Isolation of DNA: The presumptiveac

Isolation of DNA: The presumptive
actinomycetes cultures were grown in
Kusters broth for 7 days and about 2 mL of
the culture was centrifuged at 10,000 rpm for
2 min. The mycelia pellet was resuspended in
500 μL of 5M sodium chloride (NaCl). The
cells were centrifuged at 10,000 rpm for
30 sec and the pellet was resuspended with
500 μL of TE- Tris-EDTA buffer (10mM
Tris HCl and 1mM EDTA- pH 7.5)
containing 20 mg of lysozyme/mL and 20mg
of RNase/mL. The culture was sonicated for
2 min, 6 cycles. Then the tube was incubated
at 37°C for l hour. Following incubation, 250
μL of 0.5M Ethylenediaminetetraacetic acid,
250 μL TE containing 5mg of proteinase
K/mL, and 100 μL of Sodium dodecyl
sulphate were added to each tube and was
incubated at 37°C for l hour. The tubes were
mixed by inversion after the addition of 250
μL of 5M NaCl. Immediately about 200 μL
of cetyl trimethyl ammonium bromide
(CTAB) solution (10% CTAB and 0.7M
NaCl) was added, and the tubes were heated
in water bath at 65°C for 10 min. Cellular
debris was removed by centrifugation at 8000
rpm for 5 min, and the supernatant was
transferred to a fresh centrifuge tube. Protein
and lipids were removed by the addition of
0.3 volumes of phenol:chloroform and the
phases were mixed by inversion and
centrifuged at 12,000 rpm fro 5 min. Then the
aqueous phase

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกดีเอ็นเอ: แบบ presumptiveวัฒนธรรม actinomycetes ที่ปลูกในซุป Kusters วันและประมาณ 2 มล.วัฒนธรรมถูกเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาที2 นาที เม็ด mycelia ถูก resuspended ในΜL 500 5M โซเดียมคลอไรด์ (NaCl) การเซลล์ถูกเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาที30 วินาทีและเม็ดถูก resuspended ด้วยΜL 500 TE - ทริ-EDTA บัฟเฟอร์ (10mMทริสเรทติ้ง HCl และ EDTA-ค่า pH 7.5 มม.)ประกอบด้วย lysozyme การถูก/มล. 20 มิลลิกรัมและ 20 มิลลิกรัมของ RNase/มล. วัฒนธรรม sonicated สำหรับ2 นาที 6 รอบ จาก นั้นได้รับการกกหลอดที่ 37° C สำหรับชั่วโมง l กกไข่ต่อ 250ΜL 0.5 ม. Ethylenediaminetetraacetic กรดTE 250 μL ประกอบด้วย proteinase 5 มก.K/mL และ μL 100 ของโซเดียม dodecylซัลเฟตเพิ่มหลอด และเป็นได้รับการกกที่ 37° C l ชั่วโมง หลอดได้ผสมกลับหลังจากการเพิ่มของ 250ΜL ของ NaCl 5 เมตร เกี่ยวกับ 200 μL ทันทีของ cetyl trimethyl แอมโมเนียโบรไมด์โซลูชัน (CTAB) (10% CTAB และ 0.7 เมตรเพิ่ม NaCl) และท่อถูกทำให้ร้อนในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 65° C 10 นาทีมือถือเศษออกไปหมุนเหวี่ยงที่ 8000รอบต่อนาที 5 นาที และ supernatant ถูกโอนไปหลอดหมุนเหวี่ยงสด โปรตีนและไขมันออก โดยการเพิ่มปริมาณ 0.3 ของฟีนอล: คลอโรฟอร์มและระยะถูกผสม โดยการกลับ และเหวี่ยงที่ 12,000 rpm จาก 5 นาที นั้นอควี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การแยกดีเอ็นเอสันนิษฐาน
วัฒนธรรม actinomycetes ถูกปลูกใน
Kusters น้ำซุปเป็นเวลา 7 วันและประมาณ 2 มล
