Cell Culture and BiocompatibilityAb

Cell Culture and Biocompatibility

Ability of A. atlas fibers to support the attachment and growth of mouse fibroblast cells was studied in compar- ison to the common B. mori silk. Silk fibers were com- pressed into a sheet and sterilized in an autoclave at
120 °C. Samples were accurately weighted and placed in a 24-well culture plate and incubated with NIH3T3 mouse fibroblast cells at a concentration of 1.5 × 105 cells mL−1 DMEM media containing 4 mM l-glutamine,
10 % calf serum, and 1.0 % of 104 μg/mL penicillin/ streptomycin were added into each well and the plates were incubated at 37 °C and 5 % CO2 up to 11 days. Me- dia was refreshed every 3 days. After the desired length of incubation, the samples were transferred to a new culture plate and the unattached cells were removed by rinsing with phosphate buffered saline. Metabolic ac- tivities of the cells on the silk fibers were measured us- ing a MTS assay. To perform the assay, about 0.5 mL per well of 20 % MTS solution in DMEM media was added into each well and incubated for 3 h. After 3 h, 150 μL of DMEM was collected into a 96-well plate and the ab- sorbance of the solution was read on a Mutiwell plate reader (Thermoscientific Model: Multiskan) at a wave- length of 490 nm to obtain the optical densities. Blank samples without any cells were also tested and used as control. At least four samples were tested for each time point and the experiments were repeated twice. The av- erage optical density of the cells with ± one standard de- viation are reported.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพาะเลี้ยงเซลล์และ Biocompatibilityความสามารถของเส้นใยแอตลาสอ.เพื่อสนับสนุนสิ่งที่แนบมาและเจริญเติบโตของเซลล์ fibroblast ของเมาส์ถูกศึกษาใน compar-ison การไหมโมริเกิดทั่วไป เส้นใยไหมได้ com-กดลงแผ่น และ sterilized ในด้วยการที่120 องศาเซลเซียส ตัวอย่างได้อย่างถูกต้องถ่วงน้ำหนักวางจาน 24 ดีวัฒนธรรม และ incubated เซลล์ fibroblast เมาส์ NIH3T3 ที่ความเข้มข้น 1.5 × 105 เซลล์ mL−1 DMEM สื่อประกอบด้วย 4 มม. l glutamineเซรั่มลูก 10% และ 1.0% ของยาเพนนิซิลลิน μg/mL 104 / streptomycin ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละบ่อ และแผ่นก็ incubated ที่ 37 ° C และ 5% CO2 ขึ้น 11 วัน ฉัน-dia ถูกรีเฟรชทุก ๆ 3 วัน หลังจากที่ความยาวที่ต้องบ่มเพาะวิสาหกิจ ตัวอย่างถูกโอนย้ายไปที่จานวัฒนธรรมใหม่ และเซลล์ unattached ถูกลบ โดยการล้างด้วยน้ำเกลือฟอสเฟต buffered Ac tivities เผาผลาญของเซลล์ในเส้นใยไหมที่วัดเรา-ไอเอ็นจีวิเคราะห์ MTS ดำเนินการทดสอบ ประมาณ 0.5 mL ต่อดีของ MTS 20% DMEM สื่อถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละบ่อ และ incubated สำหรับ 3 h หลังจาก 3 h, 150 μL ของ DMEM รวบรวมลงในแผ่นดี 96 และ sorbance ab ของโซลูชันถูกอ่านในเครื่องอ่านแผ่น Mutiwell (รุ่น Thermoscientific: Multiskan) ที่ความยาวคลื่นของ 490 nm เพื่อให้ได้ความหนาแน่นออปติคัล ตัวอย่างว่างเปล่าไม่ มีเซลล์ใด ๆ ยังถูกทดสอบ และใช้เป็นตัวควบคุม ตัวอย่างที่ 4 ทดสอบแต่ละจุดเวลา และทดลองถูกทำซ้ำสองครั้ง มีรายงานความหนาแน่นของแสง av erage ของเซลล์ที่มี±หนึ่งมาตรฐานเดอ-viation

