Screening of plant probiotic activi

Screening of plant probiotic activities
The ability of isolates to fix atmospheric N2 was tested in screw-cap
test tubes containing nitrogen-free semisolid NFb medium (Okon et
al., 1977). After incubation for 7-10 days at 28 °C, those isolates
showing a growth halo at variable deepness under the surface medium
were scored positive. Solubilization of mineral phosphate was
detected in agar medium containing inorganic phosphate (glucose,
10 g/L; NH4Cl, 5 g/L; NaCl, 1 g/L; MgSO4.7H2O, 1 g/L; CaHPO4,
0.8 g/L; pH 7.2) as a clear halo around the bacterial colonies after
48 h at 28°C (Kuklinsky-Sobral et al., 2004). Indoleacetic acid (IAA)
production was analyzed in the supernatant of a tryptophan-amended
medium by colorimetry with the Salkowski reagent, as described elsewhere
(Sarwar and Kremer, 1995). The adhesiveness of isolates to
an abiotic surface was studied upon static growth in polystyrene
ELISA microplates and staining of the adhered cells with crystal
violet. The amount of the surface-attached cells was proportional to
the A650 of the solution obtained after dissolving bound crystal violet
with ethanol (Jackson et al., 2002). The antagonistic activity of isolates
against phytopathogens was investigated in dual plate assays
(Ongena et al., 1999). A piece of agar with Fusarium oxysporum var.
radicis-lycopersici strain 22 mycelium or with Curvularia sp. mycelium
isolated from the CT6919 rice seeds was deposited on the center
of potato dextrose plates. After 3 days of incubation at room temperature
in the dark, each bacterial isolate was streaked on the opposite
edges of the plate (1 isolate per plate) at ca. 3 cm away from the
fungal inoculum. For antagonism to Pythium ultimum strain 67-1,
malt agar plates were first streaked with each isolate, incubated for
3 days at room temperature in the dark, and then a piece of malt
agar containing the P. ultimum mycelium was deposited on the center.
The inhibition of phytopathogen growth was determined visually after
7 days of further incubation and scored positive if the bacterial isolate
determined a growth inhibition zone due to diffusion of extracellular
metabolites. Plates without any bacterial culture served as the control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การคัดกรองของพืชกิจกรรมโปรไบโอติกทดสอบความสามารถของแยกการแก้ไขบรรยากาศ N2 ในฝาเกลียวหลอดทดลองที่ประกอบด้วยไนโตรเจนฟรี semisolid NFb ปานกลาง (Okon etal., 1977) หลังจากบ่มสำหรับ 7-10 วันที่ 28 ° C แยกเหล่านั้นแสดงรัศมีเจริญเติบโตที่รู้สึกลึกผันแปรภายใต้สื่อพื้นผิวได้คะแนนบวก Solubilization ของแร่ฟอสเฟตคือตรวจพบในอาหารที่ประกอบด้วยฟอสเฟตอนินทรีย์ (กลูโคส10 g/L NH4Cl, 5 g/L NaCl, 1 g/L MgSO4.7H2O, 1 g/L CaHPO40.8 