคราะห์การวิเคราะห์สารประกอบในชาที่ได้ดำเนินการในShimadzu
(เกียวโตญี่ปุ่น) ระบบ HPLC เพื่อการติดตั้งเครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอด
(DAD) และปั๊ม LC-10A การแยกสารได้รับการดำเนินการในคอลัมน์ Kromasil C18 (250 × 4.6 มมมม 5 ไมครอน; Zhonghuida จำกัด จีน) ไว้ที่ 35 องศาเซลเซียส การดูดกลืนรังสียูวีคือการตรวจสอบที่ 210 นาโนเมตร เฟสเคลื่อนที่เป็น acetonitrile (A) และ0.05% กรดฟอสฟอรัสสารละลาย (B) กับโปรแกรมการไล่ระดับสีดังนี้0-8 นาทีลาดเชิงเส้น 5-8%; 8-28 นาที, ลาดเชิงเส้น8-10%; 28-40 นาที, 10% ชะ isocratic; 40-55 นาที, เชิงเส้นไล่ระดับ 10-14%; 55-80 นาที, ลาดเชิงเส้น 14-24% และ80-90 นาที, 24% ชะ isocratic ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที ทั้งหมดฉีดปริมาณของตัวอย่างและการแก้ปัญหามาตรฐาน 20 ไมโครลิตร. เส้นโค้งการสอบเทียบและสมการเชิงเส้นของพื้นที่สูงสุด: ความเข้มข้นอัตราส่วนได้รับการพิจารณาโดยใช้วิธีHPLC ดังกล่าวเงื่อนไขโปรแกรมสำหรับเจ็ดวิเคราะห์มาตรฐาน ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ(LOD) และขีด จำกัด ของปริมาณนี้ (LOQ) ได้รับการพิจารณาที่สัญญาณต่อเสียงรบกวนอัตราส่วน(S / N) ประมาณ 3 และ 10 ตามลำดับต่อไปเจือจางในสารละลายมาตรฐาน นอกจากนี้ยังมีความแม่นยำในการทำซ้ำ, ความมั่นคงเป็นเวลา 12 ชั่วโมงและการกู้คืนทุกคนดำเนินการในการตรวจสอบวิธีHPLC ได้
การแปล กรุณารอสักครู่..
