Live-cell Time-lapse ImagingME-180

Live-cell Time-lapse Imaging
ME-180 cells were grown overnight in 35 mm poly-D-lysinecoated
glass-bottom dishes (MatTek Corp., Ashland, MA, USA) to
a non-confluent monolayer. At the start of the assay, cells were
washed once and then transferred to a live-cell incubator that was
connected to an inverted microscope (Cell Observer, Carl Zeiss).
The cells were maintained at 37uC in 5% CO2 throughout the
microscopy process. Ten randomly selected positions (each
containing 20–50 cells in the field of vision) were observed with
a 206 objective for 16 hours. Differential interference contrast
(DIC) images were taken every 10 minutes for each of the positions
that were randomly chosen. Data were collected from three
independent experiments, and a total of 36300 cells were counted
for each of the four types of conditions that were examined,
namely, ME-180 cells alone and ME-180 cells that had been
colonized with each of the three different Lactobacillus strains that
were assessed in this study.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สดเซลล์เว้นช่วงเวลาการถ่ายภาพ
ME-180 เซลล์ที่ปลูกในชั่วข้ามคืนใน 35 มมโพลี-D-lysinecoated
จานแก้วล่าง (Mattek คอร์ป, แอช, MA, USA) เพื่อ
monolayer ที่ไม่ได้ไหลมารวมกัน ในช่วงเริ่มต้นของการทดสอบเซลล์ถูก
ล้างครั้งเดียวและจากนั้นก็ย้ายไปที่ศูนย์บ่มเพาะสดเซลล์ที่ได้รับการ
เชื่อมต่อกับกล้องจุลทรรศน์คว่ำ (สังเกตเซลล์ Carl Zeiss).
เซลล์ที่ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 37uC ใน CO2 5% ตลอดทั้ง
กระบวนการกล้องจุลทรรศน์ สิบตำแหน่งสุ่มเลือก (แต่ละ
ที่มี 20-50 เซลล์ในด้านการมองเห็น) ถูกตั้งข้อสังเกตกับ
วัตถุประสงค์ 206 16 ชั่วโมง ความคมชัดของสัญญาณรบกวนที่แตกต่างกัน
(DIC) ภาพที่ถูกนำทุก 10 นาทีสำหรับแต่ละตำแหน่ง
ที่ได้รับการสุ่มเลือก เก็บรวบรวมข้อมูลจากสาม
ทดลองที่เป็นอิสระและรวมของ 36,300 เซลล์นับ
สำหรับแต่ละสี่ประเภทของเงื่อนไขที่ได้รับการตรวจสอบ
คือเซลล์ ME-180 เพียงอย่างเดียวและเซลล์ ME-180 ที่ได้รับการ
ตกเป็นเมืองขึ้นกับแต่ละแห่งที่สามที่แตกต่างกัน สายพันธุ์แลคโตบาซิลลัสที่
ได้รับการประเมินในการศึกษานี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เวลาล่วงเลยภาพถ่าย
me-180 มีชีวิตเซลล์เซลล์เติบโตค้างคืนใน 35 มม. poly-d-lysinecoated
อาหารก้นแก้ว ( mattek คอร์ป แอชแลนด์ , MA , USA )

ไม่ใช่ที่ไหลไปด้วยกันอย่าง . ที่เริ่มต้นของการตรวจสอบเซลล์มี
ล้างอีกครั้งและจากนั้นย้ายไปอยู่ ตู้ฟักไข่ เซลล์ที่เชื่อมต่อกับกล้องจุลทรรศน์
กลับ ( เซลล์สังเกต
, Carl Zeiss )เซลล์ที่ถูกเก็บรักษาไว้ที่ 37uc ในคาร์บอนไดออกไซด์ 5% ตลอด
กระบวนการกล้องจุลทรรศน์ . สิบสุ่มตำแหน่งแต่ละ
ที่มี 20 – 50 เซลล์ในเขตของวิสัยทัศน์ ) พบกับ
206 วัตถุประสงค์ 16 ชั่วโมง ค่ารบกวนความคมชัด
( DIC ) ภาพที่ถ่ายทุก 10 นาทีสำหรับแต่ละตำแหน่ง
ที่ถูกสุ่มเลือก เก็บรวบรวมข้อมูลจากการทดลอง 3
อิสระและทั้งหมดของ 36300 cells นับ
สำหรับแต่ละสี่ประเภทของเงื่อนไขที่ถูกตรวจสอบ ,
( me-180 เซลล์คนเดียว และ me-180 เซลล์ที่ได้รับ
colonized กับแต่ละสามแตกต่างกันแลคโตบาซิลลัสสายพันธุ์
ประเมินได้ในการศึกษานี้