2. Materials and methods2.1. Inocul

2. Materials and methods
2.1. Inoculum preparation

ECOH strains ATCC43895, ATCC43888, ATCC43889, and non-O157-STEC strains O26:H11 (TWO7814), O45:H2 (TWO14003), O103:H2 (TWO8101), O111:H18 (TWO7926), O121:HMN (TWO8039), and O145:H28 (TWO9356), human isolates, were kindly provided by Ms. Beth Whittam, Michigan State University, East Lansing, MI. All strains were cultured and sub-cultured individually in 10 mL tryptic soy broth at 35 °C for 24 h. The three strains of ECOH were then mixed and centrifuged (Eppendorf model 5810R, Brinkmann Instruments Inc., Westbury, NY) at 4629 × g for 15 min at 4 °C. Treatment of the six strains of non-O157-STEC followed the same procedure as that of ECOH. The harvested cells were washed in triplicate with 10 mL of phosphate buffered saline (PBS), centrifuged as previously described, and re-suspended in 30 (ECOH) or 60 mL (non-O157-STEC) of fresh PBS. The washed cultures were then serially diluted in PBS to obtain an inoculation level of ∼6 log CFU/g when 100 mL of inoculum was added to 1 kg of coarse-ground beef knuckle.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. การเตรียม inoculumสายพันธุ์ ECOH ATCC43895, ATCC43888, ATCC43889 และสายพันธุ์ไม่ใช่ O157 เอส O26:H11 (TWO7814), O45:H2 (TWO14003), O103:H2 (TWO8101), O111:H18 (TWO7926) O121:HMN (TWO8039), และ O145:H28 (TWO9356), มนุษย์ แยก ได้โปรดโดยนางสาว Beth Whittam มหาวิทยาลัยมิชิแกน East Lansing, MI ทุกสายพันธุ์ถูกล้าง และย่อยล้างเอกลักษณ์ในซุปถั่วเหลือง tryptic 10 มล.ที่อุณหภูมิ 35 ° C ใน 24 ชม สามสายพันธุ์ของ ECOH ที่ถูกผสมแล้ว และผลิตภัณฑ์ (Eppendorf รุ่น 5810R, Inc. เครื่อง Brinkmann เดอะโซโห NY) ที่ 4629 × g 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส รักษาพันธุ์ปลอด O157 เอสหกตามกระบวนการเดียวกันกับ ECOH เก็บเกี่ยวเซลล์ถูกล้างลข้อกับ 10 mL ของน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (PBS) ผลิตภัณฑ์ดังอธิบาย และลอยอีกครั้งใน 30 (ECOH) หรือของ PBS สด 60 มล. (ไม่ใช่-O157-เอส) แล้ววัฒนธรรมล้าง serially ถูกเจือจางใน PBS รับระดับการกักบริเวณของล็อก ∼6 CFU/g เมื่อถูก 100 มล.ของ inoculum knuckle เนื้อบดหยาบ 1 กิโลกรัม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเตรียมหัวเชื้อ

ECOH สายพันธุ์ ATCC43895, ATCC43888, ATCC43889 และไม่ใช่ O157-STEC สายพันธุ์ O26: H11 (TWO7814) Ø45: H2 (TWO14003) O103: H2 (TWO8101) O111: H18 (TWO7926) O121: HMN (TWO8039 ) และ O145: H28 (TWO9356) สายพันธุ์ของมนุษย์ได้ให้ความกรุณาโดยนางสาวเบ ธ Whittam มหาวิทยาลัยรัฐมิชิแกนตะวันออกแลนซิง ทุกสายพันธุ์มาเพาะเลี้ยงและเพาะเลี้ยงย่อยเป็นรายบุคคลใน 10 มล tryptic น้ำซุปถั่วเหลืองที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ทั้งสามสายพันธุ์ของ ECOH ถูกแล้วผสมและหมุนเหวี่ยง (5810R รุ่น Eppendorf, Brinkmann เครื่องดนตรีอิงค์นิวยอร์กซิตี้) ที่ 4629 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส การรักษาของหกสายพันธุ์ที่ไม่ O157-STEC ตามขั้นตอนเช่นเดียวกับที่ ECOH เซลล์เก็บเกี่ยวถูกล้างในเพิ่มขึ้นสามเท่าที่มี 10 มลของฟอสเฟตน้ำเกลือบัฟเฟอร์ (PBS), ปั่นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้และอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน 30 (ECOH) หรือ 60 มิลลิลิตร (Non-O157-STEC) ของพีบีเอสสด วัฒนธรรมล้างถูกเจือจางแล้วลำดับในพีบีเอสที่จะได้รับการฉีดวัคซีนในระดับของ ~6 log CFU / g เมื่อ 100 มลของเชื้อถูกบันทึกอยู่ใน 1 กิโลกรัมของหยาบพื้นดินสนับมือเนื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . การเตรียมเชื้อecoh atcc43895 atcc43888 atcc43889 , สายพันธุ์ , สายพันธุ์ , และ non-o157-stec o26 : h11 ( two7814 ) o45 : H2 ( two14003 ) o103 : H2 ( two8101 ) o111 : h18 ( two7926 ) o121 : แฮม ( two8039 ) และ o145 : h28 ( two9356 ) , มนุษย์สายพันธุ์ได้กรุณาให้ whittam คุณเบธ , Michigan State University ในอีสต์แลนซิง , มิ . ทุกสายพันธุ์ เลี้ยงและเพาะเลี้ยงเป็นรายย่อย 10 ml อาหารถั่วเหลืองซุปที่ 35 °องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง มี 3 สายพันธุ์ ecoh แล้วผสมไฟฟ้า ( แบบ 5810r brinkmann เพนดอร์ฟ , เครื่องมือสำหรับ Westbury , NY ) ที่ 4629 × G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 องศา การรักษาของหกสายพันธุ์ของ non-o157-stec ตาม กระบวนการเดียวกับที่ ecoh . เก็บเกี่ยวเซลล์ถูกล้างทั้งสามใบด้วย 10 ml เกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS ) , ระดับตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ และจะถูกระงับใน 30 ( ecoh ) หรือ 60 ml ( non-o157-stec ) ของพีบีเอสสด ล้างแล้วเป็นวัฒนธรรมที่เจือจางใน PBS เพื่อขอรับการฉีดวัคซีนที่ระดับ∼ 6 log CFU / g เมื่อ 100 ml ปริมาณ 1 กิโลกรัม เป็นเนื้อดินหยาบนิ้ว .