วัฒนธรรมที่ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีสำหรับ
2 นาที เม็ดเส้นใยถูก resuspended ใน
500 ไมโครลิตรของ 5M โซเดียมคลอไรด์ (NaCl)
เซลล์ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาที
30 วินาทีและเม็ดถูก resuspended กับ
500 ไมโครลิตรของ TE- Tris-EDTA บัฟเฟอร์ (10 mM
Tris HCl และ 1mM EDTA- ค่า pH 7.5)
มี 20 มิลลิกรัมของไลโซไซม์ / มิลลิลิตรและ 20mg
ของ RNase / มิลลิลิตร วัฒนธรรมถูก sonicated สำหรับ
2 นาที 6 รอบ แล้วหลอดถูกบ่ม
ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา L ชั่วโมง ต่อไปนี้การบ่ม 250
ไมโครลิตรของ 0.5M กรด Ethylenediaminetetraacetic,
250 ไมโครลิตร TE มี 5mg ของโปร
K / ml และ 100 ไมโครลิตรของโซเดียมโดเดซิล
ซัลเฟตถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละหลอดและได้รับการ
บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสสำหรับ L ชั่วโมง หลอดถูก
ผสมโดยผกผันหลังจากที่นอกเหนือจาก 250
ไมโครลิตรของ 5M โซเดียมคลอไรด์ ทันทีประมาณ 200 ไมโครลิตร
ของ cetyl ไตรเมทิลแอมโมเนียมโบรไมด์
(CTAB) วิธีการแก้ปัญหา (10% CTAB และ 0.7m
โซเดียมคลอไรด์) คือการเพิ่มและหลอดถูกความร้อน
ในอ่างน้ำที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที โทรศัพท์มือถือ
เศษถูกลบออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 8000
รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาทีและสารละลายที่ถูก
ถ่ายโอนไปยังหลอด centrifuge สด โปรตีน
และไขมันถูกถอดออกโดยนอกเหนือจาก
0.3 ปริมาณฟีนอล: คลอโรฟอร์มและ
ขั้นตอนที่ถูกผสมโดยผกผันและ
หมุนเหวี่ยงที่ 12,000 รอบต่อนาทีเทียวไปเทียวมา 5 นาที แล้ว
เฟสน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกดีเอ็นเอ : ความเป็นไปได้เชื้อแอคติโนมัยซีสโตในkusters Broth เป็นเวลา 7 วันและ 2 มิลลิลิตรวัฒนธรรม คือ ที่ระดับ 10 , 000 RPM สำหรับ2 นาทีก็ resuspended ในแต่ละเม็ด500 μ l 5m โซเดียมคลอไรด์ ( NaCl ) . ที่อยู่ที่ 10 , 000 รอบต่อนาทีระดับเซลล์30 วินาที และมี resuspended กับเม็ด500 μ l te - ทริส EDTA บัฟเฟอร์ ( !บริษัทไอ - 1mm EDTA pH 7.5 ) และประกอบด้วย 20 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรและไลโซไซม์จากของเลส / ml และวัฒน sonicated สำหรับ2 นาที 6 รอบ แล้วหลอดมันบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง . ต่อไปนี้ระยะเวลา 250μ 0.5 ลิตรบอนกรด250 μผมประกอบด้วย 5 mg ของโปรเต้+ K / L และ 100 μโซเดียมโดซัลเฟตถูกเพิ่มไปยังแต่ละหลอดและบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง . หลอดคือผสมโดยการเพิ่ม 250 หลังμ l 5m เกลือ ทันที 200 μ lของไตรซิทิลแอมโมเนียมโบรไมด์( ctab ) สารละลาย ( ctab 10% และ 0.7mโซเดียมคลอไรด์ ( NaCl ) ถูกเพิ่มเข้ามา และท่อ คือ อุ่นในน้ำร้อนอุณหภูมิ 65 องศา C นาน 10 นาที เซลลูลาร์เศษออกด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 8000รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที และสูงคือย้ายไปยังหลอด centrifuge สด โปรตีนและไขมันออกโดยนอกเหนือจาก0.3 ปริมาณฟีนอล : คลอโรฟอร์ม และขั้นตอนที่ถูกผสมโดยการและระดับที่ 12 , 000 รอบต่อนาทีมา 5 นาทีแล้วเฟสน้ำ