Our phylogenetic analysis revealed

Our phylogenetic analysis revealed a new T. reesei b-glucosidase,
TrCel3B, belonging to the same cluster as the Aspergillus b-glucosidases,
which exhibit high cellobiase activity (Figs. 1 and S1).
Therefore, cel3b of T. reesei seemed like a good b-glucosidase
candidate for testing expression in S. cerevisiae. Our report is the
first to show such heterologous expression of TrCel3B in
S. cerevisiae. Examination of cellobiase activity of the recombinant
strains using either TrCel3B or AaBGL1 indicated that the recombinant
AaBGL1 showed higher pNPGase activity than that of
TrCel3B (Fig. 3B), revealing that S. cerevisiae INVSc1 expressing
AaBGL1 had higher cellobiose-metabolizing capacity than TrCel3B.
Further characterization also revealed post-translational modifi-
cations, such as glycosylation, in these recombinant proteins, suggesting
structural modifications that could potentially enhance
enzyme activities. Glycosylation of BGLs has been reported previously
in A. aculeatus (47). Although the amount of protein secreted
in AaBGL1 culture was lower than in TrCel3B, the specific activity of
AaBGL1 against pNPGlc or cellobiose was evidently higher than that
of TrCel3B (Table 1). The stability of AaBGL1 was also superior to
TrCel3B under various pH and thermal conditions, prompting us to
select yeast expressing recombinant AaBGL1 for use in the subsequent
SSF process

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์ phylogenetic ของเราเปิดเผยตัวใหม่ต. reesei b-glucosidaseTrCel3B เป็นสมาชิกของคลัสเตอร์เดียวกันเป็น Aspergillus b-glucosidasesซึ่งแสดงกิจกรรม cellobiase สูง (Figs. 1 และ S1)ดังนั้น cel3b ต. reesei เหมือน b-glucosidase ดีผู้สมัครทดสอบนิพจน์ใน S. cerevisiae เป็นรายงานก่อนการแสดงนิพจน์เช่น heterologous ของ TrCel3B ในS. cerevisiae ตรวจสอบกิจกรรม cellobiase ของวททชใช้ TrCel3B หรือ AaBGL1 สายพันธุ์ระบุที่วททชAaBGL1 พบกิจกรรม pNPGase สูงกว่าของTrCel3B (Fig. 3B), เปิดเผยว่า S. cerevisiae INVSc1 แสดงAaBGL1 มีกำลัง cellobiose metabolizing สูงกว่า TrCel3Bจำแนกการยังเปิดเผย post-translational modifi-เป็นของหายาก เช่น glycosylation ในโปรตีนเหล่านี้ recombinant แนะนำปรับเปลี่ยนโครงสร้างที่อาจเพิ่มกิจกรรมของเอนไซม์ Glycosylation BGLs ได้รายงานก่อนหน้านี้ใน A. aculeatus (47) แม้ว่าจำนวนโปรตีน secretedใน AaBGL1 วัฒนธรรมต่ำกว่าใน TrCel3B กิจกรรมของAaBGL1 กับ pNPGlc หรือ cellobiose ได้สูงอย่างเห็นได้ชัดกว่าของ TrCel3B (ตารางที่ 1) ยังมีความมั่นคงของ AaBGL1 เหนือกว่าTrCel3B สภาวะต่าง ๆ pH และความร้อน เพื่อให้เราเลือกยีสต์ที่กำลัง AaBGL1 recombinant สำหรับใช้ในการต่อมากระบวนการของ SSF

