NMR datawere acquired on Bruker AVA

NMR datawere acquired on Bruker AVANCE or AVANCE-II spectrometers
operating at a 1H Larmor frequency of 600.13 or 600.53 MHz,
respectively, and each equipped with a cryoprobe. Reduction and
reaction progress of cyanomet CtrHbs were monitored by 1H 1D NMR
spectroscopy with water presaturation. Reactants and products were
additionally studied using 1H-1H NOESY (nuclear Overhauser effect
spectroscopy), DQF-COSY (double-quantum filtered correlation
spectroscopy), TOCSY (total correlation spectroscopy) with TOWNY
(total correlation spectroscopy without NOESY) sequence, and natural
abundance 1H-13C HMQC (heteronuclear multiple quantum correlation)
spectra [40–42]. These data were sufficient to assign most heme
resonances and locate many conserved heme pocket residues of each
cyanomet CtrHb. Labile protons were identified by acquisition of the
same data in 99.9% D2O. 1H-15N HSQC (heteronuclear single quantum
correlation) and long-range (lr) histidine selective 1H-15NHMQC spectra
[43] were used to confirmthe assignments of the engineered and native
histidines within WT, T111H and L75H cyanomet CtrHbs [21,22].
1H chemical shifts were referenced to DSS (4,4-dimethyl-4-silapentane-
1-sulfonic acid) indirectly through the water resonance (4.76 ppm at
298 K); 13C and 15N chemical shifts were referenced as described in
[44]. NMR data were processed with TopSpin 2.1 or NMRPipe [45].
Spectral analysis was conducted with Sparky 3 [46].

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

NMR datawere ที่ได้รับเมื่อ Bruker AVANCE หรือ spectrometers AVANCE-II
ในการดำเนินงานที่ความถี่ 1H Larmor ของ 600.13 หรือ 600.53 MHz,
ตามลำดับและแต่ละห้องมี cryoprobe ลดและ
ความคืบหน้าในการเกิดปฏิกิริยาของ CtrHbs cyanomet ถูกตรวจสอบโดย 1H 1D NMR
spectroscopy กับ presaturation น้ำ สารตั้งต้นและผลิตภัณฑ์ที่ได้รับ
การศึกษาเพิ่มเติมโดยใช้ 1H-1H NOESY (นิวเคลียร์ Overhauser ผลกระทบ
สเปกโทรสโก), ​​DQF-โคซี่ (ดับเบิลควอนตัมกรองความสัมพันธ์
สเปกโทรสโก), ​​TOCSY (spectroscopy ความสัมพันธ์ทั้งหมด) กับ towny
(spectroscopy ความสัมพันธ์ทั้งหมดโดยไม่ต้อง NOESY) ลำดับและเป็นธรรมชาติ
อุดมสมบูรณ์ HMQC 1H-13C (วิวิธพันธ์ความสัมพันธ์ควอนตัมหลาย)
สเปกตรัม [40-42] ข้อมูลเหล่านี้ก็เพียงพอที่จะกำหนด heme ที่สุด
Resonances และค้นหาสารตกค้างกระเป๋า heme อนุรักษ์จำนวนมากของแต่ละ
cyanomet CtrHb โปรตอน labile ถูกระบุโดยการซื้อกิจการของ
ข้อมูลเดียวกันใน 99.9% D2O 1H-15N HSQC (วิวิธพันธ์ควอนตัมเดียว
ความสัมพันธ์) และระยะยาว (LR) ฮิสติดีนเลือก 1H-15NHMQC สเปกตรัม
[43] ถูกนำมาใช้เพื่อ confirmthe ที่ได้รับมอบหมายของวิศวกรรมและพื้นเมือง
histidines ภายใน WT, T111H และ L75H CtrHbs cyanomet [21,22] .
1H กะสารเคมีที่ถูกอ้างอิงกับ DSS (4,4-dimethyl-4-silapentane-
กรด 1 sulfonic) โดยอ้อมผ่านเสียงสะท้อนน้ำ (4.76 พีพีเอ็มที่
298 K); 13C และการเปลี่ยนแปลงทางเคมี 15N ถูกอ้างอิงตามที่อธิบายไว้ใน
[44] ข้อมูล NMR ถูกประมวลผลด้วย Topspin 2.1 หรือ NMRPipe [45].
การวิเคราะห์สเปกตรัมได้ดำเนินการกับสปาร์ก 3 [46]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คุณและได้รับในบรุคเกอร์วนซ์หรือ avance-ii า
ปฏิบัติการที่ 1 ความถี่ของ 600.13 ลาร์เมอร์หรือ 600.53 MHz
ตามลำดับ และแต่ละพร้อมกับ cryoprobe . ลดปฏิกิริยาของ cyanomet
ความคืบหน้า ctrhbs มอเตอร์ 1H NMR สเปกโทรสโกปีกับ 1D
น้ำ presaturation . สารตั้งต้นและผลิตภัณฑ์ถูก
นอกจากนี้การศึกษาโดยใช้ 1h-1h พร้อมกันนั้น overhauser ผล
( นิวเคลียร์สเปกโทรสโกปี ) , dqf-cosy ( Double ควอนตัมกรองสเปกโทรสโกปี )
) tocsy ( spectroscopy ) รวม ) กับ towny
( spectroscopy ) ทั้งหมดโดยที่พร้อมกันนั้น ) ลำดับ และได้ 1h-13c ความอุดมสมบูรณ์ตามธรรมชาติ
( heteronuclear ควอนตัมความสัมพันธ์หลายสเปกตรัม )
[ 40 – 42 ] ข้อมูลเหล่านี้เพียงพอที่จะกำหนด resonances ฮีม
ที่สุดและค้นหาหลายเพื่อกระเป๋าตกค้างของแต่ละ
ฮีมcyanomet ctrhb . ที่โปรตอนระบุได้ด้วยการซื้อกิจการของ
ข้อมูลเดียวกันใน 99.9% d2o . 1h-15n hsqc ( heteronuclear เดียวควอนตัม
ความสัมพันธ์ ) และระยะยาว ( LR ) เมื่อเลือก 1h-15nhmqc Spectra
[ 43 ] ถูกใช้เพื่อ confirmthe การมอบหมายของวิศวกรรมและ histidines พื้นเมือง
ภายใน โดยน้ำหนัก และ t111h l75h cyanomet ctrhbs 21,22
[ 1 ] เคมีกะเป็น DSS ( อ้างอิงที่ 44-dimethyl-4-silapentane -
1-sulfonic acid ) โดยทางอ้อมผ่านน้ำเรโซแนนซ์ ( 4.76 ppm ที่ 298 K ;
) และเคมี 15N 13C กะถูกอ้างอิงตามที่อธิบายไว้ใน
[ 44 ] โดยการเก็บข้อมูลด้วยสุดยอด 2.1 หรือ nmrpipe [ 45 ] .
การวิเคราะห์สเปกตรัมดำเนินการกับสปาร์กี้ 3 [ 46 ]