To confirm presence, microorganisms

To confirm presence, microorganisms were stained with fresh
4,6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI) staining
solution (100mM Tris–HCl [pH 7.2], 0.9M NaCl, and
25 mg DAPI per 1mL H2O) for 2 min. Fluorescence of stained
microorganisms was visualized using an upright epifluorescence
microscope (Nikon model E-600, Melville, NY) equipped with
a digital CCD camera (Spot Advanced RT Monochrome, Diagnostic
Instruments, Sterling Heights, MI). Digital images were
captured and exported for analysis with MetaMorph Imaging
software (version 4.6, Universal Imaging Corp., Downingtown
PA). All paraffin surfaces were examined at 40× magnification
and an average often random microscope fields (images)
were collected from each chip to ensure a total count of at
least 250 objects from each paraffin surface. Semi-automated
image analysis included manual thresholding with and without
the use of the unsharp mask for enhanced edge detection of
objects, followed by integrated morphometry analysis of a suite
of parameters.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อยืนยันสถานะ จุลินทรีย์มีสีสดด้วย4, 6-diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI) ย้อมสีโซลูชั่น (100 มม.ตรี – HCl [pH 7.2], 0.9 M NaCl และ25 มิลลิกรัม DAPI ต่อ 1 mL H2O) สำหรับ 2 นาที Fluorescence ของสีจุลินทรีย์มี visualized ใช้ epifluorescence ตรงกล้องจุลทรรศน์ (Nikon รุ่น E-600, Melville, NY) พร้อมกล้อง CCD ดิจิทัล (จุดขั้นสูง RT พิมพ์ขาว-ดำ วินิจฉัยเครื่องมือ ไฮท์สเตอร์ลิง MI) รูปภาพดิจิทัลได้จับ และส่งออกสำหรับการวิเคราะห์ ด้วยภาพ MetaMorphซอฟต์แวร์ (เวอร์ชัน 4.6 สากลภาพ corp. DowningtownPA) พื้นผิวพาราฟินทั้งหมดถูกตรวจสอบที่ขยาย× 40และมีค่าเฉลี่ยกล้องจุลทรรศน์มักสุ่ม (ภาพ)ได้รวบรวมจากแต่ละชิให้รวมจำนวนที่อย่างน้อย 250 วัตถุจากแต่ละพื้นผิวพาราฟิน กึ่งอัตโนมัติวิเคราะห์ภาพรวม thresholding ด้วยตนเองมี และไม่มีการใช้รูปแบบการ unsharp ตรวจพิเศษขอบวัตถุ ตามวิเคราะห์ morphometry รวมชุดพารามิเตอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อยืนยันการปรากฏตัวของจุลินทรีย์ที่ถูกย้อมด้วยสีสด
4, 6 diamidino-2-phenylindole dihydrochloride (DAPI)
การย้อมสีการแก้ปัญหา(100 มม Tris-HCl [พีเอช 7.2], โซเดียมคลอไรด์ 0.9 เมตรและ
25 มิลลิกรัมต่อ 1 mL DAPI H2O) เป็นเวลา 2 นาที . เรืองแสงสีของจุลินทรีย์ที่ได้รับการมองเห็นการใช้ epifluorescence ตรงกล้องจุลทรรศน์(Nikon รุ่น E-600, เมลวิลล์, นิวยอร์ก) พร้อมกับกล้องดิจิตอลที่CCD (จุดขาวดำ RT ขั้นสูง, การวินิจฉัยเครื่องมือ, Sterling Heights, MI) ภาพดิจิตอลที่ถูกจับและส่งออกสำหรับการวิเคราะห์ที่มีการถ่ายภาพ MetaMorph ซอฟแวร์ (รุ่น 4.6, ยูนิเวอร์แซถ่ายภาพคอร์ป, ดาวนิงตันPA) ทุกพื้นผิวพาราฟินมีการตรวจสอบที่ 40 ×ขยายและโดยเฉลี่ยมักสาขากล้องจุลทรรศน์แบบสุ่ม(ภาพ) ที่ถูกเก็บรวบรวมจากแต่ละชิปเพื่อให้แน่ใจว่าการนับรวมอย่างน้อย 250 วัตถุจากพื้นผิวแต่ละพาราฟิน กึ่งอัตโนมัติการวิเคราะห์ภาพรวม thresholding คู่มือที่มีและไม่มีการใช้หน้ากากไม่ชัดในการตรวจหาขอบที่เพิ่มขึ้นของวัตถุตามด้วยการวิเคราะห์morphometry บูรณาการของชุดของพารามิเตอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อยืนยันตน จุลินทรีย์ถูกย้อมด้วยสีสด
4  6-diamidino-2-phenylindole , : ( dapi ) 4
( 100 บริษัท โซลูชั่น – กรดไฮโดรคลอริก pH 7.2 0.9m [ ] , NaCl และ
25 มิลลิกรัมต่อ 1ml dapi H2O ) 2 นาทีเรืองแสงของจุลินทรีย์ คือ มองเห็นคราบ
โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ epifluorescence
ตรง ( e-600 Nikon รุ่น , Melville , NY ) พร้อมกับ
กล้อง CCD ดิจิตอลขั้นสูง RT จุดเดียว , การวินิจฉัย
เครื่องมือ Sterling Heights , มิ ) ภาพดิจิตอลที่ถูกจับและถูกวิเคราะห์ด้วย

( ภาพซอฟต์แวร์ metamorph รุ่น 4.6 Universal Imaging . เขต
PA ) พื้นผิวพาราฟินทั้งหมดถูกตรวจสอบที่ 40 ×ขยาย
และเขตข้อมูลกล้องจุลทรรศน์สุ่มมักจะเฉลี่ย ( ภาพ )
รวบรวมจากแต่ละชิปเพื่อให้แน่ใจว่าทั้งหมดนับจากที่
อย่างน้อย 250 วัตถุจากพาราฟินแต่ละพื้นผิว การวิเคราะห์ภาพแบบกึ่งอัตโนมัติ
รวมคู่มือปรับกับไม่
ใช้หน้ากากไม่ชัดเพื่อเพิ่มการตรวจหาขอบวัตถุของ
ตามด้วยการวิเคราะห์แบบบูรณาการ morphometry สวีท
ของพารามิเตอร์