g/L pH ที่ 7.2) เป็นรัศมีรอบ ๆ โคโลนีแบคทีเรียหลังชัดเจน48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 28° C (Kuklinsky-Sobral et al. 2004) กรด indoleacetic (IAA)การผลิตถูกวิเคราะห์ใน supernatant ของโพรไบโอแก้ไขปานกลาง โดย colorimetry ด้วยน้ำยา Salkowski ตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น(Sarwar และ Kremer, 1995) เหนียวแน่นของแยกไปเป็นศึกษาพื้นผิว abiotic ที่เมื่อเจริญเติบโตคงที่ในสไตรีนELISA microplates และการย้อมสีเซลล์ adhered กับคริสตัลสีม่วง จำนวนเซลล์ที่แนบพื้นผิวเป็นสัดส่วนกับA650 ของการแก้ปัญหาที่ได้รับหลังจากยุบสีม่วงคริสตัลถูกผูกไว้ด้วยเอทานอล (Jackson et al. 2002) กิจกรรมการต่อต้านของแยกกับ phytopathogens รับการตรวจสอบในแผ่นคู่ assays(Ongena et al. 1999) ชิ้นส่วนของวุ้นกับ Fusarium oxysporum var.สายพันธุ์ radicis-lycopersici 22 ยัง หรือยัง Curvularia spแยกจาก CT6919 ฝากเมล็ดข้าวของศูนย์มันฝรั่งแผ่นเดกซ์โทรส หลังจาก 3 วันที่อุณหภูมิห้องในมืด isolate แบคทีเรียแต่ละริ้วตรงข้ามขอบของจาน (1 isolate ต่อจาน) ที่ ca. 3 ซม.ออกจากการinoculum ของเชื้อรา สำหรับ antagonism โหมปริมาณเชื้อ Pythium ultimum 67-1ครั้งแรกถูกลายแผ่นวุ้นมอลต์กับแต่ละ isolate ได้รับการกก3 วันที่อุณหภูมิห้องในมืด และชิ้นส่วนของมอลต์วุ้นที่ประกอบด้วยยัง P. ultimum ฝากของศูนย์การยับยั้งการเจริญเติบโต phytopathogen สายตาหลังจากกำหนด7 วันของการกกไข่และถ้าบวกประตูแบคทีเรียแยกกำหนดโซนการยับยั้งการเจริญเติบโตเนื่องจากการแพร่ของสารสาร แผ่นไม่ มีวัฒนธรรมใดแบคทีเรียทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจคัดกรองของพืชกิจกรรมโปรไบโอติก
ความสามารถของเชื้อที่จะแก้ไขบรรยากาศ N2 ได้รับการทดสอบในสกรูฝาครอบ
หลอดทดสอบที่มีขนาดกลาง NFB ไนโตรเจนฟรี semisolid (Okon et
al., 1977) หลังจากฟักตัว 7-10 วันที่ 28 ° C, สายพันธุ์เหล่านั้น
แสดงให้เห็นถึงการเจริญเติบโตของรัศมีที่ความลึกใต้ตัวแปรกลางพื้นผิวที่
ถูกยิงในเชิงบวก การละลายของแร่ฟอสเฟตถูก
ตรวจพบในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีฟอสเฟตนินทรีย์ (กลูโคส
10 กรัม / l; NH4Cl 5 g / l; โซเดียมคลอไรด์ 1 กรัม / l; MgSO4.7H2O 1 กรัม / l; CaHPO4,
0.8 g / l; ค่า pH 7.2) เป็นรัศมีที่ชัดเจนรอบแบคทีเรียหลังจาก
48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 28 ° C (Kuklinsky-Sobral et al., 2004) กรด indoleacetic (IAA)
การผลิตได้รับการวิเคราะห์ในสารละลายของโพรไบโอ-แก้ไข
กลางโดย colorimetry กับน้ำยา Salkowski ตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น ๆ
(โฉบและ Kremer, 1995) เหนียวแน่นของเชื้อไปยัง
พื้นผิว abiotic เมื่อได้ศึกษาการเจริญเติบโตคงที่ในสไตรีน
เอลิซา microplates และการย้อมสีของเซลล์ยึดติดด้วยคริสตัล
สีม่วง ปริมาณของเซลล์ผิวที่แนบมาเป็นสัดส่วนกับ
A650 ของการแก้ปัญหาที่ได้รับหลังการละลายสีม่วงคริสตัลผูกพัน
กับเอทานอล (แจ็คสัน et al., 2002) กิจกรรมของเชื้อปฏิปักษ์
กับ phytopathogens ถูกตรวจสอบในการตรวจแผ่นคู่
(Ongena et al., 1999) ชิ้นส่วนของวุ้นกับเชื้อรา Fusarium oxysporum var.
