pH (25 C) X ml Y ml 5.8 4.0 46.06.0

pH (25 C) X ml Y ml

5.8 4.0 46.0
6.0 6.15 43.75
6.2 9.25 40.75
6.4 13.25 36.75
6.6 18.75 31.25
6.8 24.5 25.5
7.0 30.5 19.5
7.2 36.0 14.0
7.4 40.5 9.5
7.6 43.5 6.5
7.8 45.75 4.25
8.0 47.35 2.65

Osmolarity is adjusted by varying the molarity of phosphates or by the addition of sucrose, glucose or sodium chloride.

At pH 7.2:

0.10M = 226 mOs (milliosmoles)
0.05M = 118 mOs
0.075 = 180 mOs
0.15M = 350 mOs

II. Cacodylate Buffer (arsenate buffer) pH 5-7.4

Advantages:

1. Easy to prepare.

2. Stable during storage for long periods of time.

3. Does not support growth of microorganisms.

4. Precipitates usually do not occur. Precipitates do not occur at low concentrations of calcium.

Disadvantages:

1. Toxic. Contains arsenic.

2. Unpleasant smell.

Preparation of Buffer:

Stock solutions:

0.2M sodium cacodylate 1 liter

Na(CH3)2As02*3H20 (MW = 195.92) 42.8 gm

+ ddH20 to make 1 liter

0.2M HC1

Conc. HC1 (36-38%) 10 ml
ddH20 603 ml

Working buffer: 0.1M 100 ml

Adjust 50 ml of 0.2M sodium cacodylate to desired pH with 0.2M HC1. Dilute to 100 ml with ddH20 or dilute 1:1 with fixative.

pH 0.2M HC1 (ml)

6.4 18.3
6.6 13.3
6.8 9.3
7.0 6.3
7.2 4.2
7.4 2.7

Buffer may also be made with cacodylic acid.

Stock solutions:

0.2M cacodylic acid 1 liter

(CH3)2AsO2H (MW = 138.0) 27.6 gm
+ ddH20 to make 1 liter

0.2M NaOH 100 ml

NaOH (MW = 40) 0.8 gm

+ ddH20 to make 100 ml

Working buffer: 0.1M

Adjust 50 ml of 0.2M cacodylic acid to desired pH with 0.2M NaOH. Dilute to 100 ml with ddH2 or dilute 1:1 with fixative.

III. Veronal-acetate Buffer (Michaelis buffer)

Advantages:

Useful for block staining with uranyl acetate since precipitates do not form.

Disadvantages:

1. Reacts with aldehydes.

2. Poor buffer at physiological pH.

3. Supports growth of micro-organisms.

4. Contains barbiturate.

Preparation of Buffer:

Stock solution: 0.28M 100 ml

Sodium veronal (barbitone sodium)

C8H1103N2Na (MW = 206.18) 2.89 gm

Sodium acetate (anhydrous)
CH3C00Na (MW = 82.03) 1.15 gm
or
Sodium acetate (hydrated)
CH3C00Na*3H20 (MW = 136.09) 1.90 gm

+ ddH2H20 to make 100 ml

Solution is stable and may be stored for some months at 4 C.

