After this initial MS identificatio

After this initial MS identification, we considered the crossreactivity of the crayfish proteins by western blot analysis using anti-hemocyanin antiserum raised against hemolymph hemocyanin of the shrimp Penaeus semisulcatus (Tom et al., 1993) (Fig.2A). The antibodies cross-reacted with both hemolymph and gastrolith hemocyanins from our crayfish but not with BSA, a negative control. We then employed the antibodies in an immunohistochemical assay
performed on sections of decalcified gastrolith pouches. Hematoxylin and eosin (H&E) staining (Fig.2B, left panel) shows the chitin layers forming the gastrolith matrix surrounded by the gastrolith-forming epithelium and its attached connective tissue. Green fluorescence indicates that the protein is present throughout the width of the chitinous structure but is especially concentrated along specific chitin layers (Fig.2B, middle image). Weak
immunostaining was also observed in the cytoplasm but not in the nuclei of the gastrolith-forming epithelium cells, while a stronger reaction was seen in the surrounding connective tissue (Fig.2B, middle and right panels).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

หลังจากระบุ MS นี้ครั้งแรก เราถือ crossreactivity ของเปลือกโปรตีน โดยการวิเคราะห์น้าตะวันตกใช้ antiserum hemocyanin ต้านขึ้นกับ hemocyanin hemolymph ของกุ้งกุ้งกุลา semisulcatus (ทอม et al. 1993) (Fig.2A) แอนติบอดีที่ cross-reacted กับ hemocyanins hemolymph และ gastrolith จากกุ้งของเรา แต่ไม่ มีบีเอส เอ ตัวควบคุมเชิงลบ เราใช้แอนติบอดีในการทดสอบน่าแล้วดำเนินการในส่วนของกระเป๋า decalcified gastrolith Hematoxylin และ eosin (H & E) ย้อมสี (Fig.2B แผงด้านซ้าย) แสดงชั้น chitin ขึ้นรูปเมตริกซ์ gastrolith epithelium gastrolith ขึ้นรูปและเนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่แนบ เรืองแสงสีเขียวบ่งชี้ว่า โปรตีนมีอยู่ตลอดความกว้างของโครงสร้าง chitinous แต่มีความเข้มข้นโดยเฉพาะอย่างยิ่งตามชั้นเฉพาะ chitin (Fig.2B กลางภาพ) อ่อนแอimmunostaining ถูกสังเกต ในพลาสซึม แต่ไม่ใช่ ในนิวเคลียสรูป gastrolith epithelium เซลล์ ในขณะที่เห็นปฏิกิริยาที่แข็งแกร่งในเนื้อเยื่อเกี่ยวพันรอบ (Fig.2B แผงกลาง และขวา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

หลังจากที่บัตรประจำตัว MS ครั้งแรกนี้เราถือว่าปฏิกิริยาข้ามกันของโปรตีนกุ้งโดยการวิเคราะห์ดวงตะวันโดยใช้ antiserum ป้องกัน hemocyanin ขึ้นกับ hemocyanin เลือดของกุ้งกุลาดำ Penaeus semisulcatus (ทอม et al., 1993) (Fig.2A) แอนติบอดีข้ามปฏิกิริยากับทั้งเลือดและ gastrolith hemocyanins จากกุ้งของเรา แต่ไม่ได้มีบีเอสเอ, การควบคุมเชิงลบ จากนั้นเราลูกจ้างแอนติบอดีในการทดสอบ immunocytochemistry ของ
การดำเนินการในส่วนของกระเป๋า gastrolith decalcified Hematoxylin และ Eosin (H & E) การย้อมสี (Fig.2B, แผงด้านซ้าย) แสดงให้เห็นชั้นไคตินขึ้นรูปเมทริกซ์ gastrolith ล้อมรอบด้วยเยื่อบุผิว gastrolith ขึ้นรูปและเนื้อเยื่อเกี่ยวพันแนบ เรืองแสงสีเขียวแสดงว่าโปรตีนเป็นปัจจุบันตลอดความกว้างของโครงสร้างหนา ๆ แต่มีความเข้มข้นโดยเฉพาะตามชั้นไคตินที่เฉพาะเจาะจง (Fig.2Bภาพกลาง) อ่อนแอ
immunostaining ยังพบว่าในพลาสซึม แต่ไม่ได้อยู่ในนิวเคลียสของเซลล์เยื่อบุผิว gastrolith ขึ้นรูปในขณะที่ปฏิกิริยาที่แข็งแกร่งที่เห็นในเนื้อเยื่อเกี่ยวพันรอบ (Fig.2Bแผงกลางและขวา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลังจากการเริ่มต้นของ MS เราถือว่า crossreactivity ของกุ้งโดยการวิเคราะห์ Western blot โดยใช้โปรตีนต่อต้านเชื้อฮีโมไซยานินเลี้ยงกับฮีโมไซยานิน เลือดของกุ้ง Penaeus ลาย ( ทอม et al . , 1993 ) ( รูปที่ 2A ) แอนติบอดีที่ทำปฏิกิริยากับเลือด ข้ามทั้งกึ๋นและ hemocyanins จากกุ้งของเรา แต่ไม่ใช่กับ BSA , ควบคุมลบ เราใช้แอนติบอดีในการทดสอบสำหรับทำในส่วนของร่มเงาถุงปุ๋ย . ย้อมและ eosin ( H & E ) ย้อมสี ( รูปที่ 2B แผงด้านซ้าย ) แสดงให้เห็นว่าไคตินชั้นสร้างกึ๋นเมทริกซ์ล้อมรอบด้วยกึ๋นสร้างเนื้อเยื่อประสาทและแนบเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน เรืองแสงสีเขียวแสดงว่าโปรตีนเป็นปัจจุบันตลอดความกว้างของโครงสร้าง chitinous แต่โดยเฉพาะอย่างยิ่งเป็นกระจุกตามชั้น ไคตินที่เฉพาะเจาะจง ( รูปที่ 2B , ภาพกลาง ) อ่อนแอimmunostaining ถูกพบใน cytoplasm แต่ไม่ได้อยู่ในนิวเคลียสของเซลล์บุผิวกึ๋นขึ้นในขณะที่ปฏิกิริยาที่แข็งแกร่งอยู่ในเนื้อเยื่อโดยรอบ ( รูปที่ 2B , กลางและแผงด้านขวา )