5.01 Harvest cells from the interfa

5.01 Harvest cells from the interface of the ficoll layer and wash the cells 2x with RPMI
1640 medium. On the last wash transfer cells to a 15ml conical test tube, obtain an
accurate, viable cell count, and then spin at 800xg for 10 min. Remove all of the
RPMI medium.
5.02 Resuspend the pellet in 2.5ml of a 0.1% BSA/PBS solution at room temperature.
This is to wash out any remaining RPMI and to get the cells prepared for staining.
5.03 Centrifuge cells at 800xg for 10 min. and decant.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

5.01 เก็บเกี่ยวเซลล์จากอินเตอร์เฟซของชั้น ficoll และล้างเซลล์ 2 x กับ RPMI1640 ปานกลาง บนสุดท้ายล้างถ่ายโอนเซลล์ 15 มล.กรวยหลอด ขอรับการจำนวนเซลล์ที่ถูกต้อง ทำงาน และวาดแล้ว 800xg สำหรับ 10 นาทีเอาออกทั้งหมดRPMI ปานกลาง5.02 resuspend เม็ดใน 2.5 มล.ของบีเอส เอ/PBS 0.1% ที่อุณหภูมิห้องนี้คือ การล้างออก RPMI ใด ๆ เหลืออยู่ และ จะได้รับพร้อมสำหรับการย้อมสีเซลล์5.03 เครื่องหมุนเหวี่ยงเซลล์ที่ 800xg 10 นาที และคะแนนเฉลี่ย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

5.01 เซลล์เก็บเกี่ยวจากอินเตอร์เฟซของชั้น Ficoll และล้างเซลล์ 2x กับ RPMI
1640 กลาง ในการถ่ายโอนเซลล์สุดท้ายที่จะล้างหลอดทดลอง 15ml กรวยได้รับ
ถูกต้องนับเซลล์ทำงานได้แล้วหมุน 800xg เป็นเวลา 10 นาที ลบทั้งหมดของ
กลาง RPMI.
5.02 Resuspend เม็ดใน 2.5ml ของบีเอสเอ 0.1% วิธีการแก้ปัญหา / พีบีเอสที่อุณหภูมิห้อง.
นี้คือการล้างออกใด ๆ ที่เหลือ RPMI และเพื่อให้ได้เซลล์ที่เตรียมไว้สำหรับการย้อมสี.
5.03 เซลล์แปะที่ 800xg 10 นาที และค่อยๆริน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

5.01 เก็บเกี่ยวเซลล์จากอินเตอร์เฟซของ ficoll ชั้นล้างเซลล์ RPMI 2x กับ1 , 640 ) ในการล้างเซลล์สุดท้าย เพื่อพิสูจน์ทดสอบทาหลอดได้รับถูกต้องนับเซลล์ได้ จากนั้นหมุนที่ 800xg 10 นาทีลบทั้งหมดของRPMI ปานกลาง5.02 resuspend เม็ดใน 2.5 มิลลิลิตรของสารละลาย 0.1% BSA / พีบีเอส ที่อุณหภูมิห้องนี้คือการล้างออก RPMI ที่เหลือใด ๆและเพื่อให้ได้เซลล์เตรียม stainingเซลล์ที่ 800xg 5.03 centrifuge เป็นเวลา 10 นาที และริน