Worki

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ค่า pH (25 C) X มิลลิลิตร ml Y 5.8 4.0 46.06.0 6.15 43.756.2 9.25 40.756.4 13.25 36.756.6 18.75 31.256.8 24.5 25.57.0 30.5 19.57.2 36.0 14.07.4 40.5 9.57.6 43.5 6.57.8 45.75 4.258.0 47.35 2.65 มีการปรับปรุง Osmolarity โดยโมลาริตีของฟอสเฟตที่แตกต่างกัน หรือ โดยการเติมน้ำตาลซูโครส กลูโคส หรือโซเดียมคลอไรด์ ใน pH ที่ 7.2: 0.10 M = 226 mOs (milliosmoles)0.05 M = 118 mOs0.075 = 180 mOsMOs 0.15 M = 350II. Cacodylate บัฟเฟอร์ (บัฟเฟอร์ arsenate) ค่า pH 5-7.4 ข้อดี: 1 ง่ายต่อการเตรียมการ 2. มีเสถียรภาพในระหว่างที่เก็บระยะเวลานาน 3. ไม่สนับสนุนการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ 4. precipitates มักจะไม่เกิดขึ้น Precipitates ไม่เกิดขึ้นที่ความเข้มข้นต่ำของแคลเซียม ข้อเสีย: 1. สารพิษ ประกอบด้วยสารหนู 2. ไม่มีกลิ่นเหม็น การเตรียมบัฟเฟอร์: ละลาย: 0.2 M โซเดียม cacodylate 1 ลิตร นา (CH3) 2As02 * 3 ชม. 20 (MW = 195.92) 42.8 กรัม + ddH20 ให้ 1 ลิตร 0.2 M HC1 เชื่อม HC1 (36-38%) 10 มล.ddH20 603 ml บัฟเฟอร์ที่ทำงาน: 0.1M 100 มล. ปรับ cacodylate โซเดียม 0.2 เมตรถึง pH ที่ต้องการด้วย 0.2 M HC1 50 มล. เจือจางไปกับ ddH20 100 มล. หรือเจือจาง 1:1 ด้วยตรึง ค่า pH 0.2M HC1 (ml) 6.4 18.36.6 13.36.8 9.37.0 6.37.2 4.27.4 2.7 นอกจากนี้ยังอาจทำบัฟเฟอร์กรด cacodylic ละลาย: 0.2 M กรด cacodylic 1 ลิตร (CH3) 2AsO2H (MW = 138.0) 27.6 กรัม+ ddH20 ให้ 1 ลิตร 0.2 M NaOH 100 มล. NaOH (MW = 40) 0.8 กรัม + ddH20 ให้ 100 มล. บัฟเฟอร์ที่ทำงาน: 0.1M ปรับ 50 มิลลิลิตรของกรดที่ต้องการวัดค่า pH ด้วย 0.2 M NaOH cacodylic 0.2M เจือจางไปกับ ddH2 100 มล. หรือเจือจาง 1:1 ด้วยตรึง III. Veronal acetate บัฟเฟอร์ (Michaelis บัฟเฟอร์) ข้อดี: มีประโยชน์สำหรับบล็อกที่ย้อมสี ด้วยอะซิเต uranyl เนื่องจากไม่ได้แบบ precipitates ข้อเสีย: 1. ทำปฏิกิริยากับอลดีไฮด์ 2. ยากจนบัฟเฟอร์ที่ pH ทางสรีรวิทยา 3. รองรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ 4. ประกอบด้วย barbiturate การเตรียมบัฟเฟอร์: แก้ไขปัญหาสต็อก: 0.28M 100 มล. Veronal โซเดียม (barbitone โซเดียม) C8H1103N2Na (MW = 206.18) 2.89 กรัม โซเดียมอะซิเตท (ได)CH3C00Na (MW = 82.03) 1.15 กรัมหรือโซเดียมอะซิเตท (ไฮเดรท)CH3C00Na * 3 ชม. 20 (MW = 136.09) 1.90 กรัม + ddH2H20 ให้ 100 มล. โซลูชั่นที่มีเสถียรภาพ และอาจเก็บไว้สำหรับบางเดือนที่ 4 c Worki

