Rapid and specific detection of via

Rapid and specific detection of viable Escherichia coli O157:H7 cells in ready-to-eat (RTE) meat products, by
duplex quantitative PCR (qPCR) procedures with mRNA and SYBR Green and TaqMan methodologies were
developed. Specific primers and probes were designed based on the serotype of E. coli O157:H7, fliCh7 and rfbE
genes. No cross-reactivity with other microorganisms was observed. The detection limit of the assays was 101
or 102CFU/g for artificially contaminated meat products, and after a 4h enrichment period at 37°C, the detection
limit decreased to about 1 CF
U/g. Time-to completion of the assay was approximately 8 h. Thus, these qPCR methods offer a useful, rapid and
efficient tool for screening viable E. coli O157:H7 in RTE meat products. This tool could also be proposed for
monitoring these foodborne pathogens in HACCP programs.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบอย่างรวดเร็ว และเฉพาะเจาะจงได้ Escherichia coli O157:H7 เซลล์พร้อมกิน (RTE) เนื้อผลิตภัณฑ์ โดยดูเพล็กซ์ PCR (qPCR) ขั้นตอนเชิงปริมาณ mRNA และวิธี SYBR Green และ TaqManพัฒนา ไพรเมอร์เฉพาะและคลิปปากตะเข้ถูกออกแบบตาม serotype O157:H7 E. coli, fliCh7 และ rfbEยีน Cross-reactivity ไม่ มีจุลินทรีย์อื่น ๆ ได้สังเกต ตรวจสอบจำนวน assays มี 101หรือ 102CFU/g สำหรับผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ปนเปื้อนเหือด และเมื่อ 4h โดดเด่นที่ 37° C การตรวจพบจำกัด CF ลดลงไปประมาณ 1ประมาณ 8 h U/กรัม เวลาที่เสร็จสมบูรณ์ของการวิเคราะห์ได้ ดังนั้น วิธี qPCR ให้รวดเร็วมีประโยชน์ และเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับคัดกรอง O157:H7 ได้ E. coli ในผลิตภัณฑ์เนื้อ RTE นอกจากนี้จะเสนอเครื่องมือสำหรับตรวจสอบโรค foodborne เหล่านี้ในโปรแกรม HACCP

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรวจสอบอย่างรวดเร็วและทำงานที่เฉพาะเจาะจงของ Escherichia coli O157: H7 ในเซลล์พร้อมรับประทาน (RTE)
ผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์โดยวิธีPCR เชิงปริมาณเพล็กซ์ (qPCR) ขั้นตอนที่มี mRNA และสีเขียว SYBR และวิธีการ TaqMan
ถูกพัฒนา ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงและยานสำรวจได้รับการออกแบบบนพื้นฐานของซีโรไทป์ของเชื้อ E. coli O157: H7, fliCh7 และ rfbE
ยีน ไม่มีปฏิกิริยาข้ามกับจุลินทรีย์อื่น ๆ พบว่า ขีด จำกัด ของการตรวจสอบของการตรวจเป็น 101
หรือ 102CFU / g สำหรับการปนเปื้อนผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์เทียมและหลังจากระยะเวลาการตกแต่ง 4h ที่ 37
องศาเซลเซียสการตรวจสอบวงเงินลดลงประมาณ1 CF
U / กรัม เวลาที่จะเสร็จสิ้นการทดสอบประมาณ 8 ชั่วโมง ดังนั้นวิธีการเหล่านี้ qPCR
มีประโยชน์อย่างรวดเร็วและมีเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการคัดกรองทำงานได้เชื้อE. coli O157: H7 ใน RTE ผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ เครื่องมือนี้อาจจะมีการเสนอให้ตรวจสอบเชื้อโรคที่เกิดจากอาหารเหล่านี้ในโปรแกรม HACCP

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อย่างรวดเร็วและเฉพาะการเป็นสมาชิกได้ Escherichia coli ) เซลล์ในอาหารพร้อมรับประทาน ( RTE ) ผลิตภัณฑ์เนื้อ โดย
เพล็กซ์ปริมาณ PCR ( qpcr ) ขั้นตอนกับ mRNA และวิธีการศึกษาและ taqman SYBR กรีน
พัฒนา ส่วนของดีเอ็นเอโพรบและถูกออกแบบบนพื้นฐานของซีโรไทป์ของเชื้อ E . coli ) และเป็นสมาชิก flich7 rfbe
ยีน ไม่มีปฏิกิริยาข้ามกับเชื้อจุลินทรีย์อื่น ๆได้สังเกตการตรวจหาขอบเขตหรือเป็น 101
/ g หรือ 102cfu เทียมปนเปื้อนผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ และหลังจาก 4 งวดที่ 37 ° C เพื่อ ตรวจหา
วงเงินลดลงประมาณ 1 CF
U / G . เวลาเสร็จ ( ประมาณ 8 ชั่วโมง ดังนั้น วิธีการ qpcr เหล่านี้ให้ประโยชน์ และรวดเร็ว เครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสำหรับการคัดกรองสาย
E . coli เป็นสมาชิก : H7 ในเนื้อผลิตภัณฑ์ RTE .เครื่องมือนี้ยังสามารถได้รับการเสนอสำหรับการตรวจสอบเชื้อโรคอาหารเป็นพิษ
เหล่านี้ในโปรแกรม HACCP