2.9. Effect of metal ions on amylase activity
The effect of various metal ions (Li+, Rb+, Na+, K+, Mg2+, Cs2+,
Ca2+, Ni2+, Cu2+, Zn2+, and Fe3+) on the enzyme amylase activity
was investigated. The concentration of anions was 10 mM, which
was prepared by dissolving the metal ions in deionised water.
The anion concentration in the mixture was 0.8 mM. In addition,
0.5 ml of purified enzyme with 0.5 ml of metal ion solution was
pre-incubated at 70 C and pH 5 for 1 h in a water bath. Then,
0.5 ml of pre-incubated mixture (i.e., 0.5 ml enzyme + 0.5 ml metal
ion solution) was added to 0.5 ml of 0.1% soluble starch as the substrate
in 100 mMsodium acetate buffer (pH 5.0) for 30 min at 70 C
to determine the residual enzyme activity. The reaction was
stopped by boiling the mixture for 5 min in the presence of 1 ml
DNS. Then, the enzyme activity was read with a spectrophotometer
at 540 nm. It should be noted that the control was run by substituting
the enzyme with the same volume of a solution that was
heated in boiling water for 30 min to denature and deactivate
the enzyme (Jenshinn, Lin, Kuo, Jiang, & Wu, 2009). It should be
noted that based on our preliminary study substituting the enzyme
instead of buffer to generate a control sample produces more accurate
results than the simple addition of buffer to generate a control
2.9. Effect of metal ions on amylase activity
The effect of various metal ions (Li+, Rb+, Na+, K+, Mg2+, Cs2+,
Ca2+, Ni2+, Cu2+, Zn2+, and Fe3+) on the enzyme amylase activity
was investigated. The concentration of anions was 10 mM, which
was prepared by dissolving the metal ions in deionised water.
The anion concentration in the mixture was 0.8 mM. In addition,
0.5 ml of purified enzyme with 0.5 ml of metal ion solution was
pre-incubated at 70 C and pH 5 for 1 h in a water bath. Then,
0.5 ml of pre-incubated mixture (i.e., 0.5 ml enzyme + 0.5 ml metal
ion solution) was added to 0.5 ml of 0.1% soluble starch as the substrate
in 100 mMsodium acetate buffer (pH 5.0) for 30 min at 70 C
to determine the residual enzyme activity. The reaction was
stopped by boiling the mixture for 5 min in the presence of 1 ml
DNS. Then, the enzyme activity was read with a spectrophotometer
at 540 nm. It should be noted that the control was run by substituting
the enzyme with the same volume of a solution that was
heated in boiling water for 30 min to denature and deactivate
the enzyme (Jenshinn, Lin, Kuo, Jiang, & Wu, 2009). It should be
noted that based on our preliminary study substituting the enzyme
instead of buffer to generate a control sample produces more accurate
results than the simple addition of buffer to generate a control
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.9 . ผลของไอออนโลหะในกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลส
ผลของไอออนโลหะต่างๆ ( Li , RB , Na , K , mg2 CS2
, แคลเซียม ni2 CU2 zn2 , , , , และ fe3 ) ในกิจกรรมเอนไซม์อะไมเลส
ถูกตรวจสอบ ความเข้มข้นของไอออนที่มีประจุลบเป็น 10 มม. ซึ่ง
เตรียมโดยละลายโลหะไอออนในน้ำ deionised .
ประจุลบความเข้มข้นในส่วนผสมคือ 0.8 มิลลิเมตร นอกจากนี้
0.5 มิลลิลิตรเอนไซม์กับ 05 มิลลิลิตรของสารละลายไอออนโลหะ
ก่อน บ่มที่อุณหภูมิ 70 C และ pH 5 เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในการอาบน้ำ งั้น
0.5 ml ก่อนบ่มส่วนผสม ( เช่น 0.5 มิลลิลิตรเอนไซม์ 0.5
โลหะ ml สารละลายไอออน ) คือเพิ่ม 0.5 มิลลิลิตร ละลายแป้ง 0.1% (
100 mmsodium อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 5.0 ) สำหรับ 30 นาทีที่ 70 C
เพื่อตรวจสอบกิจกรรมของเอนไซม์ที่เหลือ ปฏิกิริยาที่ถูก
การแปล กรุณารอสักครู่..