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์สายวิวัฒนาการของเราเปิดเผย T. reesei ใหม่ B-glucosidase,
TrCel3B เป็นของกลุ่มเช่นเดียวกับเชื้อรา Aspergillus B-glucosidases,
ซึ่งแสดงฤทธิ์ cellobiase สูง (มะเดื่อ. 1 และ S1).
ดังนั้น cel3b ของ T. reesei ดูเหมือนจะเป็น B-glucosidase
ดีผู้สมัครสำหรับการแสดงออกในการทดสอบS. cerevisiae รายงานของเราเป็นครั้งแรกที่แสดงการแสดงออกดังกล่าวของ heterologous TrCel3B ในเอส cerevisiae การตรวจสอบของกิจกรรม cellobiase ของ recombinant สายพันธุ์โดยใช้ TrCel3B หรือ AaBGL1 ชี้ให้เห็นว่า recombinant AaBGL1 แสดงให้เห็นว่ากิจกรรม pNPGase สูงกว่าTrCel3B (รูป. 3B) เผยให้เห็นว่าเอส cerevisiae INVSc1 แสดงAaBGL1 มีความสามารถ cellobiose-เมแทบสูงกว่า TrCel3B. เพิ่มเติม ยังเผยให้เห็นตัวละคร modifi- โพสต์แปลไพเพอร์เช่นglycosylation ในโปรตีนเหล่านี้ชี้ให้เห็นการปรับเปลี่ยนโครงสร้างที่อาจจะเพิ่มศักยภาพในการทำงานของเอนไซม์ glycosylation ของ BGLs ได้รับการรายงานก่อนหน้านี้ในเอaculeatus (47) แม้ว่าปริมาณของโปรตีนที่หลั่งมาในวัฒนธรรม AaBGL1 ต่ำกว่าใน TrCel3B กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ AaBGL1 กับ pNPGlc หรือ cellobiose เห็นได้ชัดที่สูงกว่าของTrCel3B (ตารางที่ 1) ความมั่นคงของ AaBGL1 ก็ยังดีกว่าTrCel3B ภายใต้ค่า pH ต่างๆและสภาพความร้อนกระตุ้นให้เราสามารถเลือกยีสต์แสดงAaBGL1 recombinant สำหรับการใช้งานในภายหลังกระบวนการSSF

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ phylogenetic ของเราพบใหม่ b-glucosidase
T . reesei , trcel3b เป็นของกลุ่มเดียวกับ b-glucosidases Aspergillus ,
ซึ่งจัดแสดงกิจกรรมเซลโลไบเสูง ( Figs 1 และ S1 ) .
ดังนั้น cel3b ของ T . reesei ดูเหมือนว่าผู้สมัคร b-glucosidase
ดีสำหรับการทดสอบการแสดงออกของ S . cerevisiae . รายงานเป็นครั้งแรกเพื่อแสดงสีหน้าแบบนั้น

trcel3b ในชนิดของ sS . cerevisiae . การตรวจสอบกิจกรรมของเซลโลไบเของสายพันธุ์โดยใช้ recombinant
trcel3b หรือ aabgl1 พบว่า aabgl1 แนนท์
มีกิจกรรม pnpgase สูงกว่าของ
trcel3b ( รูปที่ 3B ) เปิดเผยว่า S . cerevisiae invsc1 การแสดง
aabgl1 สูงกว่าความจุมากกว่าที่เผาผลาญ trcel3b .
คุณสมบัติเพิ่มเติมยังพบไปรษณีย์ - แปลโมดิฟาย -
ชนิดเช่น glycosylation โปรตีนรีคอมบิแนนท์ ในเหล่านี้ จะปรับเปลี่ยนโครงสร้างที่อาจเพิ่ม

กิจกรรมเอนไซม์ bgls glycosylation ของได้รับการรายงานก่อนหน้านี้
. aculeatus ( 47 ) ถึงแม้ว่าปริมาณของโปรตีนที่หลั่ง
ในวัฒนธรรม aabgl1 ต่ำกว่าใน trcel3b กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ
aabgl1 กับ pnpglc หรือที่ถูกคือสูงกว่า
ของ trcel3b ( ตารางที่ 1 ) เสถียรภาพของ aabgl1 ยังเหนือกว่า
trcel3b ได้ที่ pH ต่างๆและเงื่อนไขความร้อน , แจ้งให้เราแสดง aabgl1
เลือกยีสต์โปรตีนเพื่อใช้ในกระบวนการ SSF ตามมา