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พีเอช (25 C) x มล. หม่อมหลวง5.8 4.0 46.0 6.0 6.15 43.75 6.2 9.25 40.75 6.4 13.25 36.75 6.6 18.75 31.25 6.8 24.5 25.5 7.0 30.5 19.5 7.2 36.0 14.0 7.4 40.5 9.5 7.6 43.5 6.5 7.8 45.75 4.25 8.0 47.35 2.65 osmolarity จะถูกปรับโดยที่แตกต่างกัน molarity ฟอสเฟตหรือโดยการเติมน้ำตาลซูโครสกลูโคสหรือโซเดียมคลอไรด์ได้. ที่พีเอช 7.2: 0.10M = 226 MOS (milliosmoles) 0.05M = 118 MOS 0.075 = 180 MOS 0.15M = 350 MOS ครั้งที่สอง Cacodylate บัฟเฟอร์ (บัฟเฟอร์สารหนู) ค่า pH 5-7.4 ข้อดี: 1 ง่ายต่อการเตรียม. 2 มีความเสถียรระหว่างการเก็บรักษาเป็นเวลานานของเวลา. 3 ไม่สนับสนุนการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์. 4 ตกตะกอนมักจะไม่เกิดขึ้น ตกตะกอนไม่ได้เกิดขึ้นที่ระดับความเข้มข้นต่ำของแคลเซียม. ข้อเสีย: 1 เป็นพิษ มีสารหนู. 2 ที่ไม่พึงประสงค์กลิ่น. เตรียมบัฟเฟอร์: การแก้ปัญหาสต็อก: 0.2M โซเดียม cacodylate 1 ลิตรนา (CH3) 2As02 * 3H20 (MW = 195.92) 42.8 กรัม+ ddH20 เพื่อให้ 1 ลิตร0.2M HC1 Conc HC1 (36-38%) 10 มล. ddH20 603 มล. บัฟเฟอร์ที่ทำงาน: 0.1M 100 มล. ปรับ 50 มิลลิลิตร 0.2M โซเดียม cacodylate ค่าพีเอชที่ต้องการด้วย 0.2M HC1 เจือจาง 100 มล. กับ ddH20 หรือเจือจาง 1: 1. กับตรึงค่า pH 0.2M HC1 (มล.) 6.4 18.3 6.6 13.3 6.8 9.3 7.0 6.3 7.2 4.2 7.4 2.7 บัฟเฟอร์ยังอาจจะทำด้วยกรด cacodylic พบ. แก้ปัญหาสต็อก: 0.2M cacodylic พบกรด 1 ลิตร(CH3) 2AsO2H (MW = 138.0) 27.6 กรัม+ ddH20 เพื่อให้ 1 ลิตร0.2M NaOH 100 มล. NaOH (MW = 40) 0.8 กรัม+ ddH20 จะทำให้ขนาด 100 มลบัฟเฟอร์ที่ทำงาน: 0.1M ปรับ 50 มิลลิลิตร 0.2M กรด cacodylic พบ ค่าพีเอชที่ต้องการด้วย NaOH 0.2M เจือจาง 100 มล. กับ ddH2 หรือเจือจาง 1: 1. กับตรึงIII Veronal-acetate บัฟเฟอร์ (Michaelis บัฟเฟอร์) ข้อดี: เป็นประโยชน์สำหรับการย้อมสีบล็อกที่มีอะซิเตท uranyl ตั้งแต่ตกตะกอนไม่ได้แบบ. ข้อเสีย: 1 ทำปฏิกิริยากับ aldehydes. 2 บัฟเฟอร์ที่ไม่ดีที่ pH สรีรวิทยา. 3 รองรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์. 4 มีประสาท. เตรียมบัฟเฟอร์: การแก้ปัญหาสต็อก: 0.28M 100 มล. โซเดียม veronal (barbitone โซเดียม) C8H1103N2Na (MW = 206.18) 2.89 กรัมโซเดียมอะซิเตท (ปราศจากน้ำ) CH3C00Na (MW = 82.03) 1.15 กรัมหรือโซเดียมอะซิเตท (ไฮเดรท) CH3C00Na * 3H20 (MW = 136.09) 1.90 กรัม+ ddH2H20 เพื่อให้ 100 มล. โซลูชั่นมีเสถียรภาพและอาจถูกเก็บไว้เป็นเวลาหลายเดือนที่ 4 องศาเซลเซียสworki

