M. aeruginosa extracts were obtaine

M. aeruginosa extracts were obtained according to the method described by
Moreno et al. (2004). Freeze dried cells (0.05 g) were mixed with 10 ml of 0.1 M
acetic acid followed by 20 ml of a mixture of methanol–chloroform (1:1, v/v),
sonicated in a bath and stirred three times at room temperature. The mixture was
centrifuged at 5000 rpm, the top aqueous phase collected and concentrated in a
rotary. The residue containing microcystins (MCs) was subsequently solubilized in
500 ml of methanol (100%, v/v). The MC-LR was quantified following modified
versions (Ramanan et al., 2000; Xie and Park, 2007), using the reference MC-LR
with 95% purity supplied by Alexis (San Diego, CA, USA). The limit of detection of
this compound in the HPLC-DAD system is 0.3 mg/L. The chromatographic system
consisted of a Waters Alliance e2695 high-pressure liquid chromatography
equipped with a photodiode array detector 2998. A reversed phase column (Merck
Lichrospher RP-18 endcapped, 25 cm 4.6 mm, 5 mm) equipped with a guard
column (Merck Lichrospher RP-18 endcapped, 4 4 mm, 5 mm) both kept at 40 1C
were used for MC-LR quantification. The gradient elution utilized methanol and
1974 A. Prieto et al. / Ecotoxicology and Environmental Safety 74 (2011) 1973–1980
water both acidified with 0.1% TFA with a flow rate of 0.9 ml/min. The injected
volume was 20 ml. The PDA range was 210–400 nm, with a fixed wavelength at
238 nm. The method linearity was achieved between 0.13 and 10 ppm MC-LR.
After analysis the concentration of MC-LR obtained from lyophilized cells was
430 mg MC-LR/g lyophilized material. The extract was diluted to a final concentration
of 50 mg MC-LR/L for use in the experiment

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

M. aeruginosa
สารสกัดที่ได้รับเป็นไปตามวิธีการที่อธิบายโดยโมเรโน, et al (2004) ตรึงเซลล์แห้ง (0.05 กรัม) ได้รับการผสมกับ 10 มล. 0.1 M
กรดอะซิติกตามด้วย 20 มิลลิลิตรมีส่วนผสมของเมทานอล-คลอโรฟอร์ม (1: 1, v / v),
sonicated ในห้องอาบน้ำและขยับสามครั้งที่อุณหภูมิห้อง ส่วนผสมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 5000 รอบต่อนาทีในช่วงน้ำด้านบนที่เก็บรวบรวมและเข้มข้นในแบบหมุน ที่เหลือมี microcystins (พิธีกร) ถูกละลายในภายหลัง500 มล. ของเมทานอล (100% v / v) MC-LR ถูกวัดต่อไปนี้มีการปรับเปลี่ยนรุ่น(Ramanan et al, 2000;. Xie และสวน 2007) โดยใช้การอ้างอิง MC-LR ที่มีความบริสุทธิ์ 95% ที่จัดทำโดยอเล็กซิส (ซานดิเอโก, CA, USA) ขีด จำกัด ของการตรวจสอบของสารในระบบHPLC-DAD นี้เป็น 0.3 มิลลิกรัม / ลิตร ระบบโครมาประกอบด้วยพันธมิตร e2695 น้ำแรงดันสูงของเหลว chromatography พร้อมกับอาเรย์โฟโตไดโอดเครื่องตรวจจับ 2998. ตรงกันข้ามคอลัมน์เฟส (เมอร์คLiChrospher RP-18, 25 ซม. 4.6 มมมม 5) พร้อมกับยามคอลัมน์(เมอร์ค LiChrospher RP-18 4 4 มิลลิเมตร 5 มิลลิเมตร) ทั้งสองเก็บไว้ที่ 40 1C ถูกนำมาใช้สำหรับปริมาณ MC-LR เมทานอลที่ใช้ชะลาดและ1974 เอฆี et al, / ecotoxicology สิ่งแวดล้อมและความปลอดภัย 74 (2011) 1973-1980 น้ำทั้งกรดกับ TFA 0.1% โดยมีอัตราการไหล 0.9 มล. / นาที ฉีดปริมาณ 20 มล. เป็น ช่วง PDA เป็น 210-400 นาโนเมตรที่มีความยาวคลื่นคงที่238 นาโนเมตร เชิงเส้นวิธีการที่ประสบความสำเร็จระหว่าง 0.13 และ 10 ppm MC-LR. หลังจากการวิเคราะห์ความเข้มข้นของ MC-LR ที่ได้จากเซลล์แห้งเป็น430 มิลลิกรัม MC-LR / กรัมวัสดุที่แห้ง สารสกัดที่จะถูกเจือจางความเข้มข้นสุดท้าย50 มิลลิกรัม MC-LR / ลิตรสำหรับใช้ในการทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

