2. MATERIALS AND METHODS 2.1 Fung

2. MATERIALS AND METHODS
2.1 Fungal strains andcultivation
Entomopathogenic fungi, Aschersonia
samoensis BCC 2466, Gibellula pulchra BCC 2711
and Ophiocordyceps nipponica BCC 2092, were used
for exobiopolymer production in this study. They are
deposited in BIOTEC Culture Collection, which is
publicly accessible.
2.2 Bacterial strainsandcultivation
Lactobacillus acidoplilus BCC 13839 and
Bifidobacterium animalis ATCC 25527 were used
as probiotic bacteria for the study of their growth on
different exobiopolymers as a source of prebiotics
compared with a commercial one (inulin).
2.3 Inoculum preparation
Aschersonia samoensis BCC 2466,
Ophiocordyceps nipponica BCC 2092 and Gibellula
pulchra BCC 2711 were grown initially on potato
dextroseagar(PDA)at25°Cfor5-7days. Anagarblock
(1cm3
)containingthegrowingculturewascut intosmall
piecesandtransferredto25 mlofpotatodextrosebroth
(PDB) ina250 mL Erlenmeyer flask. This liquidseed
culture was incubated for 5-7 days at 25 °C on a rotary
shaker (200 rpm) (New Brunswick, NJ, USA).
L. acidophilus BCC 13839 and B. animalis
ATCC 25527 were pre-grown in MRS broth (Merck,
Germany)and DifcoTM Reinforced Clostridial medium,
respectivelyat 37o
C for 24-48 h.
2.4 Fermentationconditions
Optimizationof Exopolysaccharide Production
A full factorial design was used to determine
theoptimalcarbonandnitrogensources. Twentyg×L-1
carbon (galactose, glucose, lactose, maltose, mannose,
sucrose, fructose) and 10 g×L-1 nitrogen sources
(NH4
H2
PO4
, (NH4
)
2
SO4
, malt extract, peptone, yeast
extract,meatextract,cornsteepsolid,NaNO3
,NH4
NO3
,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ 2.1 เชื้อราสายพันธุ์ andcultivation เชื้อรา Entomopathogenic, Aschersoniasamoensis สำเนาลับถึง 2466, Gibellula pulchra 2711 สำเนาลับถึงและใช้ Ophiocordyceps nipponica BCC 2092สำหรับการผลิต exobiopolymer ในการศึกษานี้ พวกเขาจะฝากใน BIOTEC วัฒนธรรมชุด ซึ่งเป็นทั่วไปสามารถเข้าถึง2.2 แบคทีเรีย strainsandcultivationAcidoplilus แลคโตบาซิลลัส BCC 13839 และใช้ animalis Bifidobacterium ATCC 25527เป็นโปรไบโอติกส์แบคทีเรียเจริญเติบโตของพวกเขาในการศึกษาexobiopolymers ต่าง ๆ เป็นแหล่งของ prebioticsเมื่อเทียบกับการพาณิชย์หนึ่ง (inulin) 2.3 เตรียม inoculumSamoensis Aschersonia BCC 2466Ophiocordyceps nipponica BCC 2092 และ Gibellulapulchra BCC 2711 ได้ปลูกครั้งแรกในมันฝรั่งdextroseagar (PDA) at25 ° 7 เดย์ Cfor5 Anagarblock(1 ซม. 3) containingthegrowingculturewascut intosmallpiecesandtransferredto25 mlofpotatodextrosebroth(PDB) ina250 มล Erlenmeyer หนาว Liquidseed นี้วัฒนธรรมถูก incubated สำหรับ 5-7 วันที่ 25 ° C ในแบบโรตารี่เชคเกอร์ (200 รอบต่อนาที) (รัฐนิวบรันสวิก NJ สหรัฐอเมริกา)L. acidophilus BCC 13839 และเกิด animalisATCC 25527 ก่อนถูกปลูกในซุป MRS (เมอร์คเยอรมนี) และ DifcoTM เสริม Clostridial กลางrespectivelyat 37oC ใน 24-48 h 2.4 Fermentationconditionsผลิต Optimizationof Exopolysaccharide ใช้เพื่อกำหนดแบบเต็มแฟกtheoptimalcarbonandnitrogensources Twentyg ซื้อ L-1คาร์บอน (กาแล็กโทส กลูโคส ย่อยแลคโตส maltose, mannoseซูโครส ฟรักโทส) และแหล่งไนโตรเจน× L 1 g 10(NH4H2หว่าน, (NH4)2SO4มอลต์สกัด ยีสต์ peptoneแยก meatextract, cornsteepsolid, NaNO3, NH4NO3,