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเพาะเลี้ยงเซลล์และ biocompatibility ความสามารถของเอเส้นใยแผนที่จะสนับสนุนสิ่งที่แนบมาและการเจริญเติบโตของเซลล์ fibroblast เมาส์ได้รับการศึกษาใน ISON compar- จะพบบีผ้าไหมสุดตา เส้นใยผ้าไหมถูกสั่งอัดเป็นแผ่นและฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดันที่120 องศาเซลเซียส ตัวอย่างที่ได้ถ่วงน้ำหนักอย่างถูกต้องและอยู่ในแผ่นวัฒนธรรม 24 หลุมและบ่มกับเซลล์ fibroblast NIH3T3 เมาส์ที่ความเข้มข้น 1.5 × 105 เซลล์ mL-1 สื่อ DMEM ที่มี 4 มิลลิ l-glutamine, เซรั่มลูกวัว 10% และ 1.0% ของ 104 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรยา / streptomycin ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละจานที่ดีและได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและ 5% CO2 ได้ถึง 11 วัน เลืเส้นผ่าศูนย์กลางได้รับการฟื้นฟูทุก 3 วัน หลังจากที่มีความยาวที่ต้องการของการบ่มตัวอย่างถูกโอนไปยังแผ่นวัฒนธรรมใหม่และเซลล์โสดถูกถอดออกโดยการล้างด้วยน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ tivities ทําการเผาผลาญของเซลล์ในเส้นใยผ้าไหมวัด US-ไอเอ็นจีเอ็มทีเอทดสอบ ที่จะดำเนินการทดสอบประมาณ 0.5 มิลลิลิตรต่อกัน 20% วิธีการแก้ปัญหาเอ็มทีเอในสื่อ DMEM ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีและบ่มเป็นเวลา 3 ชั่วโมง หลังจาก 3 ชั่วโมง 150 ไมโครลิตรของ DMEM เก็บเป็นแผ่น 96 หลุมและ sorbance AB- ของการแก้ปัญหาที่ถูกอ่านบนเครื่องอ่านแผ่น Mutiwell (Thermoscientific แบบ: Multiskan) ที่มีความยาว wave- 490 นาโนเมตรที่จะได้รับความหนาแน่นออปติคอล . ตัวอย่างที่ว่างเปล่าโดยไม่ต้องผ่านการทดสอบเซลล์ใด ๆ และยังถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม อย่างน้อยสี่กลุ่มตัวอย่างได้รับการตรวจจุดในแต่ละครั้งและการทดลองที่ถูกซ้ำกันสองครั้ง ความหนาแน่นของออปติคอล AV- erage ของเซลล์ที่มี±หนึ่งเบี่ยงเบนมาตรฐานจะมีการรายงาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เซลล์วัฒนธรรมและ biocompatibility

ความสามารถของ แอทลาส เส้นใยเพื่อสนับสนุนสิ่งที่แนบและการเจริญเติบโตของเมาส์เซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันเพื่อ compar - อีสันจะพบ บี โมริ ผ้าไหม ผ้าไหมเป็นเส้นใย com - รีดเป็นแผ่นและฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดันที่
120 องศาจำนวนถูกต้องถ่วงน้ำหนักและวางไว้ในจาน 24 ด้วยวัฒนธรรมและบ่มด้วย nih3t3 เมาส์เซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพันที่ความเข้มข้น 1.5 × 105 เซลล์ ml − 1 dmem สื่อประกอบด้วย Glutamine 4 มม.
10% ซีรัมลูกโคและ 1.0% 104 μ g / ml เพนนิซิลลิน / ยารักษาถูกเพิ่มลงในแต่ละแผ่นถูกดีและ บ่มที่ 37 ° C และ 5% CO2 ได้ถึง 11 วัน ผม - เขาถูกฟื้นฟู ทุก 3 วันตามความยาวที่ต้องการของการบ่ม ตัวอย่างที่ถูกโอนไปยังจานวัฒนธรรมใหม่และเซลล์อิสระถูกเอาออก โดยล้างด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ AC - tivities การเผาผลาญของเซลล์ในเส้นใยไหมวัดเรา - ing ( เอ็มทีเอ . ทำการวิเคราะห์เกี่ยวกับ 0.5 มิลลิลิตร / ดี 20% เอ็มทีโซลูชั่นใน dmem สื่อถูกเพิ่มลงในแต่ละ และบ่มเป็นเวลา 3 ชั่วโมงหลังจาก 3 H , 150 μ l dmem ถูกเก็บลงใน 96 ดีจานและ AB - sorbance ของสารละลายที่อ่านใน mutiwell จานอ่าน ( thermoscientific รุ่น : multiskan ) ที่ความยาวของคลื่น - 490 nm เพื่อให้ได้ความหนาแน่นเชิงแสง ตัวอย่างที่ว่างเปล่าปราศจากเซลล์ถูกทดสอบ และใช้ควบคุม อย่างน้อยสี่คน ทดสอบแต่ละจุดเวลา และการทดลองซ้ำ 2 ครั้งAV - erage แสงความหนาแน่นของเซลล์ที่มี±มาตรฐานหนึ่งของ de - viation

รายงาน