AbstractFluorescent labels used to

Abstract

Fluorescent labels used to disclose cellular function and the like are generally needed for cytometric analysis, but suitable ones are not always available. Thiamin, an example of such a label, was used as a model in this study. Thiamin in cells of bakers’ yeast can be chemically converted to thiochrome, which fluoresces strongly, but the reaction kills cells not protected inside a gel microdroplet (GMD). Our new procedure for preparation of a small amount of GMDs uses a glass filter with micropores uniform in size to make an emulsion of molten agar in mineral oil that is then chilled for gelation of the agarose. Cells were suspended and mixed with the warm agarose, which was used to make GMDs. Cells were grown into microcolonies in the GMDs, which were then treated to convert thiamin to thiochrome. The thiochrome in microcolonies in single GMDs could be detected by flow cytometry. Plating showed that enough cells survived for this method to be used for screening. This technique can be used for all applications of GMDs.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อป้ายเรืองแสงใช้ในการเปิดเผยโทรศัพท์มือถือฟังก์ชันความหมายโดยทั่วไปจำเป็นสำหรับการวิ cytometric แต่คนที่เหมาะสมไม่มีเสมอ Thiamin ตัวอย่างเช่นป้ายชื่อ ถูกใช้เป็นแบบในการศึกษานี้ Thiamin ในเซลล์ของยีสต์ bakers' สามารถสารเคมีแปลง thiochrome ที่ fluoresces ขอ แต่ปฏิกิริยาฆ่าเซลล์ที่ไม่ป้องกันภายใน microdroplet เจล (GMD) ขั้นตอนเตรียมของ GMDs น้อยของเราใหม่ใช้ตัวกรองแก้ว มีรูปขนาด micropores ให้เป็นอิมัลชันของ agar หลอมละลายในน้ำมันที่แช่ได้แล้วสำหรับ gelation ใน agarose เซลล์หยุดชั่วคราว และผสม ด้วย agarose อบอุ่น ซึ่งถูกใช้เพื่อทำให้ GMDs เซลล์เติบโตขึ้นเป็น microcolonies ใน GMDs ที่ได้รับแล้วจะแปลง thiamin thiochrome พบ thiochrome ใน microcolonies ใน GMDs เดียว โดยเซลล์ไหล ชุบแสดงให้เห็นว่า เซลล์พอรอดชีวิตสำหรับวิธีการนี้จะใช้สำหรับคัดกรอง เทคนิคนี้สามารถใช้ได้สำหรับโปรแกรมประยุกต์ทั้งหมดของ GMDs

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อป้ายเรืองแสงที่ใช้ในการเปิดเผยการทำงานของเซลล์และชอบที่มีความจำเป็นโดยทั่วไปสำหรับการวิเคราะห์ cytometric แต่คนที่เหมาะสมที่ไม่เคยมีอยู่ วิตามินบี, ตัวอย่างของป้ายดังกล่าวถูกนำมาใช้เป็นรูปแบบในการศึกษานี้ วิตามินบีในเซลล์ของยีสต์ขนมปัง 'สามารถแปลงทางเคมีเพื่อ thiochrome ซึ่ง fluoresces อย่างยิ่ง แต่ปฏิกิริยาฆ่าเซลล์ไม่ได้ป้องกันภายในเจล microdroplet (GMD) ขั้นตอนใหม่ของเราในการจัดทำจำนวนเล็ก ๆ ของ GMDs ใช้กรองแก้วที่มี micropores สม่ำเสมอในขนาดที่จะทำให้อิมัลชันของวุ้นเหลวในน้ำมันแร่ธาตุที่เป็นแล้วแช่เย็นสำหรับเจของ agarose เซลล์ที่ถูกระงับและผสมกับ agarose อบอุ่นซึ่งถูกใช้ในการทำ GMDs เซลล์ที่ถูกเติบโตขึ้นเป็น microcolonies ใน GMDs ซึ่งได้รับการรักษาแล้วการแปลงวิตามินบีเพื่อ thiochrome thiochrome ใน microcolonies ใน GMDs เดียวจะได้รับการตรวจพบโดย cytometry ไหล ชุบแสดงให้เห็นว่าเซลล์พอที่รอดชีวิตมาได้วิธีการนี้จะใช้สำหรับการตรวจคัดกรอง เทคนิคนี้สามารถนำมาใช้สำหรับการใช้งานทั้งหมดของ GMDs

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ป้ายเรืองแสงนามธรรม

เคยเปิดเผยการทำงานของเซลล์และชอบโดยทั่วไปที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์เชิงลบ แต่คนที่เหมาะสมจะไม่เสมอ วิตามินบี ตัวอย่าง เช่น ป้าย ถูกใช้เป็นแบบจำลองในการศึกษานี้ วิตามินบี 1 ในเซลล์ของยีสต์ขนมปัง ' สามารถแปลงทางเคมีเพื่อ thiochrome ซึ่งเรืองแสงอย่างแรงแต่การฆ่าเซลล์ไม่ป้องกันภายในเจล microdroplet ( GMD ) ขั้นตอนใหม่สำหรับการเตรียมการของจำนวนเล็ก ๆของ gmds ใช้กระจกกรองแสงกับ micropores เครื่องแบบในขนาดที่ทำให้อิมัลชันของน้ำมันหล่อวุ้นในแร่มันทำให้เจลาตินของโรส . เซลล์ที่ถูกระงับ และผสมกับ , อบอุ่น , ซึ่งถูกใช้เพื่อให้ gmds .เซลล์มีการโตขึ้น microcolonies ใน gmds ซึ่งก็ถือว่าเปลี่ยนไป thiochrome วิตามินบี . การ thiochrome ใน microcolonies ใน gmds เดียว ( สามารถตรวจพบได้โดยการไหล พบว่าเซลล์พอชุบถึงวิธีนี้จะใช้สำหรับคัดกรอง เทคนิคนี้สามารถใช้สำหรับการ gmds .