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สายพันธุ์เชื้อรา andcultivation
เชื้อราแมลง, Aschersonia
samoensis BCC 2466, Gibellula รวี BCC 2711
และ Ophiocordyceps Nipponica BCC 2092 ถูกนำมาใช้
สำหรับการผลิต exobiopolymer ในการศึกษานี้ พวกเขาจะ
ไปฝากไว้ในไบโอเทคเก็บวัฒนธรรมซึ่งเป็น
ที่สาธารณชนสามารถเข้าถึง.
2.2 strainsandcultivation แบคทีเรีย
แลคโตบาซิลลัส acidoplilus BCC 13839 และ
Bifidobacterium animalis ATCC 25527 ถูกนำมาใช้
เป็นเชื้อแบคทีเรียโปรไบโอติกสำหรับการศึกษาการเจริญเติบโตของพวกเขาใน
exobiopolymers แตกต่างกันตามแหล่งที่มาของ prebiotics
เมื่อเทียบกับหนึ่งในเชิงพาณิชย์ ( อินนูลิน).
2.3 การเตรียมเชื้อ
Aschersonia samoensis BCC 2466,
Ophiocordyceps Nipponica BCC 2092 และ Gibellula
รวี BCC 2711 ที่ปลูกครั้งแรกในมันฝรั่ง
dextroseagar (PDA) AT25 ° Cfor5-7days Anagarblock
(1cm3
) containingthegrowingculturewascut intosmall
piecesandtransferredto25 mlofpotatodextrosebroth
(PDB) ina250 มิลลิลิตรขวดรูปกรวย liquidseed นี้
วัฒนธรรมได้รับการบ่มเป็นเวลา 5-7 วันที่ 25 ° C ในหมุน
ปั่น (200 รอบต่อนาที) (นิวบรุน, นิวเจอร์ซีย์, ประเทศสหรัฐอเมริกา).
ลิตร acidophilus BCC 13839 และ B animalis
ATCC 25527 ได้รับก่อนที่ปลูกในน้ำซุป MRS (เมอร์ค,
เยอรมนี) และขนาดกลาง DifcoTM เสริม Clostridial,
respectivelyat 37o
เซลเซียสเป็นเวลา 24-48 ชม.
2.4 Fermentationconditions
Optimizationof สร้าง Exopolysaccharide ผลิต
ออกแบบเต็มปัจจัยที่ถูกใช้ในการกำหนด
theoptimalcarbonandnitrogensources . Twentyg × L-1
คาร์บอนไดออกไซด์ (กาแลคน้ำตาลแลคโตส, มอลโตส, แมนโนส,
น้ำตาลฟรุกโตส) และ 10 กรัม× L-1 แหล่งไนโตรเจน
(NH4
H2
PO4
(NH4
)
2
SO4
, สารสกัดจากมอลต์, เปปโตนยีสต์
สกัด meatextract , cornsteepsolid, NaNO3
, NH4
NO3
,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ andcultivation

2.1 เชื้อราสายพันธุ์แมลงที่ตาย เชื้อรา มีการเรียนรู้ samoensis BCC
,
gibellula พัลชรา BCC และหน้าต่าง ophiocordyceps nipponica BCC 2092 , ถูกใช้สำหรับการผลิต exobiopolymer
ในการศึกษานี้ พวกเขาจะฝากในวัฒนธรรมของสะสม

ชีวภาพที่สาธารณชนสามารถเข้าถึงได้ strainsandcultivation
.
2.2 เชื้อแบคทีเรีย Lactobacillus acidoplilus BCC และ
13839ไบฟิโดแบคทีเรียและสัตว์ 25527 ใช้
เป็นแบคทีเรียโปรไบโอติกสำหรับการเจริญเติบโตของพวกเขาใน
exobiopolymers แตกต่างกันเป็นแหล่งที่มาของพรีไบโอติก
เมื่อเทียบกับการค้า ( อินูลิน )
3
samoensis BCC 2.3 การเตรียมอาหารการเรียนรู้
ophiocordyceps , nipponica BCC 2092 gibellula
พัลชรา BCC และหน้าต่างที่ปลูกในครั้งแรกใน dextroseagar
( มันฝรั่ง at25 PDA ) โดย cfor5-7days . anagarblock
( 1cm3
) containingthegrowingculturewascut intosmall piecesandtransferredto25 mlofpotatodextrosebroth

( PDB ) เออร์เลนเมเยอร์ ina250 มล. ขวด นี้ liquidseed
วัฒนธรรมถูกบ่มไว้ 5-7 วัน ที่อุณหภูมิ 25 ° C ในเครื่องปั่นหมุน
( 200 รอบต่อนาที ) ( New Brunswick , NJ , USA ) .
L . acidophilus และ BCC 13839 พ. สัตว์
ATCC 25527 ถูกก่อนปลูกใน MRS broth ( เมอร์ค
, เยอรมนี ) และ difcotm clostridial
เสริมกลางrespectivelyat 37o
c 24-48 ชั่วโมง


ใช้ 2.4 fermentationconditions optimizationof การผลิตเต็มช่วงออกแบบศึกษา
theoptimalcarbonandnitrogensources . twentyg × L-1
คาร์บอน ( galactose , น้ำตาลแลคโตส , มอลโตส , แมน
ซูโครส ฟรักโทส และ 10 กรัม× L-1 ไนโตรเจน ( NH4 po4 H2



( NH4
)
2

ปา สารสกัด extract สารสกัดจากมอลต์ , ยีสต์ meatextract
, ,cornsteepsolid NaNO3 , NH4
3

, ,