2.1. Isolation of antagonistic bacteria
A total of 150 bacterial isolates were collected from the rhizosphere of healthy tomato and potato plants from Ambo, Awassa, Bako, Shashamane, Wolayta and Wondogenet in Ethiopia. The fluorescent pseudomonads were isolated following the method of Vlassak et al. (1992). One gram of each soil sample was shaken (2 h, 200 rpm) in 100 mL of phosphate buffered saline (PBS). Then, serial dilutions of each suspension were plated on King’s B agar (KB) medium: 20 g L−1 bactopeptone, 1 g L−1 K2HPO4, 1.5 g L−1 MgSO4 × 7H2O, 10 mL L−1 glycerol, 15 g L−1 agar. After incubation at 28 °C for 24 h, representative colonies were selected for further studies.Bacillus species were isolated based on the resistance of their endospores to elevated temperatures ( Földes et al., 2000). Soil suspensions (2 g of rhizosphere soil in 100 mL of water) were placed in a water bath at 80 °C for 10–15 min. Serial dilutions were spread on Nutrient Glucose Agar (NGA) plate: 3 g L−1 beef extract, 5 g L−1 peptone, 2.5 g L−1 glucose, 15 g L−1 agar and incubated at 28 °C for 48 h. Representative colonies were preserved for further characterization studies.
2.1 การแยกเชื้อแบคทีเรียต่อต้านจำนวน 150 แยกแบคทีเรียได้รวบรวมจากไรโซสเฟียร์ของสุขภาพมะเขือเทศและมันฝรั่งพืช Ambo, Awassa, Bako, Shashamane, Wolayta และ Wondogenet ในเอธิโอเปีย Pseudomonads ที่เรืองแสงได้แยกตามวิธีของ Vlassak et al. (1992) หนึ่งกรัมของตัวอย่างดินแต่ละถูกเขย่า (2 h, 200 รอบต่อนาที) ใน 100 mL ของน้ำเกลือฟอสเฟต buffered (PBS) แล้ว dilutions ประจำของแต่ละระบบกันสะเทือนถูกชุบบนสื่อกลางพระ B agar (KB): 20 g L−1 bactopeptone, 1 g L−1 K2HPO4, 1.5 g × L−1 MgSO4 7H2O กลีเซอร 10 mL L−1, 15 g L−1 agar หลังจากบ่มที่ 28 ° C ใน 24 ชม พนักงานอาณานิคมได้เลือกศึกษาเพิ่มเติมคัดพันธุ์ได้แยกตามความต้านทานของ endospores ของพวกเขาให้อุณหภูมิสูงขึ้น (Földes et al., 2000) บริการดิน (2 กรัมของดินไรโซสเฟียร์ใน 100 mL ของน้ำ) ถูกวางในอ่างน้ำที่ 80 ° C สำหรับ dilutions ประจำ 10 – 15 นาทีได้แพร่กระจายบนแผ่นสารกลูโคส Agar (พังงา): 3 g L−1 เนื้อ แยก peptone 5 g L−1 กลูโคส 2.5 g L−1, 15 g L−1 agar และ incubated ที่ 28 ° C สำหรับ 48 h. ผู้แทนอาณานิคมได้รับการศึกษาจำแนก
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.1 การแยกเชื้อแบคทีเรียปฏิปักษ์
ทั้งหมด 150 ไอโซเลทที่รวบรวมจากบริเวณรากมะเขือเทศและพืชมันฝรั่งจาก Ambo, Awassa, Bako, Shashamane, Wolayta และ Wondogenet ในประเทศเอธิโอเปีย pseudomonads เรืองแสงที่แยกได้ดังต่อไปนี้วิธีการ Vlassak และคณะ (1992) หนึ่งกรัมของตัวอย่างดินแต่ละคนถูกเขย่า (2 ชั่วโมง, 200 รอบต่อนาที) ใน 100 มลฟอสเฟตน้ำเกลือบัฟเฟอร์ (พีบีเอส) จากนั้นเจือจางอนุกรมพักแต่ละชุบกับวุ้น B คิง (KB) ขนาด: 20 กรัม L-1 bactopeptone 1 กรัม L-1 K2HPO4 1.5 กรัม L-1 MgSO4 × 7H2O, 10 มล L-1 กลีเซอรอล 15 กรัม L-1 วุ้น หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงอาณานิคมตัวแทนได้รับการคัดเลือกสายพันธุ์ studies.Bacillus เพิ่มเติมที่แยกได้ขึ้นอยู่กับความต้านทานของสปอร์ของพวกเขากับอุณหภูมิที่สูง (Földes et al., 2000) สนองดิน (2 กรัมของดินบริเวณรากใน 100 มิลลิลิตรของน้ำ) ถูกวางไว้ในอ่างน้ำที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10-15 นาที เจือจางอนุกรมถูกแพร่กระจายในสารอาหารกลูโคสวุ้น (พังงา) แผ่น: 3 กรัม L-1 สารสกัดจากเนื้อวัว 5 กรัม L-1 เปปโตน 2.5 กรัม L-1 กลูโคส 15 กรัม L-1 วุ้นและบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง . อาณานิคมแทนถูกเก็บรักษาสำหรับการศึกษาลักษณะเพิ่มเติม
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.1 . การแยกเชื้อแบคทีเรียปฏิปักษ์
รวม 150 แบคทีเรียที่คัดเลือกได้จากการเก็บรากของมะเขือเทศและพืชมีสุขภาพดีมันฝรั่งจาก Ambo awassa bako shashamane , , , , และ wolayta wondogenet ในเอธิโอเปีย การ pseudomonads เรืองแสงได้แยกตามวิธีการของ vlassak et al . ( 1992 ) หนึ่งกรัมของดินแต่ละตัวอย่างถูกสั่นคลอน ( 2 ชั่วโมงความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาที ) 100 มิลลิลิตรของฟอสเฟตในน้ำเกลือ ( PBS ) แล้วอนุกรมวิธีการแต่ละระงับถูกชุบบนกษัตริย์ B ( KB ) : L − 1 bactopeptone ขนาดกลาง 20 กรัม , 1 G L − 1 k2hpo4 1.5 G L − 1 MgSO4 ใ× 7h2o 10 ml L − 1 กลีเซอรอล 15 g L − 1 วุ้น หลังจากการบ่มที่ 28 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ผู้แทนอาณานิคมได้แก่Bacillus สายพันธุ์ที่แยกได้จากความต้านทานของนโดสปอรของอุณหภูมิสูง ( F ö ldes et al . , 2000 ) รับน้ำหนักของดิน ( 2 กรัมของดินบริเวณราก ใน 100 มิลลิลิตรของน้ำ ) อยู่ในอ่างน้ำที่ 80 ° C 10 – 15 นาที ต่อเนื่องเป็นวิธีการแพร่กระจายบน Nutrient Glucose Agar ( พังงา ) แผ่น : 3 g L − 1 สารสกัดจากเนื้อ 5 กรัมต่อลิตรตามลำดับ− 1 , − 1 2.5 กรัมต่อลิตรน้ำตาล15 g L − 1 วุ้นและบ่มที่อุณหภูมิ 28 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ผู้แทนอาณานิคมถูกเก็บรักษาไว้เพื่อการศึกษาคุณสมบัติเพิ่มเติม
การแปล กรุณารอสักครู่..