2.5. Agarose bead cultureMixtures o

2.5. Agarose bead culture
Mixtures of protoplasts and agarose were prepared as above
although using Y3A liquid medium supplemented with the optimal
PGRs and 0.6% (w/v) SeaPlaque agarose. Agarose beads were
prepared by dropping 200 l of the mixture into a 90 mm
×
15 mm
Petri dish. After agarose solidification, 10 ml of 21% (w/v)
osmoticum solution (sucrose, glucose or mannitol; adjusted to pH
5.7 and filter sterilized) was added to each dish and incubated at
28 ◦C in the dark for 3–5 days. The osmoticum solution was replaced
with Y3A liquid medium at 14-day intervals, and incubated as
above with agitation at 50 rpm. If microcolonies developed, the
Y3A liquid medium was replaced with Y3 liquid medium and the
agarose beads were cultured until microcalli formed. The agarose
beads were then cultured in Y35N5D2iP liquid medium supplemented
with different concentrations of ascorbic acid (50, 100,
150, 200 and 400 mg/l), AgNO3 (5, 10 and 15 mg/l) and activated
charcoal (0.1, 0.3, 0.5 and 1.0 g/l) until embryogenic calli were
observed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 วัฒนธรรมลูกปัด agarose
ผสม protoplasts และ agarose ได้เตรียมดังกล่าว
แม้ว่าการใช้ y3a เหลวเสริมด้วยที่ดีที่สุด
pgrs และ 0.6% (w / v) seaplaque agarose ลูกปัด agarose
ถูกจัดทำขึ้นโดยลดลง 200 ลิตรผสมลงใน 90 มิลลิเมตร
a-

15 มม. จานเพาะเชื้อ หลังจากการแข็งตัว agarose 10 มล. 21% (w / v)
แก้ปัญหา osmoticum (ซูโครสกลูโคสหรือแมนนิทอล; ปรับ ph
52.5 วัฒนธรรมลูกปัด agarose
ผสม protoplasts และ agarose ได้เตรียมดังกล่าว
แม้ว่าการใช้ y3a เหลวเสริมด้วยที่ดีที่สุด
pgrs และ 0.6% (w / v) seaplaque agarose ลูกปัด agarose
ถูกจัดทำขึ้นโดยลดลง 200 ลิตรผสมลงใน 90 มิลลิเมตร
a-

15 มม. จานเพาะเชื้อ หลังจากการแข็งตัว agarose 10 มล. 21% (w / v)
แก้ปัญหา osmoticum (ซูโครสกลูโคสหรือแมนนิทอล; ปรับ ph
57 และกรองฆ่าเชื้อ) ถูกบันทึกอยู่ในอาหารแต่ละจานและบ่มที่
28 ◦ C ในที่มืดสำหรับ 3-5 วัน การแก้ปัญหา osmoticum ถูกแทนที่ด้วย
y3a เหลวในช่วง 14 วันและบ่มเป็น
ข้างต้นด้วยความตื่นเต้นที่ 50 รอบต่อนาที ถ้า microcolonies พัฒนา
y3a เหลวถูกแทนที่ด้วยอาหารเหลวและ y3
ลูกปัด agarose เพาะเลี้ยงจน microcalli เกิดขึ้น agarose
ลูกปัดถูกแล้วที่เลี้ยงในอาหารเหลว y35n5d2ip เสริม
มีความเข้มข้นแตกต่างกันของวิตามินซี (50, 100, 150
, 200 และ 400 mg / l) AgNO3 (5, 10 และ 15 mg / l) และเปิดใช้งาน
ถ่าน (0.1, 0.3, 0.5 และ 1.0 g / l) จนกระทั่งแคลลัสมี embryogenic
สังเกต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 Agarose ลูกปัดวัฒนธรรม
ได้เตรียมส่วนผสมของโปและ agarose ดังกล่าว
แม้ว่าใช้ Y3A เสริมขนาดกลางของเหลวดีที่สุด
PGRs และ agarose SeaPlaque 0.6% (w/v) มีประคำ Agarose
เตรียม โดยผสม 200 ลิตรเป็น 90 มม.
การ
15 มม.
จานเพาะเชื้อ หลังจาก agarose solidification, ml 10 21% (w/v)
osmoticum โซลูชั่น (ซูโครส กลูโคส หรือ mannitol ปรับปรุงค่า pH
52.5 Agarose ลูกปัดวัฒนธรรม
ได้เตรียมส่วนผสมของโปและ agarose ดังกล่าว
แม้ว่าใช้ Y3A เสริมขนาดกลางของเหลวดีที่สุด
PGRs และ agarose SeaPlaque 0.6% (w/v) มีประคำ Agarose
เตรียม โดยผสม 200 ลิตรเป็น 90 มม.
การ
15 มม.
จานเพาะเชื้อ หลังจาก agarose solidification, ml 10 21% (w/v)
osmoticum โซลูชั่น (ซูโครส กลูโคส หรือ mannitol ปรับปรุงค่า pH
57 และกรอง sterilized) ถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละจาน และ incubated ที่
◦C 28 ในมืดวัน 3–5 โซลูชั่น osmoticum ถูกแทน
กับ Y3A ของเหลวปานกลางในช่วง 14 วัน และ incubated เป็น
ข้างบน มีอาการกังวลต่อที่ 50 รอบต่อนาที ถ้า microcolonies พัฒนา การ
Y3A กลางของเหลวถูกแทนที่ ด้วย Y3 เหลวปานกลางและ
ประคำ agarose มี cultured จนกว่ารูปแบบ microcalli ใน agarose
ลูกปัดแล้วมี cultured ใน Y35N5D2iP เหลวเสริม
กับความเข้มข้นแตกต่างกันของกรดแอสคอร์บิค (50, 100,
150, 200 และ 400 mg/l), AgNO3 (5, 10 และ 15 mg/l) และเรียกใช้งาน
ถ่าน (0.1, 0.3, 0.5 และ 1.0 g/l) จนได้เยื่อ calli
สังเกต