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

pH ( 25 C ) X + Y มล5.8 4.0 ยัง6.0 6.15 43.756.2 9.25 40.756.4 13.25 36.756.6 18.75 ร้อยละ 31.256.8 สูง 25.530.5 19.5 7.07.2 36.0 14.07.4 สำหรับ 9.5รวม 6.5 ล้านบาท7.8 45.75 4.258.0 47.35 ออกไปำจะถูกปรับเปลี่ยนโมแลลิตีของฟอสเฟต หรือโดยการเติมน้ำตาลซูโครส กลูโคส หรือ โซเดียม คลอไรด์ที่ pH 7.2 :0.10m = 226 MOS ( milliosmoles )0.05m = 118 มอส0.075 = 180 มอส0.15m = 350 มอ2 . บัฟเฟอร์ ( Buffer จากนั้นนำต่อ 5-7.4 ) อข้อดี :1 . ง่ายต่อการเตรียม2 . มั่นคงระหว่างการเก็บรักษาได้เป็นเวลานาน3 . ไม่สนับสนุนการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์4 . ตะกอนมักจะไม่เกิดขึ้น ตะกอนไม่เกิดขึ้นที่ความเข้มข้นต่ำของแคลเซียมข้อเสีย :1 . ที่เป็นพิษ ประกอบด้วยสารหนู2 . ที่ไม่พึงประสงค์กลิ่นการเตรียมการของบัฟเฟอร์ :หุ้นโซลูชั่น :จากนั้นนำ 0.2m สารละลาย 1 ลิตรนา ( CH3 ) 2as02 * 3h20 ( Mw = 195.92 ) ผู้บริหารจีเอ็ม+ ddh20 ให้ 1 ลิตร0.2m สกัดเข้มข้น . สกัด ( 36-38 % ) 10 มิลลิลิตรddh20 603 กรัมทำงานบัฟเฟอร์ : 0.1m 100 มล.ปรับ 50 มิลลิลิตร จากนั้นนำ 0.2m โซเดียมที่ต้องการอ กับ 0.2m สกัด . เจือจางไป 100 ml กับ ddh20 หรือเจือจาง 1 : 1 กับฟิกเซทีฟ .0.2m สกัด ( ml ) อ6.4 รายงาน6.6 13.36.8 9.3ตัวละ7.2 4.27.4 2.7บัฟเฟอร์ยังอาจทำได้กับแคโคดิลิกแอซิด .หุ้นโซลูชั่น :0.2m แคโคดิลิกแอซิด 1 ลิตร( CH3 ) 2aso2h ( Mw = 138.0 ) 27.6 กรัม+ ddh20 ให้ 1 ลิตร0.2m NaOH 100 มล.NaOH ( Mw = 40 ) 0.8 กรัม+ ddh20 ให้ 100 มล.ทำงาน 0.1m บัฟเฟอร์ :ปรับปริมาตร 50 มิลลิลิตร 0.2m แคโคดิลิกแอซิด pH ที่ต้องการด้วย 0.2m NaOH เจือจางไป 100 ml กับ ddh2 หรือเจือจาง 1 : 1 กับฟิกเซทีฟ .veronal อะซิเตทบัฟเฟอร์ ( Buffer III มาก )ข้อดี :ที่เป็นประโยชน์สำหรับบล็อกย้อมด้วยยูเรนิลอะซิเตตตั้งแต่ precipitates ไม่ได้แบบฟอร์มข้อเสีย :1 . ปฏิกิริยากับอัลดีไฮด์ .2 . บัฟเฟอร์ pH ในร่างกายไม่ดี3 . สนับสนุนการเจริญเติบโตของสิ่งมีชีวิตขนาดเล็ก4 . มีบาบิทูเรต .การเตรียมการของบัฟเฟอร์ :โซลูชั่นหุ้น : 0.28m 100 มล.veronal ( barbitone โซเดียม ) โซเดียมc8h1103n2na ( Mw = 206.18 ) 2.89 กรัมโซเดียมอะซิเตต ( anhydrous )ch3c00na ( Mw = 82.03 ) 1.15 กรัมหรือโซเดียมอะซิเตต ( น้ำ )ch3c00na * 3h20 ( Mw = 136.09 ) 1.90 กรัม+ ddh2h20 ให้ 100 มล.โซลูชั่นที่ไม่มีเสถียรภาพ และอาจจะถูกเก็บไว้เป็นเวลาหลายเดือนที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสworki