Recombinant plasmids containing the preprochymosin coding sequence provided a choice of genes for expression in Escherichia coli-i.e., preprochymosin, prochymosin, or chymosin.
Preprochymosin and chymosin were ruled out for the following reasons.
For preprochymosin, the E. coli cell would have to recognize the eukaryotic signal peptide and process it accurately to prochymosin, which would then be found in the periplasmic
space.
Despite the fact that E. coli processes the rat preproinsulin gene in this manner (7), it does not, apparently, process preinterferon-a (8), preinterferon-f3 (9), or pregrowth hormone
(10) in the same way. Direct expression of the chymosin gene would be expected to lead, by analogy with human growth hormone
(11), to production of chymosin containing an additional
methionine residue at the NH2 terminus ([Met]chymosin). Apart
from possible deleterious effects of the production of active
chymosin in E. coli, there was also the possibility that an NH2-terminal methionine would alter the activity or tertiary structure
of the enzyme. The expression of prochymosin, on the other
hand, offered positive advantages.
Plasmids recombinant ประกอบด้วยรหัสลำดับที่ให้เลือกของยีนสำหรับนิพจน์ใน Escherichia coli เช่น preprochymosin, preprochymosin, prochymosin หรือ chymosinPreprochymosin และ chymosin ถูกปกครองออกด้วยเหตุผลต่อไปนี้ สำหรับ preprochymosin เซลล์ E. coli จะต้องรู้จักเพปไทด์ eukaryotic สัญญาณ และการประมวลผลอย่างถูกต้องเพื่อ prochymosin ซึ่งจะพบได้ในใน periplasmic แล้วพื้นที่ ทั้ง ๆ ที่ E. coli กระบวนยีน preproinsulin หนูในลักษณะนี้ (7), เห็นได้ชัด การ preinterferon a (8), ฮอร์โมน preinterferon-f3 (9), หรือ pregrowth(10) ในลักษณะเดียวกัน นิพจน์โดยตรงของยีน chymosin จะคาดว่านำ โดยเปรียบเทียบกับฮอร์โมนเจริญเติบโตของมนุษย์(11), การผลิตของ chymosin ประกอบด้วยเพิ่มเติมสารตกค้าง methionine ที่นัส NH2 (chymosin [เม็ท]) ออกจากกันจากผลร้ายที่เป็นไปได้ของการผลิตที่ใช้งานอยู่chymosin ใน E. coli มียังความเป็นไปได้ว่า methionine NH2-เทอร์มินัลที่จะเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของกิจกรรมหรือตติยของเอนไซม์ ค่าของ prochymosin อื่น ๆมือ เสนอข้อดีบวก
การแปล กรุณารอสักครู่..

พลาสมิดที่มียีนรหัสลำดับ preprochymosin ให้เลือกยีนแสดงออกในเชื้อ Escherichia coli-i.e. preprochymosin prochymosin , , , หรือเศรษฐศาสตร์วิศวกรรม .
preprochymosin เศรษฐศาสตร์วิศวกรรมและมีการปกครองออกสำหรับเหตุผลต่อไปนี้ สำหรับ preprochymosin
, E . coli เซลล์จะต้องตระหนักถึงความแตกต่างระหว่างสัญญาณและกระบวนการที่ถูกต้องเพื่อ prochymosin เปปไทด์ ,ซึ่งจะพบในพื้นที่ periplasmic
แม้จะมีความจริงที่ว่า E . coli กระบวนการหนู preproinsulin ยีนในลักษณะนี้ ( 7 ) , มันไม่ได้ เห็นได้ชัดว่า กระบวนการ preinterferon-a ( 8 ) , ( 9 ) , หรือ preinterferon-f3
ฮอร์โมน pregrowth ( 10 ) ในลักษณะเดียวกัน การแสดงออกของยีนไคโมซิน โดยคาดว่าจะเป็นตะกั่ว โดยการเปรียบเทียบกับฮอร์โมนการเจริญเติบโตของมนุษย์
( 11 )การผลิตเศรษฐศาสตร์วิศวกรรมที่มีการเพิ่มเติม
ยังมีกากที่ nh2 เทอร์มินัส ( [ กัน ] ไคโมซิน ) จากแยก
คงผลที่เป็นไปได้ของการผลิตงาน
ไคโมซินใน E . coli , ยังมีความเป็นไปได้ว่า nh2 terminal เมทไธโอนีนจะเปลี่ยนกิจกรรมหรือ
โครงสร้างตติยภูมิของเอนไซม์ การแสดงออกของ prochymosin บนมืออื่น ๆ
,เสนอข้อได้เปรียบในเชิงบวก
การแปล กรุณารอสักครู่..