radicis-lycopersici สายพันธุ์ 22 เส้นใยหรือ Curvularia SP เส้นใย
ที่แยกได้จากเมล็ดข้าว CT6919 ที่ถูกเก็บไว้ในศูนย์
ของแผ่น potato dextrose หลังจากนั้น 3 วันของการบ่มที่อุณหภูมิห้อง
ในที่มืดแต่ละแยกแบคทีเรียถูกลายตรงข้าม
ขอบของแผ่น (1 แยกแผ่นละ) ที่แคลิฟอร์เนีย 3 ซม. ห่างจาก
เชื้อเชื้อรา สำหรับการเป็นปรปักษ์กันเพื่อ Pythium ultimum ความเครียด 67-1,
จานข้าวมอลต์วุ้นถูกลายแรกกับแต่ละแยกบ่มเป็นเวลา
3 วันที่อุณหภูมิห้องในที่มืดแล้วชิ้นส่วนของมอลต์
วุ้นที่มีเส้นใยพี ultimum ถูกวางในศูนย์
การยับยั้งการเจริญเติบโตของ phytopathogen ถูกกำหนดสายตาหลังจาก
7 วันของการบ่มต่อไปและคะแนนบวกถ้าแยกแบคทีเรีย
กำหนดเขตการยับยั้งการเจริญเนื่องจากการแพร่กระจายของสาร
สาร แผ่นโดยไม่ต้องวัฒนธรรมแบคทีเรียใด ๆ ที่ทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การคัดเลือกพืชกิจกรรมโปรไบโอติกความสามารถในการแยกการแก้ไข 2 บรรยากาศการทดสอบหมวกสกรูหลอดทดลองที่มีไนโตรเจนฟรี nfb กึ่งแข็งปานกลาง ( Okon และal . , 1977 ) หลังจากบ่มเป็นเวลา 7-10 วัน ที่ 28 องศา C , เลทแสดงการเจริญเติบโตของรัศมีที่ตัวแปรความลึกใต้พื้นผิวขนาดกลางให้คะแนนเป็นบวก การสกัดแร่ฟอสเฟต คือที่พบในอาหารวุ้นที่มีฟอสเฟตอนินทรีย์ ( กลูโคส10 g / l ; 4 . , 5 กรัม / ลิตร เกลือแกง 1 กรัม / ลิตร mgso4.7h2o 1 กรัม / ลิตร cahpo4 ,0.8 กรัม / ลิตร ; pH 7.2 ) เป็นรัศมีใสรอบโคโลนีแบคทีเรีย หลังจาก48 ชั่วโมง 28 ° C ( kuklinsky sobral et al . , 2004 ) นโดอะซีติก แอซิค ( IAA )ใช้ในการผลิตสูงของทริปโตเฟน แก้ไขขนาดกลาง โดยเม็ดกับ salkowski รีเอเจนต์ , ตามที่อธิบายไว้ในที่อื่น ๆ( Sarw ā r และ ครีเมอร์ , 1995 ) ส่วนการติดแน่นของสายพันธุ์ที่จะสิ่งมีชีวิตบนพื้นผิวได้ศึกษาการเจริญเติบโตคงที่ในพอลิสไตรีนmicroplates staining ) และเซลล์ของปฏิบัติตามด้วยคริสตัลไวโอเล็ต จํานวนของพื้นผิวที่ได้สัดส่วนกับเซลล์การ a650 ของโซลูชั่นที่ได้จากการละลายผลึกสีม่วงผูกด้วยเอทานอล ( Jackson et al . , 2002 ) ส่วนกิจกรรมของเชื้อปฏิปักษ์กับ phytopathogens ถูกสอบสวนในจานสองพยายาม( ongena et al . , 1999 ) ชิ้นส่วนของวุ้นกับ Fusarium oxysporum var .radicis lycopersici สายพันธุ์ 22 เส้นใยหรือเส้นใย Curvularia sp .ที่แยกได้จาก ct6919 ข้าวเมล็ดฝากบนศูนย์ของ Potato Dextrose จาน หลังจาก 3 วันบ่มที่อุณหภูมิห้องในที่มืด , แบคทีเรียที่แยกเป็นแต่ละลายอยู่ตรงข้ามขอบของจาน ( 1 แยกต่อจาน ) ที่ประมาณ 3 ซม. ห่างจากเชื้อราเชื้อ . เพื่อกันเชื้อราสายพันธุ์ 67-1 ultimum ,อาหารจานแรกคือมอลต์ลายแต่ละแยก , แยกสำหรับ3 วัน ที่อุณหภูมิห้อง ในที่มืด แล้วชิ้นส่วนของมอลต์อาหารที่มีเส้นใย P ultimum ฝากในศูนย์การยับยั้งการเจริญเติบโต phytopathogen มุ่งมั่น สายตาหลัง7 วัน 1 ต่อไป และได้คะแนนบวก ถ้าแบคทีเรียไอโซเลทมุ่งมั่นเติบโตบริเวณยับยั้งเนื่องจากการแพร่กระจายของสำคัญสาร . แผ่นไม่มีแบคทีเรียวัฒนธรรม ทำหน้าที่ควบคุม