M . aeruginosa สกัดได้ตามวิธีการที่อธิบายโดย
Moreno et al . ( 2004 ) ตรึงแห้งเซลล์ ( 0.05 กรัม ) ผสม 10 มิลลิลิตรของกรดความเข้มข้น 0.1 M
ตามด้วย 20 มิลลิลิตร ผสมเมทานอลคลอโรฟอร์ม ( 1 : 1 ) , V / V )
sonicated ในอ่างและคน ครั้งที่สาม ที่อุณหภูมิห้อง ส่วนผสม
ระดับ 5000 รอบต่อนาทีบนเฟสน้ำเก็บและความเข้มข้นใน
โรตารี่ กากที่มีไมโครซิสติน ( MCS ) ต่อมาได้สร้างใน
500 มล. ของเมทานอล ( 100 % v / v ) เป็นวัดที่ mc-lr ต่อไปนี้
ฉบับแก้ไข ( ramanan et al . , 2000 ; เซี่ยและสวนสาธารณะ , 2007 ) , ใช้อ้างอิง mc-lr
95% ความบริสุทธิ์ให้อเล็กซิส ( San Diego , CA , USA ) ขีดจำกัดของการตรวจหา
สารนี้ในระบบ hplc-dad เป็น 0.3 มก. / ล.
ระบบโครมาโทกราฟีประกอบด้วยกลุ่มพันธมิตร e2695 น้ำแรงดันสูง chromatography เหลว
พร้อมโฟโตไดโอดเรย์ตรวจจับ 2998 . เป็นการกลับเฟสคอลัมน์ ( Merck
lichrospher rp-18 endcapped 25 ซม. 4.6 มม. 5 มม. ) พร้อมการ์ด
คอลัมน์ ( Merck lichrospher rp-18 endcapped 4 4 5 มม. มม. ) ทั้งสองไว้ที่ 40 c
นำมา mc-lr ปริมาณ . การไล่ระดับสี ( ใช้เมทานอล
1974 . ี้ ปรีเ ต et al ./ ecotoxicology และความปลอดภัยสิ่งแวดล้อม 74 ( 2011 ) 1973 – 1980
น้ำทั้งกับ 0.1% ปรับระดับด้วยอัตราการไหล ( มล. / นาที ฉีด
ปริมาณ 20 มล. PDA ช่วง 210 – 400 นาโนเมตร ที่มีความยาวคลื่นคงที่ที่
254 นาโนเมตร วิธีการตรวจวัดความระหว่าง 0.13 และ 10 ppm mc-lr .
หลังจากการวิเคราะห์ความเข้มข้นของ mc-lr ได้รับจากไลโอเซลล์คือ
mc-lr 430 มิลลิกรัม / กรัมโปรตีนวัสดุ สารเจือจางในความเข้มข้น 50 มิลลิกรัม mc-lr สุดท้าย
/ L เพื่อใช้ในการทดลอง